甲基苯丙胺不同给药时程及天麻素的干预对建立大鼠条件性位置偏爱模型的影响

目的 比较甲基苯丙胺不同给药时程对建立大鼠条件性位置偏爱 (CPP) 模型的影响及天麻素对甲基苯丙胺CPP模型的干预作用。方法 采用甲基苯丙胺10 mg/kg腹腔注射 (ip) 10 d, 确认动物产生CPP效应后, 再分别注射7 d、14 d、28 d建立3组不同依赖时程的大鼠甲基苯丙胺依赖模型;采用天麻素10 mg/kg腹腔注射28 d进行干预, 随后再进行CPP检测, 测定天麻素给药对大鼠在伴药箱停留时间的影响。结果 与对照组比较, 甲基苯丙胺给药7 d、14 d、28 d 3组大鼠在伴药箱停留时间均明显延长 (P<0.05) ;14 d组与7 d组、28 d组比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 7 d组与28 d组比较, 差异无统计学意义 (P> 0.05) ;甲基苯丙胺+天麻素组与甲基苯丙胺组比较, 差异有统计学意义 (P<0.05) , 且天麻素干预组在伴药箱停留时间明显缩短。结论用甲基苯丙胺10 mg/kg腹腔注射给药, 7 d组、14 d组、28 d组均可诱导大鼠CPP效应的形成且给药14 d的大鼠CPP模型行为学改变较显著;天麻素干预具有缓解大鼠CPP效应的作用。     

天麻素对甲基苯丙胺诱导的神经元毒性损害的保护作用

目的以褪黑素(melatonin,MT)为阳性对照,研究天麻素(gastrodin,GAS)对褪黑素(melatonin,MT)诱导的皮质神经元毒性损害的保护作用。方法(1)以不同浓度梯度MA(methamphetamine,MA)处理细胞24 h,检测细胞活力值,确定MA最佳给药浓度;再分别以不同浓度GAS、MT提前2 h干预并确定最佳干预浓度。(2)将细胞随机分为对照组、MA组、GAS+MA组和MT+MA组,每组细胞3个复孔,TUNEL法检测凋亡率。(3)免疫荧光检测Caspase-3的表达。结果(1)MA的最佳给药浓度为0.5 mmol·L^-1;MA处理后皮质神经元有胞体变小、突触变细,胞体空泡化等形态学变化;(2)GAS和MT的最佳干预浓度分别为25 mg·L^-1,10μmol·L^-1;(3)GAS预先干预可以降低MA引起的细胞凋亡,减弱Caspase3的表达,与MT的干预作用效果比较无明显差异。结论MA对皮质神经元有毒性损害作用,导致细胞凋亡;GAS干预可缓解MA介导的神经元毒性损害,缓解凋亡,其保护作用与MT相当。     

南郑县：流动食品小摊贩有了合法“身份证”

一辆推车,一套厨具,几把椅子和几个小凳,这基本上是食品小摊贩的所有＂家当＂。他们活动于城市大街小巷,是经济社会发展的必要补充,在方便群众生活、丰富活跃市场、解决群众就业等方面起着积极作用。但因其数量繁多,流动性大,且从业人员文化水平较低,生产经营条件简陋,监管难度大而成为引发食品安全问题的一大隐患。目前南郑县流动食品摊贩300家左右,从业人员约500余人,年营业额约在300万元。     

天麻素干预甲基苯丙胺依赖大鼠星形胶质细胞、神经元变化及炎性因子IL-6、TNF-α的表达

目的 探讨天麻素对甲基苯丙胺 (MA) 依赖大鼠神经毒性损伤的治疗作用及其机制.方法 48只健康雄性SD大鼠随机分为3组, 每组16只.对照组 (ip生理盐水, 共8周) ;MA组 (连续4周每日1次ip给予MA 10 mg/kg;而后连续4周每日1次ip给予生理盐水) ;天麻素组 (连续4周每日1次ip给予MA 10 mg/kg;而后连续4周每日1次ip给予天麻素10 mg/kg) .采用刻板行为评分检测大鼠行为学变化;采用免疫荧光技术检测大鼠额叶皮质胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) 和神经元核蛋白 (NEUN) 的表达;采用RT-PCR和Western蛋白印迹法检测白介素6 (IL-6) 和肿瘤坏死因子α (TNF-α) 的表达变化.结果 MA组与对照组比较, 刻板行为评分显著升高 (P<0.01) , 天麻素组与MA组比较, 刻板行为评分显著降低 (P<0.01) .与对照组比较, MA组GFAP的表达增加, NEUN的表达减少;天麻素组与MA组比较, GFAP表达显著降低, NEUN表达增加.MA组与对照组比较, IL-6、TNF-α的表达均有不同程度增高, 差异有统计学意义 (P<0.01) , 天麻素组与MA组比较, IL-6、TNF-α的表达显著降低 (P<0.01) .结论 甲基苯丙胺依赖所致大鼠神经功能损害可能与星形胶质细胞活化及IL-6、TNF-α等炎性因子的高表达有关;天麻素可通过降低星形胶质细胞活化和降低IL-6、TNF-α的表达改善甲基苯丙胺依赖所致神经功能损害.     

实验动物房投资现状及减少运行费用的探讨

实验动物设施(在此我们称为生态动物饲养房或动物房),比其他类型的实验室环境更需要仔细和重点的工程工艺设计。稳定和高质量的动物生活环境是确保研究完善的关键所在。此外,通风系统必须为工作人员提供安全、舒适的工作环境。在维持房间正确压力的同时,还必须确保污浊空气的排出。     

不同剂量天麻素对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马中TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路的影响

  目的  探讨不同剂量的天麻素（Gastrodin,Gas）对甲基苯丙胺（Methamphetamine,Meth）依赖条件性位置偏爱（Conditioned place preference,CPP）大鼠海马中TLR4/MyD88/NF-κB通路的作用。  方法  建立Meth（10 mg/kg,ip,14 d）依赖大鼠CPP模型,采用低中高剂量的天麻素（10、30、100 mg/kg）干预14 d后,采用Western blotting和RT-qPCR方法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路中关键因子的蛋白和mRNA在海马中的表达水平。  结果  天麻素干预后TLR4、MyD88、NF-κB p65、TRAF6的蛋白和mRNA表达呈剂量依赖性降低 （P < 0.001、P < 0.01或P < 0.05）、p-NF-κB p65的蛋白表达呈剂量依赖性降低 （P < 0.01或P < 0.05） 、IκB-α的蛋白和mRNA表达呈剂量依赖性升高（P < 0.01或P < 0.05）,天麻素干预后p-IκB-α的蛋白表达降低（P < 0.01）。  结论  天麻素干预对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的神经炎症具有保护作用,且与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路密切相关。     

DA、5-HT及MAO在甲基苯丙胺和氯胺酮联合滥用依赖大鼠CPP效应中的表达量变化

目的观察DA、5-HT及MAO在甲基苯丙胺和氯胺酮联合应用致大鼠成瘾中的表达变化及其与依赖大鼠产生CPP效应的关系。方法随机将36只大鼠分为六组:正常对照组,甲基苯丙胺组(2 mg/kg),氯胺酮低剂量(15 mg/kg)组,氯胺酮中剂量(30 mg/kg)组,甲基苯丙胺+氯胺酮低剂量(2 mg/kg+15 mg/kg)组,甲基苯丙胺+氯胺酮中剂量(2 mg/kg+30 mg/kg)组,每组每天给予相应的药物,连续10 d,建立大鼠位置偏爱模型;ELISA检测DA、5-HT及MAO的表达。结果与正常对照组比较,给药组大鼠在伴药箱中逗留的时间均明显增多(P<0.01),成功建立位置偏爱模型。ELISA检测结果显示,在大鼠前额叶皮质、伏隔核、中脑腹侧被盖区中DA、5-HT及MAO的表达趋势基本相同;与正常对照组相比,MA组表达增强(P<0.01);与MA组相比,联用组的DA、5-HT及MAO表达均呈一致性降低(P<0.01)。结论 DA、5-HT及MAO表达水平降低与甲基苯丙胺和氯胺酮联合给药的依赖大鼠CPP效应没有显著提升有关。     

microRNA-132和Mecp2在甲基苯丙胺依赖中的作用

目的探讨miRNA-132及相关蛋白Mecp2、CREB在甲基苯丙胺(methamphetamine, MA)神经毒性中的作用。方法大鼠腹腔注射MA(10 mg·kg^-1·d^-1)建立1、2、4周3个不同依赖时程的MA依赖模型。取额叶皮质、海马,RT-qPCR检测miRNA-132、Mecp2 mRNA,Western blot检测Mecp2、p-Mecp2、CREB和p-CREB。结果在额叶皮质,miRNA-132、Mecp2 mRNA在MA依赖1、2、4周组表达均升高(P<0.05和P<0.01),Mecp2表达明显降低(P<0.01),Mecp2磷酸化水平则明显升高。在海马,miRNA-132呈降低趋势,在2、4周组明显降低(P<0.01);Mecp2 mRNA表达则明显升高(P<0.01);Mecp2在1周组表达升高(P<0.05),之后呈降低趋势,在4周组表达明显降低(P<0.05);Mecp2磷酸化水平在1周组降低(P<0.01),之后呈升高趋势,在2周组明显升高(P<0.01)。结论 MA可诱导miRNA-132异常表达。在额叶皮质,miRNA-132可能通过抑制mRNA的翻译,致Mecp2表达降低而发挥作用;但在海马,miRNA-132与Mecp2表达趋势未呈现反向对应关系,miRNA-132调节并不依赖于Mecp2。     

TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的影响

  目的  研究TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对甲基苯丙胺（methamphetamine,MA）依赖的条件性位置偏好（conditioned place preference,CPP）大鼠海马的影响,同时采用特异性抑制剂TAK-242抑制Toll样4受体（Toll-like receptor 4,TLR4）,减轻MA依赖诱导的海马神经炎症。  方法  建立MA（10 mg/kg,ip,14 d）依赖大鼠CPP模型,分别为生理盐水组、MA组、TAK-242组、MA+TAK-242组。TAK-242组和MA+TAK-242组先分别腹腔注射抑制剂TAK-242（3 mg/kg）,1h后MA+TAK-242组再腹腔注射MA（10 mg/kg）。采用Western Blot实验和采用荧光定量PCR实验检测MA依赖CPP大鼠海马中TLR4、MyD88、TRAF6、IκB-α、p-IκB-α、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白的表达和mRNA表达。  结果  与生理盐水组相比,MA组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均升高（P < 0.001或P < 0.01）,IκB-α的蛋白和mRNA表达下降（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65的表达升高（P < 0.01或P < 0.05）;与MA组相比,MA+TAK-242组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均下降（P < 0.001、P<0.01或P < 0.05）,IκB-α的蛋白和mRNA表达升高（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65表达下降（P < 0.01或P < 0.05）。  结论  MA依赖可通过激活TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,诱导CPP大鼠海马神经炎症的发生,采用特异性TLR4抑制剂可以减轻MA诱导的神经炎症。