Ca2+依赖的膜结合蛋白7在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨Ca²⁺依赖的膜结合蛋7(CPNE7)在胃癌中的表达水平及其与肿瘤发生发展的关系。方法：首先通过生物信息学分析CPNE7在胃癌及癌旁中的表达差异及其与预后的关系。收集2020年1月至2021年5月在兰州大学附属第二医院行手术治疗的102例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织,制作成组织芯片(TMA),采用免疫组织化学染色法检测CPNE7的表达水平,Spearman相关分析CPNE7表达与胃癌患者临床病理特征的关系。采用RT-PCR和Western blot检测CPNE7在胃癌细胞(MKN45/AGS/HGC-27)和人正常胃黏膜细胞(GES-1)中mRNA和蛋白的表达水平。结果：CPNE7蛋白及其mRNA水平在胃癌中高于癌旁组织(P<0.05),CPNE7的表达与患者的临床分期(P<0.001)、T分期(P=0.012)、N分期(P=0.01)以及有无淋巴结浸润(P=0.005)和Lauren’s分型(P=0.007)显著相关,与年龄(P=0.37)、性别(P=0.121)、分化程度(P=0.15)、有无转移(P=0.835)、血管浸润(P=0.27...     

急性ST段抬高型心肌梗死患者急诊经皮冠状动脉介入治疗中使用重组人尿激酶原对预后的影响

目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死患者(STEMI)急诊经皮冠状动脉介入(PCI)治疗中重组人尿激酶原(rhPro-UK)不同给药方式对心肌灌注及预后的影响。方法回顾性选取2017年8月至2022年8月中国人民解放军陆军第七十一集团军医院收治的行急诊PCI治疗的132例STEMI患者, 根据其临床资料进行分析, A组66例为将导丝通过冠状动脉病变、球囊扩张及支架植入后分别注射rhPro-UK, B组66例为导丝通过冠状动脉病变后一次性注射rhPro-UK。对比两组患者PCI手术情况、靶血管灌注情况[校正心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流帧数(CTFC)、TIMI血流分级]、心肌灌注情况[TIMI心肌灌注分级(TMPG)、术后90 min ST段回落率(STR)、无复流/慢血流(NR/SF)的发生率]、心脏功能指标[左室舒张末期容量(LVEDV)、左室收缩末期容量(LVESV)及左室射血分数(LVEF)]、主要不良心血管事件(MACE)发生率及出血事件发生情况。结果两组患者的罪犯血管分布、插管方式及支架植入数量比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后A组TIMI血流分级3级比例高于...     

Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响

目的：研究脂肪细胞因子Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响。方法：培养INS-1细胞,分为正常组：用普通培养基培养24h;棕榈酸（palmiticacid,PA）组：以0.5mmol/LPA培养24h;PA+Vaspin组：先加入320ng/mLVaspin预培养2h,再以0.5mmol/LPA+320ng/mLVaspin共培养24h;PA+Vaspin+雷帕霉素（rapamycin）组：先以50nmol/LRapamycin预培养2h,再以0.5mmol/LPA+320ng/mLVaspin共培养24h;PA+Vaspin+3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）组：先以1mmol/L3-MA预培养2h,再以0.5mmol/LPA+320ng/mLVaspin共培养24h。葡萄糖（3.3mmol/L和16.7mmol/L）刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平,Westernblot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammaliantargetofrapamycin,mTOR）、p-mTOR、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及P62蛋白水平,mRFP-GFP-LC3检测自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果：与正常组相比,PA组INS-1细胞上清液中胰岛素分泌水平在3.3mmol/L葡萄糖和16.7mmol/L葡萄糖刺激下均降低[（1.02±0.08）ng/mLvs.（0.54±0.06）ng/mL,P=0.000;（1.15±0.13）ng/mLvs.（0.71±0.05）ng/mL,P=0.000）],PA+Vaspin组较PA组升高[（0.76±0.03）ng/mLvs.（0.54±0.06）ng/mL,P=0.001;（0.91±0.04）ng/mLvs.（0.71±0.05）ng/mL,P=0.011）];与正常组相比,PA组INS-1细胞p-mTOR与mTOR蛋白比值低（2.04±0.14vs.1.19±0.09,P=0.000）,PA+Vaspin组p-mTOR与mTOR蛋白比值较PA组高（1.51±0.05vs.1.19±0.09,P=0.005）;同时,PA组自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与正常组相比明显增加（0.81±0.07vs.0.65±0.04,P=0.005;2.35±0.25vs.1.16±0.11,P=0.000）,P62蛋白水平降低（1.04±0.19vs.0.60±0.08,P=0.000）;PA+Vaspin组Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平较PA组低（0.58±0.04vs.0.81±0.07,P=0.001;1.95±0.08vs.2.35±0.25,P=0.007）,P62蛋白增加（0.82±0.03vs.0.60±0.08,P=0.032）;PA组自噬溶酶体数量较正常组多（8.33±1.53vs.0.33±0.58,P=0.000）,Vaspin干预后降低（3.67±1.53vs.8.33±1.53,P=0.001）;同时,PA干预INS-1细胞24h后细胞凋亡明显增加（7.91±0.50vs.22.15±2.05,P=0.000）,PA+Vaspin组较PA组细胞凋亡减少（13.23±1.97vs.22.15±2.05,P=0.000）。结论：Vaspin能够改善棕榈酸诱导的INS-1细胞过度自噬和细胞凋亡,改善胰岛β细胞分泌功能。     

人脐带间充质干细胞通过调控OPG/RANKL比值对骨质疏松大鼠的影响及机制研究

目的：探讨人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)对骨质疏松大鼠的影响及机制。方法：将30只SPF级6月龄雌性SD大鼠随机分为3组：假手术组(Sham组)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除+HUC-MSCs干预组(4×10~6/3 d,HUC-MSCs干预组),每组各10只,Sham组切除大鼠腹腔少量脂肪,其余各组均去除双侧卵巢建立骨质疏松大鼠模型。建模成功后,HUC-MSCs组用干细胞干预12周,其余2组用等剂量生理盐水干预。干预结束后,通过骨代谢血清指标血钙(calcium,Ca)、血磷(phosphorus,P)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原C端肽(c-terminal peptide of typeⅠcollagen,CTX)、骨组织形态计量学参数测量、骨密度检测、成骨细胞表面积/骨表面积比(osteoblast surface/bone surface,ObS/BS)和破骨细胞表面积/骨表面积比(osteoclast surface area/bo...     

鸢尾素通过自噬对棕榈酸诱导的INS-1细胞功能和凋亡的影响

目的:探讨鸢尾素对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的胰岛β细胞功能和凋亡的影响.方法:培养INS-1细胞,用不同浓度梯度的鸢尾素干预INS-1细胞,根据蛋白结果筛选出最佳鸢尾素干预浓度为1500 ng/mL.然后将INS-1细胞分为正常组、PA组、PA+1500 ng/mL鸢尾素组、PA+1500 ng/mL鸢尾素+雷帕霉素组、PA+1500 ng/mL鸢尾素+3-MA组.用3.3 mmol/L和16.7 mmol/L的葡萄糖浓度刺激检测干预后胰岛素的分泌水平,Western blot检测自噬相关蛋白p-mTOR、mTOR、p62、LC3Ⅱ、LC3 Ⅰ的蛋白水平,用mGFP-GFP-LC3腺病毒转染观察自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平.结果 采用SPSS 20.0软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差((x)±s)表示,多组间差异比较采用单因素方差分析及Turkey HSD检验.结果 :①PA组LC3Ⅱ/Ⅰ的比值较正常组增高(0.745±0.035 vs.1.015±0.012,P=0.000),随着鸢尾素干预浓度增加,LC3Ⅱ/Ⅰ的水平较PA组逐渐升高且有统计学意义(Ⅰ1组1.465±0.028,Ⅰ2组2.269±0.063,I3组1.858±0.074,I4组2.355±0.074,均P=0.000),鸢尾素浓度为1500 ng/mL时LC3Ⅱ/Ⅰ的水平最高.②PA组INS-1细胞上清液中胰岛素水平在3.3 mmol/L和16.7 mmol/L葡萄糖刺激下较正常组均下降[(0.447±0.067) ng/mL vs.(0.138±0.012) ng/mL,P-0.000;(0.625±0.041) ng/mL vs.(0.245±0.043) ng/mL,P=0.000],鸢尾素干预后胰岛素水平较PA组均升高[(0.138±0.012) ng/mL vs.(0.322±0.041) ng/mL,P-0.001;(0.245±0.043) ng/mL vs.(0.414±0.036) ng/mL,P=0.005].③与正常组相比,PA干预细胞后,自噬体数量增加(2.33±1.53 vs.10.33±1.53,P=0.000),而自噬溶酶体数量无明显变化(2.33±1.53 vs.3.33±1.53,P=0.939),鸢尾素干预后,自噬体数量和自噬溶酶体数量较PA组均升高(10.33±1.53 vs.15.67±1.53,P=0.007;3.33±1.53 vs.12.00±2.00,P=0.001).④与正常组相比,PA干预后细胞凋亡率增加[(11.417±1.297)％ vs.(46.507±0.525)％,P=0.000],鸢尾素干预后凋亡率降低[(46.507±0.525)％ vs.(33.767±1.083)％,P=-0.000].结论:鸢尾素通过自噬改善PA诱导的INS-1细胞分泌功能和凋亡.     

mTOR 在糖尿病血管病变中的研究进展

糖尿病血管病变是糖尿病致残、 致死的主要原因, 然而目前多种治疗策略对糖尿病血管病变的 防治仍未取得理想的结果。 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 (mechanistic target of rapamycin kinase, mTOR) 是一 种存在于真核生物中的丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶, 在多种生物过程中发挥着重要作用。 研究发现 mTOR 可 通过调节细胞增殖、 凋亡、 自噬、 氧化应激及炎性反应等路径参与糖尿病血管病变的发生发展。 文章就 mTOR 对糖尿病相关动脉粥样硬化、 糖尿病肾病及糖尿病视网膜病变中的影响及相关机制进行综述, 为糖 尿病血管病变的防治提供新策略。     

血胆红素增高对ABX PENTRA120血细胞分析仪检测白细胞计数及分类的影响

目的 探讨梗阻性黄疸患者高胆红素对ABX PENTRA120血细胞分析仪检测白细胞计数及其分类计数结果的影响,以及在LIS系统中应注意的问题.方法 全自动血液生化分析仪测定梗阻性黄疸患者血清胆红素含量,分别应用ABX PENTRA120全自动血细胞分析仪和手工分类计数方法对50例血清胆红素浓度>150 μmol/L的梗阻性黄疸标本进行白细胞计数和分类计数,并进行对比和观察.结果 高胆红素组ABX PENTRA120全自动血细胞分析仪法与手工法测定白细胞计数无统计学差异,但白细胞分类计数有统计学差异;自动分析结果提示高血胆红素组出现巨大未成熟细胞(LIC),且其比例与胆红素浓度呈正相关.结论 高胆红素对ABX PENTRA120血细胞分析仪白细胞分类计数有很大影响,在LIS系统中出现LIC不明原因增高时必须用手工法涂片复检.     

2型糖尿病患者血清Asprosin水平及其与代谢指标的 相关性研究

目的：研究2型糖尿病患者血清Asprosin水平变化及其与代谢指标的相关性。方法：收集初诊2型糖尿病患者（type 2 diabetes mellitus,T2DM）98例和正常糖耐量人群（normal glucose tolerance,NGT）93例。进一步根据中国超重/肥胖医学营养治疗专家共识（2016年版）,以体质量指数（body mass index,BMI）≥28 kg/m2为切点,将上述2组组内分别再分为非肥胖（non-obe－sity,NOB）和肥胖（obesity,OB）两亚组。测量人体指标、检测相关代谢血生化指标,采用ELISA检测血清Asprosin水平,并通过直线相关性分析、多元线性回归分析对Asprosin水平及其与其他代谢指标的相关性进行统计分析。结果：T2DM组Asprosin水平明显高于NGT组[（352.579±40.742） pg/mL vs. （189.411±32.635） pg/mL,P=0.002]。单因素相关分析显示,T2DM患者血清Asprosin水平与高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C）呈负相关（r=-0.447,P=0.000）,与空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、空腹胰岛素（fasting insulin,FINS）、胰岛素抵抗指数（homeostasis model of assessment for insulin resistance index,HOMA-IR）、糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin,HbA1c）呈正相关（r=0.187,r=0.198,r=0.202,r=0.159,均P<0.05）。多元逐步回归分析发现,FBG（β=0.333,P=0.000）、HOMA-IR（β=-0.176,P=0.047）为血清Asprosin的独立影响因素。结论：T2DM组血清Asprosin水平明显高于NGT组,且与FBG、FINS、HOMA-IR、HbA1c呈正相关,与HDL-C呈负相关,其中FBG与HOMA-IR是血清Asprosin水平的独立危险因素。     

Vaspin通过Nrf2/ARE信号通路对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响

目的：探讨Vaspin对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响。方法：培养INS-1细胞,分为正常对照组（NC组）、高糖高脂组（HG+PA组）、高糖高脂+80ng/mLVaspin组（HG+PA+V1组）、高糖高脂+160ng/mLVaspin组（HG+PA+V2组）、高糖高脂+320ng/mLVaspin组（HG+PA+V3组）、高糖高脂+640ng/mLVaspin组（HG+PA+V4组）。通过DCFH-DA荧光探针染色法检测细胞内活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）水平;比色法、酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）检测氧化应激相关指标;葡萄糖（3.3mmol/L和16.7mmol/L）刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Westernblot检测核因子E2相关因子2（nuclearfactorerythroid2-relatedfactor2,Nrf2）蛋白表达水平。结果：①与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中低糖和高糖刺激后的胰岛素分泌水平均有明显升高（均P<0.05）;②与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中高糖高脂诱导INS-1细胞中ROS、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷水平明显降低,总抗氧化能力、超氧化物歧化酶水平、谷胱甘肽过氧化物酶水平明显升高（均P<0.05）;③流式细胞实验发现,与HG+PA组相比,随着Vaspin浓度增加,高糖高脂干预后INS-1细胞的凋亡水平明显下降（均P<0.05）;④Westernblot结果表明,胞浆中Nrf2表达水平随着Vaspin浓度的增加呈上升趋势,胞核Nrf2表达水平仅在HG+PA+V4组较HG+PA组升高（0.798±0.080vs.0.579±0.065,P=0.039）。结论：Vaspin可以通过激活Nrf2/抗氧化反应原件（antioxidantresponseelement,ARE）信号通路,改善高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,增加胰岛素分泌水平。     

网织红细胞参数动态监测恶性肿瘤放疗前后骨髓功能恢复临床研究

目的探讨应用网织红细胞(RET)参数监测恶性肿瘤患者放疗前后骨髓功能恢复的临床意义.方法采用ABX Pentra 120 Retic型血液细胞分析仪检测恶性肿瘤患者放疗前后不同时期RBC、HB、WBC和网织红细胞参数,将各组数据作比较并进行分析.结果肿瘤患者放疗后 RBC、HB、WBC 均显著下降,到第28天虽有所回升,但仍明显低于放疗前水平(P<0.01).网织红细胞百分比(RET%)和未成熟网织红细胞指数(IRF)在放疗后第7天较放疗前也均显著下降(P<0.01),到第14天虽在低位,但已停止下降,且有上升趋势;第21天则已明显上升,其中IRF已显著高于第14天水平(P<0.01);第28天RET%虽与放疗前还有差距,但与第21天相比显著增高,而IRF已恢复到放疗前水平.结论 测定网织红细胞参数特别是对 IRF 的动态监测可作为了解患者骨髓受抑制和恢复情况的敏感指标,对指导临床用药及肿瘤治疗中放疗时机的选择有一定的参考价值.