瘦素及其受体在精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的表达及意义

目的:探讨瘦素及其受体在精索静脉曲张模型大鼠附睾组织的表达及其意义。方法:将40只SD大鼠随机分为精索静脉曲张(EV)持续4、8周组(EV4、EV8组,每组12只)和相应的假手术对照组(Control 4、Control 8组,每组8只)。采用左肾静脉部分结扎的方法建立精索静脉曲张模型。采用免疫组织化学法检测大鼠附睾组织中瘦素及瘦素受体表达情况,采用实时定量PCR法检测大鼠附睾组织中瘦素及瘦素受体mRNA表达量。结果:EV4组、EV8组附睾上皮细胞瘦素及瘦素受体表达分别比Control 4组、Control 8组显著增强(P<0.01);而EV4组附睾上皮细胞瘦素及瘦素受体表达与EV8组比较无显著性差异(P>0.05)。EV4组、EV8组附睾上皮细胞瘦素及瘦素受体mRNA的表达分别比Control 4组、Control 8组显著增加(P<0.01);而EV4组瘦素及瘦素受体mRNA的表达与EV8组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:精索静脉曲张大鼠附睾组织中瘦素及瘦素受体的表达明显增加,瘦素可能参与了精索静脉曲张引起男性不育的机制。     

大鼠精索静脉曲张不同手术方法对附睾细胞凋亡的影响

目的:探讨包含睾丸动脉的曲张精索内静脉集束结扎术(ALV)和保留睾丸动脉的精索内静脉结扎术(APV)对大鼠同侧附睾上皮细胞凋亡的影响.方法:检测对照组、实验性精索静脉曲张(EV)组、ALV组和APV组大鼠左侧附睾的重量、显微结构、附睾上皮细胞凋亡指数(AI).结果:EV组和ALV组附睾上皮的显微结构明显异常.对照组大鼠左侧附睾重量显著高于EV组和ALV组(P＜0.01),与APV组比较差异无统计学意义(P＞0.05);EV组附睾重量显著高于ALV组(P＜0.01).对照组大鼠附睾上皮细胞AI显著低于EV组和ALV组(P＜0.01),与APV组比较差异无统计学意义(P＞0.05);EV组附睾上皮细胞AI显著低于ALV组(P＜0.01).结论:EV可导致大鼠同侧附睾上皮结构改变,细胞凋亡过度,APV可以修复这些损害,而ALV则进一步加重这些损害.     

姜黄素联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对前列腺癌细胞的抑制作用

目的:探讨姜黄素(curcumin,Cur)联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)对前列腺癌细胞的抑制作用。方法:CCK-8法测定Cur、TRAIL及Cur联合TRAIL作用于PC-3细胞后的细胞生存率,流式细胞技术测定细胞周期及凋亡率,光学显微镜下观察细胞形态,Western blot检测凋亡蛋白caspase-3表达水平的变化。结果:与对照组比较,Cur联合TRAIL组能显著抑制PC-3细胞增殖(P<0.05),呈时间依赖性,且使PC-3细胞阻滞于G2/M期比例明显增多(P<0.05)。镜下可见联合应用Cur和TRAIL处理的PC-3细胞凋亡形态改变明显,凋亡率较对照组高(P<0.05),凋亡蛋白caspase-3表达也增强。结论:Cur与TRAIL联用可明显增强PC-3细胞抑制效果和诱导凋亡作用,其凋亡作用机制可能与其上调caspase-3表达有关。     

原代培养的心肌细胞中毒性心肌炎模型的建立

目的 为阿霉素(ADR)中毒性心肌炎机制的研究及药物治疗提供依据.方法 取0～2日龄sD乳鼠原代心肌细胞培养,观察ADR不同浓度(0.01、0.1、1、10、100μg/ml)及不同作用时间(1μg/ml ADR作用24,48,72h)对心肌细胞存活率及培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)水平的影响,并检测细胞搏动频率.结果 不同浓度ADR均可降低细胞存活率,但10 ng/ml作用后存活率明显降低,呈浓度依赖性.不同浓度ADR均可升高LDH和GOT释放量,亦呈浓度依赖性;随ADR作用时间延长,心肌细胞存活率降低,LDH和COT升高,呈时间依赖性.结论 ADR对原代培养的心肌细胞可造成氧化损伤,损伤程度与ADR浓度及作用时间呈正比.     

山柰酚调控Wnt/β-catenin途径对前列腺癌小鼠T细胞的影响及作用机制北大核心CSCD

目的:探究山柰酚调控Wnt/β-catenin途径对前列腺癌小鼠T细胞的影响及作用机制。方法:皮下注射人去势抵抗性前列腺癌细胞系PC3构建前列腺癌小鼠模型。将30只模型小鼠随机分为对照组、山柰酚低剂量组和山柰酚高剂量组(n=10)。山柰酚灌胃干预,剂量分别为15 mg/kg和30 mg/kg,检测肿瘤生长情况。Western blot检测增殖和转移相关蛋白Cyclin D1、Ki67、MMP2和MMP9表达,TUNEL染色检测细胞凋亡。比较各组Wnt/β-catenin通路的转录和翻译水平。流式细胞术和ELISA检测各组CD4^(+)、CD8^(+)、IFN-γ和IL-2水平。结果:三组小鼠各项指标比较差异有统计学意义(P<0.05)。山柰酚低剂量组和山柰酚高剂量组的肿瘤体积、质量、Cyclin D1、Ki67、MMP2、MMP9、Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白水平均显著低于对照组,凋亡指数均显著高于对照组(P<0.05)。且山柰酚高剂量组的肿瘤体积[(180.56±21.56)mm3]、质量[(0.21±0.03)g]、Cyclin D1、Ki67、MMP2、MMP9、Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白水平均显著低于山柰酚低剂量组,凋亡指数[(17.43±1.89)%]显著高于山柰酚低剂量组[(10.05±1.05)%](P<0.05)。三组小鼠的CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IFN-γ和IL-2水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。山柰酚低剂量组和高剂量组中CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IFN-γ、IL-2水平均显著高于对照组(P<0.05)。山柰酚高剂量组中CD4^(+)[(23.81±1.36)%]、CD4^(+)/CD8^(+)(1.51±0.13)、IFN-γ[(9.15±1.12)ng/ml]和IL-2[(1.78±0.11)ng/ml]水平均显著高于山柰酚低剂量组[(19.45±1.24)%、1.20±0.11、(7.23±0.87)ng/ml,(1.40±0.09)ng/ml,P<0.05]。结论:山柰酚可能通过调控Wnt/β-catenin途径抑制前列腺癌小鼠模型的肿瘤生长和转移,并缓解免疫抑制状态。     

大蒜多糖预处理对缺氧缺糖/复氧复糖大鼠心肌细胞的拮抗作用

目的:研究大蒜多糖(GP)预处理对缺氧缺糖/复氧复糖损伤大鼠心肌细胞的拮抗作用研究,并初步探讨其作用机制。方法:采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立乳鼠心肌细胞糖氧剥离的A/R损伤模型,不同剂量GP(10、30和100mg/L)预处理24h后,比色法测定细胞培养液中iNOS和NO含量,测定细胞内SOD活性及MDA含量。结果:与A/R模型组比较,GP预处理可增加胞内SOD活性和培养液中iNOS活力,降低NO释放量和胞内MDA含量。结论:GP预处理对A/R损伤心肌细胞具有明显的抗氧化作用,可能与清除自由基的产生有关。     

肾窦内肾盂切开联合气压弹道治疗复杂性肾结石23例报告

目的探讨治疗复杂性肾铸形结石的疗效。方法回顾性分析23例复杂性肾铸形结石行肾窦内肾盂切开联合气压弹道碎石的临床资料。结果肾窦内肾盂切开联合气压弹道治疗复杂性肾铸形结石手术时间短,取石效果良好,出血少。结论该手术方式手术操作简单、方法可靠,是一种适合基层医院理想的治疗复杂性肾铸形结石的手术方式。     

重组VEGF165基因腺相关病毒的包装和鉴定

目的包装重组VEGF165基因的无致病性腺相关病毒,以其作为基因载体感染HUVEC细胞并检测其表达,并在体外检测病毒生物学活性。方法从含有VEGF165基因的pET-32a（＋）-VEGF165原核表达载体中扩增出VEGF165片段,构建重组骨架质粒pAAV-VEGF165。将此质粒和对照质粒pAAV-GFP分别与腺相关病毒包装质粒pAAV-RC、辅助质粒pAAV-Helper用钙-磷共转法转染HEK293细胞,通过同源重组分别产生rAAV-VEGF165和rAAV-GFP重组腺相关病毒。通过real-timePCR法测定病毒滴度后,转染HUVEC细胞并检测其表达,并通过感染HUVEC来检测其促增殖作用。结果扩增出的VEGF165片段成功构建至重组骨架质粒中,pAAV-VEGF165经双酶切和测序鉴定正确。病毒包装效率达90%以上,收获纯化rAAV-VEGF165病毒滴度达6.0×1010pfu/mL。重组腺病毒rAAV-VEGF165能够感染HUVEC细胞并得到显著性表达;与未转染组和GFP组相比,能够显著促进HUVEC细胞的增殖。结论我们成功包装了重组腺相关病毒rAAV-VEGF165,它能够感染HUVEC细胞并高表达VEGF165蛋白,并具有促增殖作用,这为进一步开展VEGF165基因的基因靶向治疗奠定了基础。     

缺血后处理对缺血再灌注大鼠肺组织超微结构的影响

Zhao等[1]提出了心肌缺血后处理(IPo)的概念,即在全面恢复再灌注前反复短暂多次给予再灌、停灌处理对随后长时间再灌注心肌有保护作用.     

大蒜多糖对阿霉素所致心肌细胞损伤的保护作用

目的观察大蒜多糖(GP)对阿霉素(ADR)中毒心肌细胞的保护作用并探讨其机制。方法采用0~2 d SD乳鼠心肌细胞做原代培养,复制ADR损伤心肌细胞模型,测定上清液及细胞中多项生化指标,并运用MTT比色法、流式细胞仪检测凋亡细胞。结果ADR(终浓度为1 mg.L-1)可致上清液肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(GOT)释放量增加(P<0.01),同时细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力下降而丙二醛(MDA)含量升高(P<0.01),GP(25~100 mg.L-1)可呈浓度依赖性地降低CK、LDH、GOT活力,增加细胞SOD活力和降低MDA含量,尤其以GP大剂量组作用明显(P<0.05或P<0.01)。流式细胞仪检测GP能降低心肌细胞凋亡率,证实了GP的保护作用。结论GP能够拮抗ADR引起的自由基脂质过氧化,从而保护心肌细胞。