人牙髓细胞的体外培养

对牙髓细胞的体外培养是研究牙髓的有效工具。随着细胞培养技术的发展，牙髓细胞培养的成功率不断提高。干细胞生物学的研究使得人们认识到，在成体组织中也存在干细胞。目前不仅已分离出牙髓干细胞，而且对其干细胞特征作了进一步的研究，这将给牙髓病治疗和牙齿组织工程带来重大的变化。     

体外培养人牙髓干细胞的生物学特性

目的研究体外培养的人牙髓干细胞的生物学特性。方法收集因正畸拔除的第一前磨牙,用酶消化法分离能够形成克隆且具有高增殖力的细胞,细胞以低密度接种传代培养;免疫荧光法检测第3代细胞表面标志的表达;取第4代细胞,用含有20%胎牛血清、地塞米松、β甘油磷酸钠和维生素C的培养液诱导3周,茜素红染色观察诱导后细胞矿化情况,免疫荧光法检测牙本质涎蛋白(DSP)表达,改良Kap low氏法检测诱导前后碱性磷酸酶的表达。结果诱导前细胞表达Stro-1、Cbfa-1、和Ⅰ型胶原,碱性磷酸酶呈弱表达,不表达DSP;诱导后细胞表达DSP,碱性磷酸酶呈强表达,并可见钙结节形成。结论分离所得细胞具有较高的增殖和分化能力,与间充质干细胞具有相似的表面标志,并在诱导后表达DSP而具备牙髓干细胞的特征。     

半侧Lefort Ⅰ型截骨途径切除颅底肿瘤(附1例报告)

目的探讨颅底肿瘤的手术进路.方法采用经口半侧LefortⅠ型截骨途径切除颅底巨大脊索瘤.结果该手术进路避免了气管切开及下颌正中切开,且面部不留疤痕,手术视野清楚,术后不影响咀嚼功能等优点.结论经口半侧LefortⅠ型截骨途径可用于切除颅底肿瘤.     

半侧Lefort Ⅰ型截骨途径切除颅底肿瘤

目的 探讨颅底肿瘤的手术进路。方法 采用经口半侧Lefort Ⅰ型截骨途径切除颅底巨大脊索瘤。结果 该手术进路避免了气管切开及下颌正中切开, 且面部不留疤痕, 手术视野清楚, 术后不影响咀嚼功能等优点。结论 经口半侧Lefort Ⅰ型截骨途径可用于切除颅底肿瘤。     

牙体机械损伤后牙本质牙髓组织MMP-2和MMP-9表达变化

目的 研究牙体机械损伤后牙本质牙髓组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的变化.方法 以离体第三磨牙(n=30)制作牙体机械损伤的牙本质牙髓复合体体外培养模型(模型组).分别于培养后第3、7、14天收集样本,免疫组化染色、Real-time PCR和Western blotting检测MMP-2和MMP-9在培养后不同时间点的表达.以无牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养的离体第三磨牙(n=30)作为对照组.结果 免疫组化染色发现,MMP-2和MMP-9在对照组成牙本质细胞呈阳性表达,在牙髓细胞则呈阴性表达;在模型组,成牙本质细胞和牙髓细胞MMP-2和MMP-9均呈阳性表达.图像分析显示,模型组培养后各时间点MMP-2和MMP-9表达均显著高于对照组(P<0.05);且模型组培养第3天MMP-2和MMP-9表达均显著高于培养第7和第14天(P<0.05).Real-time PCR检测表明,模型组培养后第3天的MMP-2和MMP-9 mRNA表达显著高于培养后第7和第14天(P<0.05).Western blotting检测发现,模型组培养后各时间点均有MMP-2和MMP-9蛋白表达,以培养后第3天时较为明显.结论 在牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养过程中,MMP-2和MMP-9表达呈现先增加后减弱,与基质降解和合成的时间相对应.     

牙体机械损伤后牙本质牙髓组织MMP-2和MMP-9表达变化

目的 研究牙体机械损伤后牙本质牙髓组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的变化.方法 以离体第三磨牙(n=30)制作牙体机械损伤的牙本质牙髓复合体体外培养模型(模型组).分别于培养后第3、7、14天收集样本,免疫组化染色、Real-time PCR和Western blotting检测MMP-2和MMP-9在培养后不同时间点的表达.以无牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养的离体第三磨牙(n=30)作为对照组.结果 免疫组化染色发现,MMP-2和MMP-9在对照组成牙本质细胞呈阳性表达,在牙髓细胞则呈阴性表达;在模型组,成牙本质细胞和牙髓细胞MMP-2和MMP-9均呈阳性表达.图像分析显示,模型组培养后各时间点MMP-2和MMP-9表达均显著高于对照组(P<0.05);且模型组培养第3天MMP-2和MMP-9表达均显著高于培养第7和第14天(P<0.05).Real-time PCR检测表明,模型组培养后第3天的MMP-2和MMP-9 mRNA表达显著高于培养后第7和第14天(P<0.05).Western blotting检测发现,模型组培养后各时间点均有MMP-2和MMP-9蛋白表达,以培养后第3天时较为明显.结论 在牙体损伤的牙本质牙髓复合体培养过程中,MMP-2和MMP-9表达呈现先增加后减弱,与基质降解和合成的时间相对应.     

牙周牙髓联合病变治疗探讨

目的:探讨慢性牙周炎及其引起的牙髓根尖周病变治疗方法.方法:将118位病人的166个患牙进行牙髓活力测试、评价.根据临床症状进行牙周基础治疗和根管治疗术,随访6个月,观察疗效.结果:前磨牙冷诊阳性率77.55%,电活力阳性率85.71%,开髓后发现有67.34%牙髓部分或全部坏死;磨牙冷诊阳性率75.22%,电活力阳性率72.57%,开髓后发现有56.63%牙髓部分或全部坏死.根管治疗术6个月后复查所有患牙症状明显改善,咬合功能基本恢复正常,松动度、探诊深度都有明显改善(P<0.05).结论:牙髓状态应根据病史和症状进行综合判断.慢性牙周炎引起的牙髓刺激症状经过牙周基础治疗以及脱敏或楔形缺损充填治疗症状明显减轻者,可不做牙髓处理.经上述治疗后症状仍未消失,应行根管治疗术.如有牙髓坏死,并由此加重骨破坏者,应尽早进行根管治疗术.     

体外培养人牙髓干细胞的生物学特性

目的 研究体外培养的人牙髓干细胞的生物学特性.方法 收集因正畸拔除的第一前磨牙,用酶消化法分离能够形成克隆且具有高增殖力的细胞,细胞以低密度接种传代培养;免疫荧光法检测第3代细胞表面标志的表达;取第4代细胞,用含有20%胎牛血清、地塞米松、β甘油磷酸钠和维生素C的培养液诱导3周,茜素红染色观察诱导后细胞矿化情况,免疫荧光法检测牙本质涎蛋白(DSP)表达,改良Kaplow氏法检测诱导前后碱性磷酸酶的表达.结果 诱导前细胞表达Stro-1、Cbfa-1、和Ⅰ型胶原,碱性磷酸酶呈弱表达,不表达DSP;诱导后细胞表达DSP,碱性磷酸酶呈强表达,并可见钙结节形成.结论 分离所得细胞具有较高的增殖和分化能力,与间充质干细胞具有相似的表面标志,并在诱导后表达DSP而具备牙髓干细胞的特征.     

β-防御素-2多肽在不同类型牙周炎及健康牙龈组织中的表达

目的:检测人β-防御素-2(humanbetadefensin-2,HBD-2)在牙周病病变牙龈和健康牙龈中的表达。方法:应用SP法检测健康牙龈(HC组,11例)、慢性牙周炎(CP组,18例)和侵袭性牙周炎(AgP组,9例)牙龈中HBD-2蛋白的表达水平,所得数据用SPSS11.5统计分析软件进行单因素方差分析。结果:HBD-2蛋白在所有牙龈标本中均有表达;HBD-2蛋白表达可见于牙龈复层鳞状上皮全层,主要位于棘层以上细胞胞质内。3组的表达水平分别为:健康牙龈组(31.55±12.66)%、慢性牙周炎组(17.31±7.64)%、侵袭性牙周炎组(25.06±8.04)%,健康组表达水平显著高于慢性牙周炎组(P<0.05),其他组间差异无统计学意义。结论:HBD-2多肽在健康牙龈和牙周病牙龈上皮中广泛表达,提示其在维系牙周健康及宿主免疫防御反应中可能发挥重要作用。     

人牙髓细胞的体外培养

对牙髓细胞的体外培养是研究牙髓的有效工具。随着细胞培养技术的发展,牙髓细胞培养的成功率不断提高。干细胞生物学的研究使得人们认识到,在成体组织中也存在干细胞。目前不仅已分离出牙髓干细胞,而且对其干细胞特征作了进一步的研究,这将给牙髓病治疗和牙齿组织工程带来重大的变化。