遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症患者的基因诊断与表型分析

目的:探讨3例遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症患者的基因突变类型及其临床特征。方法:检测先证者及其家系成员凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、FⅦ活性(FⅦ:C)及FⅦ抗原(FⅦ:Ag)等进行表型诊断;用DNA直接测序法分析先证者F7基因的全部外显子、侧翼、5'和3'非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序证实所发生的突变。结果:在3例患者及其家系成员中发现5种基因突变,包括4种错义突变和1种剪切位点突变。在3例遗传性FⅦ缺陷症患者中有2例为双杂合突变、1例为纯合突变。患者1为p.His408Gln和p.Arg413Gln双杂合突变,其家系成员中有一位为p.His408Gln和p.Arg413Gln双杂合突变,1例为His408Gln突变的杂合子,其相应FⅦ:C分别为5.0%、3.0%和75.0%。;患者2为p.Arg364Gln和p.His408Gln双杂合突变,其家系成员为p.Arg364Gln和IVS6-1G A双杂合突变,其相应FⅦ:C分别为2.0%、2.0%;患者3为p.Arg337Cys纯合突变, FⅦ:C为3%。结论:在3例遗传性FⅦ缺陷症患者及其家系成员中发现5种基因突变,其中p.His408Gln突变较为常见,而临床表现及出血程度与FⅦ:C及FⅦ:Ag无相关性。     

替加环素和多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的抗菌效应研究

目的 评价替加环素、多黏菌素对产KPC酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,指导临床正确选择并合理使用抗菌药物。方法 收集2012—2016年期间分离自温州医科大学附属第三医院临床样本中对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌109株,采用Vitek-2 compact和Vitek MS进行菌种鉴定及药敏试验;采用聚合酶链反应(PCR)法检测菌株的KPC酶耐药基因并采用琼脂稀释法药敏试验分别检测替加环素、多黏菌素等药物的单药最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)值。结果 所分离的109株均为产KPC-2肺炎克雷伯菌,经过Vitek-2 compact和KB法试验可知109株肺炎克雷伯菌对阿米卡星的耐药率为82.57%,对亚胺培南、美罗培南等其他药物的耐药率均为100%。琼脂稀释法药敏结果显示109株肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南耐药率均为100%;对阿米卡星耐药率为89%;对替加环素的敏感率为65.1%,29.4%中介;对多黏菌素的敏感率为100%。结论 产KPC-2型肺炎克雷伯菌对多黏菌素和替加环素较为敏感,可作为临床用药参考。     

纸片协同试验用于肠杆菌科细菌碳青霉烯酶检测的价值

目的评估纸片协同试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌（CPE）的应用价值。方法收集2015年1月至2018年12月瑞安市人民医院75株可疑产碳青霉烯酶非重复肠杆菌科细菌和10株非CPE。通过使用美罗培南（MEM）联合多种抑制剂[包括苯基硼酸（PBA）、氯唑西林、乙二胺四乙酸钠（EDTA）和替莫西林]的纸片扩散法等试验检测菌株产碳青霉烯酶的类型。以PCR扩增相关耐药基因为金标准,评估纸片协同试验对CPE的检测价值。结果75株可疑CPE经PCR扩增,66株确证产碳青霉烯酶（其中产KPC46株、产NDM-118株、产IMP1株、产VIM1株,无产OXA-48基因型）,6株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,3株未检测出基因;MEM联合PBA和氯唑西林协同试验检测KPC表型的灵敏度为100.0%,特异度为93.1%;MEM联合EDTA协同试验检测MBL表型的灵敏度和特异度均达到100.0%。10株非CPE均未检测出碳青霉烯酶耐药基因,且纸片协同试验均阴性。结论该表型检测方法对检测KPC、MBL类碳青霉烯酶有较高的灵敏度和特异度,并且操作简便、成本低,适合在临床微生物学实验室、医院感染管理科及疾病预防控制中心等单位普及应用。     

浙江瑞安地区人感染猪链球菌病二例

例1男,82岁,既往体健。因畏寒发热1 d,双肩部、腰部疼痛8 h,于2012年8月20日来瑞安市人民医院就诊。患者诉1 d前无明显诱因出现畏寒、寒颤、发热,8 h 前出现双肩部及腰部、髋部疼痛,伴有双肩关节、髋关节活动受限。体格检查：神志清,精神可,颈抵抗阴性,体温38．9℃。脊柱生理曲度存在,双肩关节及双髋关节拒绝活动。实验室检查：血白细胞计数15．3×109／L,超敏 C 反应蛋白（hsCRP）182．7 mg／L。临床怀疑急性脊髓炎可能,予头孢曲松2．0 g每12 h 1次静脉滴注。1 d 后患者再次出现体温升高,达39．4℃,伴有畏寒、寒颤。血培养疑有链球菌生长。转感染科后予哌拉西林-他唑巴坦4．5 g 每8 h 1次静脉滴注。3 d后,血培养（需氧＋厌氧）示猪链球菌Ⅱ型生长,诊断为人感染猪链球菌败血症。根据药物敏感试验结果,予加用莫西沙星0．4 g 每天1次联合哌拉西林-他唑巴坦4．5 g 每8 h 1次静脉滴注。7 d 后,患者体温正常,血常规及炎性反应指标渐好转,血培养2次（需氧＋厌氧）均阴性。14 d 后痊愈出院。