应用铁过载小鼠模型筛选铁代谢相关miRNA的研究

目的通过构建铁过载小鼠模型,筛选出小鼠小肠细胞的铁代谢相关miRNA。方法将40只昆明雄性小鼠随机分成正常对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组4个小组,分别腹腔注射右旋糖酐铁0、1.5、3、6 mg/次,共20次,构造铁过载小鼠模型。造模结束后测量小鼠的血清铁蛋白及肝肾等器官的铁含量,评价造模效果。采集其中两组小鼠的小肠上皮细胞,提取miRNA并进行小RNA高通量测序及生物信息学分析,筛选出可能与小肠铁代谢相关的miRNA。结果小鼠的血清铁及小肠等组织的铁元素含量增加,镜下可见铁沉积,各组织铁元素含量升高,升高程度与铁剂注射量成正比;对测序结果进行生物信息学分析,共选出9个可能与铁代谢相关的miRNA。结论通过腹腔注射铁剂的方法,可以构建合格的铁过载小鼠模型;通过对小肠上皮细胞进行小RNA测序及生物信息学分析可以筛选出铁代谢相关miRNA。     

Aγ-225～-222缺失复合β地中海贫血的研究

目的:探讨A γ-225～-222缺失导致的非缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白综合征(nondeletional hereditary persistence of fetal hemoglobin,nd HPFH)复合β地中海贫血的基因突变和临床特征.方法:选择2013年6月至2014年7月在广西医科大学第一附属医院就诊的病例进行血常规检查;应用高效液相色谱法(HPLC)测定血红蛋白Hb F和Hb A2水平;应用DNA测序方法分析γ珠蛋白基因突变;应用反向斑点杂交(RDB)和gap-PCR方法检测地中海贫血基因突变;应用SPSS 16.0统计软件对数据进行统计分析.结果:在122例Hb F增高的病例中,检测出7例Aγ-225～222 AGCA缺失杂合子,其中3例复合Gγ-158 C→T突变杂合子,1例同时复合β地中海贫血28 A→G突变杂合子以及Gγ-158 C→T突变杂合子,1例复合β地中海贫血CD17 A →T突变杂合子.血常规检查显示7例Hb为96.7～142.3 g/L,MCV为54.61～77.65 fl,MCH为16.10～25.26 pg.Hb分析显示7例Hb F为4.0％～11.2％,其中复合Gγ-158 C→T突变杂合子HbF为4.0％～8.1％,复合β地中海贫血杂合子Hb F为8.1％～11.2％.5例Hb A2正常,2例复合β地中海贫血杂合子Hb A2增高(5.6％～6.4％).Aγ225～-222缺失复合β地中海贫血杂合子与β地中海贫血杂合子相比,Hb F、Hb水平明显升高(P＜0.05).结论:Aγ 225～222缺失可导致Hb F水平升高,其杂合子均无临床症状,Hb正常或降低,MCV、MCH降低.Aγ-225～-222缺失复合β地中海贫血杂合子的HbF、Hb水平明显高于β地中海贫血杂合子.