流式细胞仪自动化快速初筛环磷酰胺诱导微核作用的研究

目的 利用单一荧光试剂吖啶橙（acridine orange, AO）和简单的单激光流式细胞仪计数骨髓嗜多染红细胞细胞的微核率,达到了解化合物诱导微核作用的目的。方法 采用经典的染色体断裂剂环磷酰胺(cyclophosphamide, CP)腹腔注射小鼠和大鼠,24h后采集骨髓细胞,经过固定和吖啶橙（acridine orange, AO）荧光染色,利用单激光流式细胞仪计数微核,计数结果用WinDMI软件进行分析,作出等高图并设置窗口。结果 随着CP浓度的增高,骨髓细胞的含微核的嗜多染红细胞（micronucleated PCE, MNPCE）也相应增多,呈良好的量效关系。实验结果同时和手工计数比较,没有显著差异。结论 采用单一荧光染色（AO染色）和单激光流式细胞仪快速初筛化合物诱导微核作用是可靠的,较传统的手工方法更为灵敏,并节省了大量时间和成本,操作也更为简单。     

17α-甲基睾酮对剑尾鱼的影响

目的 研究17α-甲基睾酮暴露对产后雌性剑尾鱼(Xiphophorus hilleri)性逆转组织形态学变化的影响,探讨剑尾鱼第二性征变化作为水环境风险评价(ERA)的有效生物学标记的可能性.方法 使用浸浴法以10wg/L 17α-甲基睾酮为剑尾鱼染毒持续7周,对实验鱼的体形、腹鳍、臀鳍、尾鳍及性腺等组织器官的变化进行观察;同时对幼鱼在实验室养殖条件下的性别分化进行统计.结果 17α-甲基皋酮对产后雌鱼有明显的影响,受诱导后出现性逆转,逐渐发育形成雄性第二性征:体形变纤细;腹鳍第1鳍条变短、第2和第3鳍条延长,臀鳍第3、4、5鳍条末端钩状化且第3鳍条变粗壮,尾鳍上下缘出现增生;体内与臀鳍相连的骨骼合并生长;受诱导的雌鱼性腺呈现退化趋势并伴有卵细胞坏死现象,生殖能力受到负面影响.结论 剑尾鱼臀鳍和尾鳍变化可作为水环境雄激素物质污染监测的有效生物学标记.     

全氟辛烷磺酰基化合物对剑尾鱼肝脏抗氧化物酶活性的影响

目的 研究全氟辛烷磺酰基化合物（PFOS）暴露对剑尾鱼（Xiphophorus helleri Heckel）抗氧化物酶活性的影响,探讨PFOS对鱼类的致毒机理。方法 使用浸润法以3.5、7.0、14.0和28.0 mg/L四个PFOS浓度为剑尾鱼染毒,定量测定了96 h内肝脏组织中的超氧化物歧化酶（SOD)、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性及丙二醛（MDA）含量的变化。结果 PFOS暴露12 h后,除28.0 mg/L组SOD活性被显著性抑制外,其余各组与对照组均无显著性差异（p>0.05）;7.0 mg/L组和14.0 mg/L组在24 h被极显著诱导(p<0.01),并且一直保持至96 h。CAT活性随PFOS浓度的升高而降低,12 h时,除3.5 mg/L组外,其余各组CAT活性被显著或极显著抑制,至24 h时,各组CAT活性有上升趋势,但48 h后,各组呈不断下降趋势持续至96 h,其CAT活性恢复到12 h水平。GSH-PX活性变化与CAT活性变化趋势相似,其中28.0 mg/L组在不同时间均被显著性抑制,并在96 h时抑制率达到最高值64.8%。MDA含量在12 h时呈小幅下降趋势,但随着暴露时间的延长,各处理组MDA含量呈连续上升趋势,并在96 h时达到最高点,诱导率分别为71.2%、70.1%和85.1%。结论 结果表明,SOD的高活性是由于机体中超氧阴离子的存在,而高浓度的超氧阴离子能够灭活CAT和GSH-PX活性,因此,CAT和GSH-PX活性始终低于对照组。GSH-PX对PFOS的敏感性高于CAT。MDA含量持续升高反映出细胞组织已经遭受到氧化损伤。剑尾鱼在体的实验表明,PFOS能够诱导肝脏氧化应激反应,氧化损伤是PFOS致毒的主要途径之一。     

广州市真光中学学生人际关系与人格因素的相关性调查

目的检验人际关系与人格因素之间的相关性。方法抽取60名高中学生进行16种人格因素测试（16PF）,采用社会测量技术得出受测学生的人际关系情况进行分析。结果人缘指标与独立性等4个因素有显著相关关系;人缘“明星”与“孤星”之间的方差分析显示,在稳定性等7个因素差异有统计学意义,人际和谐指数与紧张性等6个因素呈显著相关关系。结论应善于利用测量工具,掌握运用学生心理发展规律,有利于建设和谐集体。     

唐鱼卵黄蛋白原的ELISA检测方法的建立

实验用兔是实验动物的重要组成部分,主要应用于药品、生物制品的热原检定试验、抗血清的制备、皮肤刺激性试验和视神经、微生物学、运动医学等科研及教学领域,在我国的使用量仅次于大、小鼠、金黄仓鼠和豚鼠,是目前尚不可替代的实验材料和模型。国外发达国家实验兔研究与SPF级实验兔的培育和应用发展迅速。随着我国生命科学、医学领域研究水平的提高和为顺应我国新颁布的《中国药典》、《中国生物制品规程》对实验兔质量提出的要求,实验兔正逐步向SPF级／清洁级方向发展。本文就我国SPF级新西兰兔培育和生物特性研究工作的进展作一概述。     

孕激素暴露致食蚊鱼形态雄性化的生物学效应

目的 研究不同浓度孕酮（PRO）暴露对雌性食蚊鱼（Gambusia affinis）的形态雄性化生物学效应。方法 将性未成熟的雌性食蚊鱼个体分别静水暴露于0.5、5、50 和500 nmol/L不同浓度的PRO实验组中,并设置对照组和平行组。持续暴露42 d后观察与测定食蚊鱼的体长、体重、臀鳍第3鳍条和第14,15,16椎肋骨形态雄性化变化等指标,同时观察卵巢发育状况。结果 食蚊鱼暴露42 d后,与对照组相比,50和500 nmol/L实验组食蚊鱼的体长（BL）有极显著减少（分别P<0.01）;无论是低浓度组还是高浓度组,暴露实验后体重（BW）都有显著性或极显著下降（P<0.05或P<0.01）;PRO暴露对食蚊鱼身体健康指数（CF）的影响,只有在5 nmol/L浓度时差异有显著性（P<0.05）;500 nmol/L浓度处理后,第3臀鳍条分节数（FJ）、长度（FL）和最宽处宽度（FW）差异有显著性（P<0.05）,表明形态雄性化变化明显;其他浓度组则无明显区别（P>0.05）;500 nmol/L PRO实验组中,雌性食蚊鱼的第14,15,16椎肋骨的L值、D值和L：D值都出现极显著性差异（分别P<0.01）,表明形态雄性化变化明显;组织切片观察揭示,暴露组食蚊鱼卵巢中的卵母细胞发育受到不同程度的抑制,Ⅱ、Ⅲ时相卵母细胞胞核发生肿胀现象。结论 孕激素暴露诱导雌性食蚊鱼形态雄性化的生物效应十分明显。     

高中学生性心理调查与分析

目的了解高中学生青春期心理状况,为学校有的放矢地进行青春期性教育提供依据。方法采用随机抽样方法,抽取真光中学高中4个班217名学生进行问卷调查,自行设计问卷,用SPSS for Windows 10.0统计软件进行统计分析。从异性交往、性意识、性冲动、性行为状况和影响性意识性行为的因素6个方面入手,对当代中学生的性心理状态进行分析。结果异性交往方面只有23.3%的男生和43.9%的女生回答有知心朋友,在性意识方面,有相当一部分学生存在不同程度的性焦虑。男生产生性冲动明显高于女性。性行为方面,有5.8%的男生和3.6%的女生有过性交行为,78.8%的男生和57.5%的女生对性自慰行为持肯定态度。结论中学生中性心理较混乱,缺乏科学的性教育。本研究提出了性心理健康的标准和中学生性心理健康培养的3点对策。     

醋酸甲羟孕酮暴露致食蚊鱼的雄激素效应

目的 探讨人工合成孕激素(醋酸甲羟孕酮,MPA)暴露对雌性食蚊鱼(Gambusia affinis)的雄激素效应.方法 将成年雌性食蚊鱼随机分为4组,包括对照组和40 ng/L(低密度组)、200 ng/L(中密度组)和1 000 ng/L(高密度组)等3个MPA实验暴露组,并设置平行组.持续暴露28 d后观察与测定食蚊鱼的体长(BL)、体质量(BW)、身体健康指数(CF)、臀鳍第3鳍条分节数(FJ)、第4、5、6鳍条长度(FL)变化和第14、15、16椎体脉棘的形态变化等5项指标,并在7d、14d、21 d、28 d测定了卵黄蛋白原基因(VTGα)、雄激素受体基因(ARα)和细胞色素P450芳香化酶基因(CYP19α)mRNA表达水平的变化.结果 食蚊鱼经MPA暴露28d后,与对照组相比,200 ng/L和1 000 ng/L实验组食蚊鱼的BL、BW和CF均无明显变化(分别P＞0.05).臀鳍第3鳍条分节数和第6鳍条长度变化不明显(P＞0.05),但第4、5鳍条的长度显著增加(P＜0.01).暴露在200 ng/L和1 000 ng/L MPA中、高浓度组食蚊鱼的第14椎体脉棘的总长(L)、尾部尖端到脊的高度(D)值,第15椎体脉棘的投影长(P)、P∶D值和第16椎体脉棘的P、L∶D、P∶D值分别呈现显著性变化(P＜0.05或P＜0.01),椎体脉棘伸长,且与脊椎骨接近垂直,显示形态雄性化效应.与对照组相比,低浓度组(40 ng/LMPA) VTGα,CYP19α基因的表达量上升(P＜0.01),而ARα表达被抑制(P＜0.05);中浓度组VTGα,CYP19α,ARα基因的表达量都显著上升(P＜0.01);高浓度组CYP19α,ARα基因的表达量显著上升(P＜0.01),而VTGα的表达量则被抑制(P＜0.01).结论 MPA暴露致雌性食蚊鱼骨骼出现形态雄性化,目标基因表达水平的变化结果证明MPA对食蚊鱼具雄激素效应,表明MPA是一种具有雄激素效应的孕激素.     

流式细胞仪筛选环磷酰胺诱导骨髓嗜多染红细胞微核的技术方法

目的利用单一荧光试剂吖啶橙(acridine orange,AO)和简单的单激光流式细胞仪(FCM)计数骨髓嗜多染红细胞的微核率,达到了解化合物诱导微核作用的目的。方法分别以环磷酰胺(CP)处理雄性KM小鼠和SD大鼠,采用AO荧光染色和单激光流式细胞仪检测小鼠和大鼠骨髓含微核的嗜多染红细胞(MNPCE)及含微核的成熟红细胞(MNNCE)的微核率,并对结果进行比较分析。结果随着CP浓度的增高,骨髓中MNPCE和MNNCE也相应增多,呈良好的量效关系。实验结果同时和手工计数比较,没有显著差异。结论 AO_FCM自动化检测方法完全适用于小鼠和大鼠骨髓MNPCE及MNNCE微核率的检测。     

多氯联苯对剑尾鱼超氧化物岐化酶活性的影响

目的　研究多氯联苯 (PCBs)暴露对剑尾鱼 (Xiphophorushelleri)超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响 ,探讨剑尾鱼器官组织内SOD活性变化作为环境风险评价 (ERA)的有效生物学标记的可行性。方法　测定了PCBs对剑尾鱼 30d的半致死浓度 (LC50 ) ;使用浸浴法以 0、2、5 0 μg L三个PCBs浓度为剑尾鱼染毒 ,定量测定了 72h内肝、鳃及卵巢组织中的SOD的活性变化。结果　PCBs对剑尾鱼的 30dLC50 为 1 0 5 80 μg L ;PCBs对剑尾鱼肝脏和卵巢的SOD活性有明显 (P <0 0 1 )的影响。在最初染毒的 1 2h内 ,SOD活性略有上升 ,但随暴露时间延长 ,浓度增加 ,肝和卵巢的SOD活性均呈下降趋势。此外 ,结果还显示肝组织的SOD活性较高于卵巢的SOD活性 ,表明不同器官组织的SOD活性对PCBs胁迫的敏感性存在一定的差异。实验中鳃组织SOD活性在PCBs暴露后其变化不明显 (P >0 0 5 )。结论　表明剑尾鱼肝细胞SOD活性可作为环境风险评价 (ERA)的有效生物学标记