小鼠肠移植术前输注表达吲哚胺2,3双加氧酶的供者树突细胞抑制排斥反应

目的观察干扰素γ(IFN-γ)诱导供者(C57BL/6小鼠)脾树突细胞(DC)表达吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)的情况;研究受者(BalB/c小鼠)小肠移植术前输注高表达IDO的供者DC对排斥反应的抑制作用。方法用IFN-γ诱导供者DC表达IDO;半定量逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法及毛细管电泳法检测IDO表达水平及活性,混合淋巴细胞培养(MLR)测定IDO刺激T细胞增殖的能力。利用小鼠异位小肠移植模型,设单纯移植组、DC输注移植组(术前输注供者脾DC 2×10~6个)及诱导DC输注移植组(术前输注经IFN-γ诱导的供者脾DC 2×10~6个),术后观察移植肠存活时间并行病理学检查。结果经IFN-γ诱导的脾DC IDO分子mRNA转录水平(相对量)、IDO蛋白表达水平(相对量)及培养液中犬尿氨酸浓度分别为(1.23±0.02)、(2.74±0.01)以及(76.52±0.44)μmol/L,未经IFN-γ诱导的脾DC分别为(1.05±0.05)、(1.40±0.17)及(43.31±0.48)μmol/L,前者显著增强(P<0.01)。脾DC对同种T细胞增殖的刺激作用在IFN-γ诱导后减弱,在加入IDO的特异性抑制剂后增强。输注诱导DC移植组移植肠中位存活时间(12 d)较单纯移植组(6 d)及输注DC移植组(7.5 d)显著延长(P<0.01),而移植肠病理分级显著性降低(P<0.05)。结论IFN-γ可诱导小鼠脾DC高表达活性的IDO,后者可减弱DC刺激T细胞增殖的能力。受者术前输注高表达IDO的供者DC能够诱导针对供者的特异性免疫耐受而减轻排斥反应。     

杂交手术在下肢多节段动脉闭塞的应用价值

目的:探讨杂交手术治疗多节段下肢动脉硬化的方法及疗效。方法:146例下肢多节段动脉硬化闭塞症患者,根据病变部位及闭塞程度,采用传统外科手术治疗及杂交手术(血管腔内介入加内膜剥脱或取栓术及血管腔内治疗加人工血管旁路术)治疗,了解两种治疗方法的疗效。结果:杂交治疗组在手术成功率、术后并发症、踝肱指数及通畅率等方面与传统外科手术组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:杂交手术治疗下肢多动脉硬化闭塞症,根据病变部位及程度,采用个体化治疗,手术并发症少,术后畅通率高。     

下肢动脉重度钙化闭塞病变管腔处理措施的研究进展

外周动脉疾病(peripheral artery disease, PAD)中最常见的是外周动脉粥样硬化性疾病。随着介入技术和血管腔内治疗器械的飞速发展, 血管腔内修复术(endovascualr treatment, EVT)已经成为下肢PAD患者的一线治疗方式。病变处合并重度钙化是目前EVT治疗PAD的难点之一, 选择合适的管腔准备措施有效且安全地裂解钙化斑块可增加EVT治疗PAD患者远期靶患肢通畅率, 减少再次手术干预的风险。本综述总结当前用于下肢动脉重度钙化病变的管腔准备方式。     

吲哚胺2，3双加氧酶与调节性T细胞诱导移植免疫耐受的研究进展

如何有效克服移植排斥反应、成功诱导移植免疫耐受是目前器官移植领域面临的最大难题。免疫抑制剂仍然无法解决移植物的慢性排斥问题,需终身服用且有较大的毒副作用［1］。移植免疫耐受是受体在无免疫抑制剂应用的情况下移植器官具有功能而不成为破坏性免疫攻击对象的状态。免疫应答过程包括一个高度抗原特异性的启动阶段和一个相对的非抗原依赖的效应阶段。为了有效地限制非特异性的破坏性效应,免疫系统发展了一系列的免疫调节机制。调节性T细胞（ regulatory T cell , Treg）在这种调节机制中发挥了重要作用［2］。研究表明［3］,过表达细胞毒T淋巴细胞相关抗原（ cytotoxic T lymphocyte associate antigen-4,CTLA-4）的Treg激发树突细胞（dentritic cell,DC）表达有活性的吲哚胺2,3双加氧酶（ indoleamine 2,3-Dioxygenase, IDO）产生耐受性DC（tolerogenic DC,Tol-DC）,进而诱导免疫耐受,提示在色氨酸分解代谢为基础上的IDO与Treg的相互调节作用可能是免疫耐受的关键介导因素之一。本文就IDO与Treg在诱导移植免疫耐受中的研究进展作简要综述。     

鼠胎肝干细胞生物学特性与人端粒酶反转录酶基因介导的影响

背景：研究表明,感染人端粒酶反转录酶基因后的干细胞具有稳定表达高水平端粒酶活性,且能使细胞增殖旺盛,这为建立基因工程的永生化干细胞系奠定了基础。 目的：探讨人端粒酶反转录酶基因感染对体外培养鼠胎肝干细胞增殖及细胞周期的影响。 方法：体外培养鼠胎肝干细胞,经重组腺相关病毒作为载体介导人端粒酶反转录酶基因感染,用RT-PCR、Western blot检测鼠胎肝干细胞人端粒酶反转录酶基因和蛋白的表达,CCK-8法、细胞生长曲线检测细胞生长增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期分布的变化。 结果与结论：与对照组、空载病毒组相比,基因感染组人端粒酶反转录酶基因和蛋白水平均有表达,细胞的生长速度明显增快,G0/G1期细胞减少,S期细胞数增多。结果表明以重组腺相关病毒作为载体介导人端粒酶反转录酶基因感染能促进体外培养的鼠胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

急性肠系膜上动脉闭塞性疾病的临床特点及诊治体会

目的：探讨急性肠系膜上动脉闭塞性疾病的临床特点及诊治方法。方法：回顾性分析天津医科大学总医院2003年11月至2011年3月收治的36例该病患者的临床资料。结果：本组36例患者,急性栓塞26例,慢性闭塞基础上的急性血栓形成10例;手术治疗27例,行单纯肠系膜上动脉取栓术4例,单纯坏死肠段切除术10例,肠切除及取栓术11例,肠切除及血管旁路术1例,肠切除、取栓及血管旁路术1例,治愈13例,死亡14例;保守治疗9例,好转7例,死亡2例;总死亡率44.4%。20例随访期间,术后再发本病者1例,经肠切除及肠系膜上动脉取栓术治愈,余经彩超证实均无再发肠系膜上动脉闭塞迹象。结论：对高度怀疑本病者应尽早行CTA或DSA检查,早期改善动脉供血、综合手段重建肠系膜上动脉是提高存活率和治愈率的关键。     

鼠胎肝干细胞生物学特性与人端粒酶反转录酶基因介导的影响

背景:研究表明,感染人端粒酶反转录酶基因后的干细胞具有稳定表达高水平端粒酶活性,且能使细胞增殖旺盛,这为建立基因工程的永生化干细胞系奠定了基础。目的:探讨人端粒酶反转录酶基因感染对体外培养鼠胎肝干细胞增殖及细胞周期的影响。方法:体外培养鼠胎肝干细胞,经重组腺相关病毒作为载体介导人端粒酶反转录酶基因感染,用RT-PCR、Western blot检测鼠胎肝干细胞人端粒酶反转录酶基因和蛋白的表达,CCK-8法、细胞生长曲线检测细胞生长增殖情况,流式细胞仪测定细胞周期分布的变化。结果与结论:与对照组、空载病毒组相比,基因感染组人端粒酶反转录酶基因和蛋白水平均有表达,细胞的生长速度明显增快,G0/G1期细胞减少,S期细胞数增多。结果表明以重组腺相关病毒作为载体介导人端粒酶反转录酶基因感染能促进体外培养的鼠胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用。     

侵及重要血管的原发性腹膜后肿瘤的手术治疗

目的:探讨侵及重要血管的原发性腹膜后肿瘤的外科治疗方法。方法:对48例患者行肿瘤完全切除28例,不完全切除20例。行血管重建30例,未行血管重建18例。结果:本组48例中40例获随访6～90个月,主要血管重建与未重建患者的1、3、5年生存率分别为91.67%、66.67%、41.67%和68.75%、25.00%、6.25%。结论:侵及重要血管的腹膜后肿瘤已不是手术禁忌,用不同方法处理受累血管,争取彻底切除肿瘤,是减少术后复发、提高长期存活率的有效方法。     

高表达IDO的树突状细胞抑制T细胞增殖的实验研究

目的:研究基因转染后高表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的树突状细胞(DC)对T细胞增殖的抑制作用,以探讨其在器官移植中排斥反应的作用.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从腹膜炎小鼠的小肠组织中获取IDO全长cDNA片段,将其克隆至真核表达质粒pTracer中.构建真核表达质粒IDO-pTracer,随后用LipofectamineTM 2000介导转染小鼠脾脏DC,分为未转染组、空载体转染组、IDO基因转染组和IDO基因转染并添加1-甲基色氨酸(1-MT)组,以混合淋巴细胞反应的方法检测转染后DC对同种异系T细胞增殖的作用.结果:克隆的小鼠IDO基因全长cDNA大小约1.3 kb,无碱摹突变,以构建的重组真核表达质粒IDO-pTracer转染DC后,混合淋巴细胞反应结果显示IDO基因转染组的刺激指数(SI)低于未转染组、空载体转染组及IDO基因转染并添加1-MT组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:成功构建了IDO基因的真核表达载体IDO-pTracer,且IDO基因转染DC具有抑制异系T细胞增殖的作用.     

慢性肠系膜缺血13例手术治疗经验

慢性肠系膜缺血（chronic mesenteric ischemia，CMI）主要是由于肠系膜上动脉狭窄或闭塞引起。采用何种术式恢复其血供是目前临床研究的重点。天津医科大学总医院普通外科在2004-2012年间收疗CMI患者13例。采用动脉取栓及内膜剥脱术、主动脉旁路术、腔内治疗和杂交手术等不同术式治疗，效果满意。现报告如下。