基于网络药理学和实验验证探讨石榴皮对非酒精性脂肪性肝炎的作用机制

目的 基于网络药理学和细胞实验验证的方法探讨石榴皮改善非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库(TCMSP)进行条件检索,获取石榴皮的活性成分及其对应的作用靶点。利用人类基因数据库(GeneCards)等5个数据库获取NASH相关的靶点。将获得的石榴皮和NASH靶点进行筛选,通过韦恩图得到共同靶点。使用蛋白相互作用数据库(STRING)构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,并用Cytoscape 3.7.1建立“石榴皮-成分-靶点-NASH”网络。利用Metascape软件进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析。最后借助人肝癌细胞HepG2观察石榴皮中主要活性成分对NASH的影响。结果 石榴皮活性成分有7个,获得靶点基因191个,NASH靶点1 818个,两者交集靶点98个,拓扑学分析显示,石榴皮治疗NASH的核心成分为槲皮素、山奈酚和木犀草素,核心靶点为蛋白激酶B (protein kinase B,Akt1)、白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等。KEGG通路分析结果显示石榴皮治疗NASH主要涉及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/Akt、核因子κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB)等信号通路。体外细胞试验结果显示,与对照组相比,模型组磷酸化蛋白激酶B (phosphorylated-Akt^Thr308,p-Akt^Thr308)、IL-6等蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,石榴皮活性成分可显著降低p-Akt^Thr308、IL-6等蛋白的表达水平(P<0.05),也能够降低IL-6、TNF-α基因的mRNA表达水平(P<0.05)。结论 石榴皮可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗NASH的作用,其机制可能与石榴皮中活性成分槲皮素、山奈酚和木犀草素影响Akt1等核心靶点及调控PI3K/Akt、NF-κB等信号通路,进而抑制相关炎症因子表达有关。     

小鼠潜伏性鼠痘的急性暴发

1986年,本中心因BALB/c种鼠不足,于7月份购入一批,共471只,拟补充扩大繁殖用。购入小鼠饲养在经消毒处理的单独房舍内进行检疫,用具和垫料均经消毒处理,由专人隔离饵养。购入后20天内共死亡淘汰10只。死亡淘汰鼠除消瘦耸毛外,未见其它明显症状。但留存小鼠外观也不健壮,于8月1日又处理部分小鼠。剖检其中59只,检查心、肺、肝、肾、肠等脏器均无肉眼可见病变,但脾脏包膜下有不同程度的灶性白斑者28只,占剖检数的47.5％。将部份病变脾脏用血平皿分离培养,未发现致病菌。     

表没食子儿茶素没食子酸酯激活SIRT6/AMPK信号通路改善果糖饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝病的作用研究

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对果糖饮食诱导非酒精性脂肪性肝病小鼠的作用及其机制。方法 将32只雌性C56BL/6小鼠随机分为对照组、模型组及EGCG低、高剂量组(50、100 mg·kg^-1)，每组8只。模型组及EGCG给药组均给予30%果糖水饲养，对照组给予正常饮用水；EGCG给药组按照设定剂量灌胃给药，每日1次，连续10周。采用比色法测定血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的活力，以及血清、肝组织中甘油三酯(TG)的含量；苏木素-伊红(HE)染色和油红O染色法观察肝脏脂肪变性和脂质蓄积变化；RT-qPCR法检测肝脏中胆固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA表达；Western Blot法检测肝脏中沉默调节蛋白6(SIRT6)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)、SREBP-1c、FASN、ACC蛋白表达；免疫组织化法检测肝脏中FASN、ACC蛋白表达；采用分子对接技术观察EGCG与SIRT6蛋白的相互作用。结果 与对照组比较，模型组小鼠血清AST、ALT...