HKI-272和雷帕霉素联合治疗克服非小细胞肺癌EGFR-TKI获得性耐药

3背景·可逆的酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinaseinhibitor,TKI）埃罗替尼（Erlotinib）延长了非小细胞肺癌（non-small cell lungcancer,NSCLC）患者的生存时间,但耐药（drugresistance）的发生常常影响治疗效果。     

比较70％乙醇与中性甲醛固定对肺癌组织DNA质量影响的实验研究

目的由于常规10％中性甲醛固定的组织DNA提取质量较低,易发生断裂或降解,不利于保存及长片段DNA扩增。本研究比较70％乙醇与中性甲醛固定法对DNA质量及后续PCR的影响。方法取70％乙醇固定的肺癌组织30例（其中10例固定7天以上）,10％中性甲醛固定的自身配对癌组织30份。采用试剂盒提取DNA,分析条带完整性和纯度,并用PCR扩增HBB（beta globin）及SERPINA9（antitrypsin）两基因的不同长度片段,用琼脂糖凝胶电泳分析扩增产物。结果70％乙醇固定组的基因组DNA经电泳条带整齐未见明显降解,而10％中性甲醛组DNA条带弥散,有可见降解。后续普通PCR扩增268bp、536bp的产物显示乙醇固定组产量明显高于10％中性甲醛固定组。实时荧光定量PCR也显示在扩增123bp、251bp、346bp三个不同长度片段时乙醇固定组产量均明显高于10％中性甲醛固定组（P〈0．01）。中性甲醛组DNA在扩增346bp长度片段时成功率下降至47％（14／30）。乙醇固定时间长短对DNA的antitrypsin模板质量无明显差异。结论70％乙醇固定法对肺癌组织DNA保存效果优于中性甲醛法,且更适合长片段DNA扩增。长时间乙醇同定法对DNA质量无明显影响,可适合于长途运输生物标本。     

唐氏综合征伴发急性白血病的诊治

1病历摘要 患儿,男孩,1岁7个月,因“颜面苍白伴皮下出血点1周”于2013年2月入院。 1周前家属发现患儿颜面明显苍白,全身皮肤可见散在出血点,无鼻出血、牙龈出血,口唇少许溃疡,无发热,无呕吐,无夜间盗汗,无排柏油样便,小便正常。     

儿童肝母细胞瘤长期生存并发肝脏多发性占位

1病历摘要 患儿男性,14岁,因“肝母细胞瘤治疗后12年,发现肝脏占位性病变1周”于2011—08—10入院。 12年前患儿因腹胀、面色苍白1个月于1999—08—30来我院就诊,腹部MRI提示肝脏左叶内侧段及右叶前段占位性病变,肿块大小11．2×6．8×1．8cm,行超左半肝切除术。术中所见：左肝Ⅳ段及第Ⅷ段巨大肿物,直径15cm,第Ⅱ、Ⅲ段见数个直径2cm肿物,切除左半肝、右肝静脉及部分第Ⅷ段。     

降落PCR及克隆测序法检测DNA甲基化的实验研究

目的 探索优化PCR及测序法检测DNA甲基化的实验条件,检测肺癌hsa-mir-34b(mir-34b)基因启动子DNA甲基化谱。方法 肺癌细胞株A549 DNA进行亚硫酸盐处理后,设计引物扩增mir-34b基因启动子序列,使用普通PCR、巢式PCR和降落(Touchdown)PCR方法以及不同DNA聚合酶进行扩增,甲基化谱检测采用PCR直接测序和克隆后测序两种方法。结果 降落 PCR与巢式PCR方法相结合优于普通PCR及单独的巢式PCR或降落 PCR。HotStart酶优于普通Taq酶及Ex Taq酶。直接PCR测序法的测序图普遍出现套峰难以判读,PCR产物克隆后测序可见清晰的测序峰,甲基化位点可明确判读,并可以结合测序克隆数目提高甲基化检测敏感度。结论 对于重亚硫酸盐处理的DNA甲基化状态检测,推荐使用HotStart酶、降落 PCR与巢式PCR相结合、克隆测序法检测基因甲基化谱,序列图明确且敏感度高。     

早期非小细胞肺癌患者ｈｓａ ｍｉｒ ３４ｂ基因启动子甲基化水平检测*

目的　检测早期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者癌组织与癌旁组织ｈｓａ-ｍｉｒ-３４ｂ（ｍｉｒ-３４ｂ）基因启动子甲基化水平的差异。方法　采用重亚硫酸盐还原技术、降落巢式ＰＣＲ扩增２７例Ⅰ期ＮＳＣＬＣ患者癌组织和癌旁组织配对样本中ｍｉｒ-３４ｂ基因启动子区ＤＮＡ,克隆测序法分析甲基化谱变异,并与临床病理特征进行关联分析。结果　癌组织ｍｉｒ-３４ｂ基因启动子ＣｐＧ岛整体甲基化水平为９.７％（６.８％ ～２２.3％）,而癌旁组织为８.５％（５.３％ ～１１.０％）,癌组织甲基化水平高于癌旁组织（Ｚ＝２.３５５,Ｐ＝０.０１９）。当前吸烟患者ｍｉｒ-３４ｂ基因启动子甲基化发生率高于以往吸烟及不吸烟者。癌组织ｍｉｒ-３４ｂ基因启动子甲基化水平与患者性别、年龄、ＰＳ评分无关。结论　早期ＮＳＣＬＣ患者癌组织ｍｉｒ-３４ｂ基因启动子甲基化水平升高,吸烟可能与ｍｉｒ-３４ｂ基因启动子甲基化的发生有关。ｍｉｒ-３４ｂ基因甲基化与早期肿瘤发生相关的机制值得进一步研究。     

银屑病及Marie Unna遗传性稀毛症的遗传易感基因

1文献来源 [1] Zhang X J, Huang W, Yang S, et al. Psoriasis genome-wide association study identifies susceptibility variants within LCE gene cluster at 1q21 [J]. Nat Genet, 2009,41（2）：205-210.     

2008年度值得一读的国际肺癌研究文献

每年各大期刊都会发表大量的肺癌文献,认真研读其中高质量、影响大的论文对于掌握肺癌发展的动向、学习和借鉴科研方法具有重要意义。我们邀请从事肺癌基础和临床研究的专家推荐出2008年度最佳的肺癌研究文献,并从中筛选出以下影响力较大的文献以飧读者。