20S蛋白酶体β5亚单位基因沉默对人骨髓间充质干细胞增殖能力的影响

目的:应用基因沉默技术,观察下调20S蛋白酶体β5亚单位(PSMB5)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖能力的影响及其潜在机制,寻求调节干细胞活力的关键靶点。方法:构建PSMB5-shRNA慢病毒载体感染早期hBMSCs,根据感染条件不同将细胞分为绿色荧光蛋白(GFP)对照组和shRNA组。倒置荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR和免疫印迹检测PSMB5沉默效率,荧光分光光度法检测蛋白酶体活性;BrdU掺入实验观察PSMB5基因沉默对早期hBMSCs增殖潜能的影响,流式细胞术检测细胞周期分布,免疫印迹检测细胞周期相关蛋白1(cyclin D1)及其激酶CDK4的表达变化。结果:慢病毒感染早期hBMSCs 72 h可见约95%以上细胞表达绿色荧光蛋白。shRNA组PSMB5 mRNA和蛋白表达水平较GFP对照组分别降低93.31%±0.59%和56.83%±13.31%,且蛋白酶体活性较对照组降低37.47%±0.41%。此外,shRNA组BrdU阳性率26.14%±8.13%较对照组49.53%±11.18%显著降低,G1期细胞较GFP对照组增多,而S期和G2/M期细胞却较对照组减少,Cyclin D1和CDK4的表达水平分别下降54.55%±7.76%和63.26%±15.76%。结论:PSMB5基因沉默能够下调Cyclin D1和CDK4的表达,导致细胞G1/S转换停滞,影响hBMSCs增殖潜能。     

低氧及运动对大鼠不同脑区血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨低氧和(或)运动对大鼠脑干、小脑、前脑皮质、海马和纹状体等不同脑区血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及脑功能的影响。方法 60只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、低氧安静组、常氧运动组和低氧运动组。实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测建模后大鼠不同脑区VEGF表达水平的变化,Morris水迷宫实验检测大鼠神经系统功能。结果各组大鼠神经系统功能无显著差异,低氧及低氧运动引起大鼠前脑皮质、海马和纹状体VEGF表达增高,常氧运动仅引起大鼠海马VEGF表达增高。结论低氧和(或)运动可引起大鼠不同脑区VEGF表达增加,为低氧训练的开展提供进一步的实验支持。     

超声在检测糖尿病患者颈动脉粥样硬化的应用研究

目的探讨超声在检测糖尿病患者颈动脉粥样硬化的应用研究。方法选取我院2008年5月--2010年3月接收住院的60例糖尿病患者与60例非糖尿病患者作为本次研究的观察对象,分别为实验组与对照组。对所有的患者实行双侧颈动脉超声检查,和血液生化指标检查。观察两组患者的颈动脉IMT值和血流频谱测值。结果60例观察组中糖尿病患者的颈动脉IMT值明显增加了,而且两组患者颈动脉粥样硬化斑的发生率分别是：对照组5％,观察组70％,且P〈0．05,差异具有统计学意义。结论采用超声检查的方式对检测糖尿病患者颈动脉粥样硬化斑块的形成具有重要的临床意义,有利于糖尿病颈动脉粥样硬化患者的早期治疗,提高其生活质量,值得在临床上推广与应用。     

正常成人窦房结形态学及Cx43、Cx40的表达

目的 观察正常成人心脏窦房结的细胞构筑及连接蛋白43、40(connexin43、40,Cx43、Cx40)的表达和分布情况. 方法 常规石蜡包埋,HE、Masson染色,选定目标部位行Cx43、Cx40免疫组织化学染色,并进行图像及统计分析. 结果 ①正常成人窦房结细胞组成、形态、排布区别于普通工作心肌.②由房肌、窦房结外周到动脉周围结组织,Cx43、Cx40表达逐渐减弱,胞质染色逐渐浅淡;而Cx40的分布范围在动脉周围窦房结组织中多于外周结组织. 结论 正常成人窦房结的细胞组成、排布及Cx43、Cx40的表达与其电生理起搏、传导特性相符.     

颊间隙的解剖学结构及其临床意义

目的 为了给颊间隙疾病的诊治提供解剖学基础，探讨颊间隙的解剖边界、内容物及其与颊间隙疾病的关系。方法 选用成年尸体头颈部5例，逐层解剖分离，观察颊间隙的解剖结构、内容物以及与相邻组织的关系；选用2例健康人、3例颊间隙感染和2例颊间隙肿瘤患者进行电子计算机断层扫描和磁共振成像检查，观察其解剖及疾病影像特征。结果 颊间隙有较为明确的前后、内外及下界，而无明确的上界；在间隙内有面神经、面动脉、颊神经、颊动脉、面深静脉走行，也有少许淋巴结及脂肪组织分布；颊间隙内并未发现面静脉、腮腺导管；电子计算机断层扫描和磁共振成像是颊间隙病变诊断的重要方式。结论颊间隙可以认为是一个不完全封闭的相对独立空间，依据其内容物的特点可以指导颊间隙及相关疾病提供合理的治疗手段，颊间隙的影像学与解剖对比研究对颌面部疾病的诊治也具有重要意义。     

大蒜素联合胰岛素治疗后2型糖尿病患者血浆高敏C-反应蛋白和C肽水平的变化

纳入2005-10／2006-05在滦县人民医院内分泌科住院或门诊治疗的96例2型糖尿病患者，按随机数字表法将其分为2组：联合治疗组（n=46）及胰岛素治疗组（n=50）。联合治疗组：静脉滴注大蒜素注射液（詹姆斯-安迪制药（通化）有限公司产品，生产批号：20050601，30mg／支），60mg／次，1次／d，同时给予常规胰岛素治疗。胰岛素治疗组：单纯给予常规胰岛素治疗。两组于治疗前和治疗2周后检测血浆高敏C-反应蛋白水平、空腹血糖、空腹C肽、糖化血红蛋白、总胆固醇水平，计算体质越指数。组内计量资料差异比较采用配对t检验，组间比较采用t检验。胰岛素治疗组和联合治疗组治疗后空腹血糖、血浆高敏C-反应蛋白水平明显低于治疗前（t=4．72，4．45，3．46，3．84，P〈0．05），空腹C肽水平明显高于治疗前（t=3．31，4．47，P〈0．05），联合治疗组治疗后血浆高敏C-反应蛋白水平明显低于胰岛素治疗组治疗后（t=3．542，P〈0．05），空腹C肽水平明显高于胰岛素治疗组（t=3．278，P〈0．05）。表明大蒜素可明显降低2型糖尿病患者血糖、高敏C-反应蛋白水平，提高C肽水平，从而降低其血管并发症发生的危险性。     

低氧预处理通过激活低氧诱导因子1α增强老年人骨髓间充质干细胞促血管新生能力

目的 探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)促血管新生能力的影响,为改善老年患者自体干细胞移植治疗缺血性心肌损伤疗效提供支持.方法 老年hBMSCs经过低氧预处理后,倒置相差显微镜下摄片观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物,并进行成骨、成脂诱导分化检测其分化潜能.随后收集青年hBMSCs常氧培养基...     

Ki67与肺癌的相关性研究

细胞核相关抗原（Nuclear-associated antigen）Ki67属于IgG1家族,为非组蛋白,对蛋白酶高度敏感。是由两条相对分子量为345 ku和395 ku的多肽链组成的大分子蛋白质,位于细胞核内,与细胞分裂密切相关。作为一种核增值抗原,Ki67被大量用于各种肿瘤相关性疾病的研究中,下面我们就其在肺癌中的表达及其相关研究综述如下。