人参皂甙Rb1阻止大鼠局灶性脑缺血细胞凋亡和诱导NAIP表达(英文)

人参皂甙Rb1(GRb1)是人参中一个最重要的有效成分(人参属五加科中一属),能减少大鼠暂时性脑缺血梗塞面积和改善神经功能缺失症状,这种神经保护作用的机制不完全清楚。本实验研究GRb1的神经保护作用是否与防止神经元凋亡和调控神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)的表达有关。通过阻塞大鼠大脑中动脉建立局灶性脑缺血模型,再灌注开始后立即给予腹腔注射GRb1(40mg/kg)。具有神经功能缺失的大鼠被随机分成2组:缺血组和GRb1组,每个组根据再灌注时间(3h,12h,1d,2d,3d,5d,10d,n=4/每时间点)分为亚组。正常大鼠和假手术组做为对照组。TUNEL标记分析凋亡细胞,用免疫组织化学的方法检测NAIP的表达。结果显示再灌注3h凋亡细胞数量开始升高,24h达高峰,后下降,但再灌注10d的凋亡细胞数量显著高于对照组(P<0.01)。与缺血组相比,GRb1各亚组的凋亡细胞数减少,但再灌注12h至3d,其差异具有统计学意义。在对照组,NAIP弱或阴性的免疫反应广泛出现在脑实质神经元。再灌注3h,NAIP阳性细胞增加,12h时达高峰,后下降。再灌注5d,NAIP阳性细胞数量比对照组少(P<0.05)。NAIP阳性神经元出现缺血性改变如扇形或三角形,纹状体星形胶质细胞强表达NAIP。在GRb1组,NAIP阳性细胞数量从再灌注12h到10d,显著高于缺血组。本实验结果提示大鼠局灶性脑缺血时,GRb1能减少细胞凋亡,其机制可能与增加NAIP的表达有关。     

免疫金银法检测抗角质蛋白抗体的影响因素

目的:探讨免疫金银法检测抗角质蛋白抗体(AKA)的影响因素。方法:收集AKA阳性的类风湿性关节炎患者血清20份,同时收集20份正常健康者血清作为对照,采用免疫金银法检测上述血清AKA,检测中采用不同的封闭液、不同浓度的金标抗体、不同的显色时间,比较分析不同条件下免疫金银法检测AKA的阳性率及结果易判断程度,以确定较合适的检测条件。同时采用免疫荧光法检测AKA,比较2种方法检测AKA的敏感性。结果:以含10%~20%的羊血清及1%BSA的封闭液、1:80~1:320的金标抗体、10~15 min的显色时间为较合适的检测条件。免疫金银法检测AKA较免疫荧光法敏感性高,且差别有统计学意义。结论:免疫金银法检测AKA对类风湿性关节炎具有较高的敏感性和特异性,临床上用于类风湿性关节炎的辅助诊断具有较高的诊断价值。     

快速斑点酶标法检测抗核抗体

目的建立一种快速、简便的抗核抗体(ANA)检测方法。方法采用快速斑点酶标法(Rapid-DotELISA,R-Dot-ELISA)检测20份ANA阳性系统性红斑狼疮(SLE)患者血清和20份阴性正常健康者血清的ANA。检测中采用不同浓度的核抗原、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体、不同显色时间,摸索最佳检测条件。确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA法、ELISA法和免疫荧光法检测190例系统性自身免疫性疾病患者和50例健康者血清的ANA,比较R-Dot-ELISA法与ELISA法和免疫荧光法检测的一致性。结果核抗原浓度为40~160mg/L、封闭液为含1%牛血清白蛋白和10%~20%小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80~1∶320,显色时间3~5min。R-Dot-ELISA与ELISA法相比,检测结果一致率为95.4%(r=0.907,P0.05),与免疫荧光法相比,检测结果一致率为96.7%(r=0.932,P0.05)。结论 R-Dot-ELISA检测ANA具有较高的敏感性及特异性,且快速、简便,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断。     

CIA大鼠滑膜成纤维细胞的原代培养及鉴定

目的建立胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞的培养方法并观察细胞生物学特点。方法收集CIA和正常大鼠的膝关节滑膜组织,采用组织块贴壁法培养滑膜成纤维细胞,观察细胞游出、生长情况;HE染色观察细胞形态;免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Masson染色观察细胞分泌胶原蛋白情况;CCK-8法检测细胞增殖情况。结果倒置显微镜及HE染色观察细胞形态及生长特征符合滑膜成纤维细胞,且98%以上的细胞表达Vimentin蛋白。模型组滑膜成纤维细胞较正常组细胞游出时间早且细胞量多;模型组细胞分泌胶原蛋白能力及细胞增殖能力较正常组强。结论本研究确立了CIA大鼠滑膜成纤维细胞原代培养体系,并且证实CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖与分泌功能较正常滑膜成纤维细胞强。     

以专业认证为契机改革局部解剖学教学方法

为满足临床专业认证的要求,进一步提高我院的教学质量,针对在局部解剖学授课过程中存在的问题,在课堂教学和实验教学中,改革之前一贯沿用的教学方法,充分运用各种手段调动学生的学习积极性,培养学生的自主学习能力,适应现代医疗教学的需要。     

细菌人工染色体携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白重组体的构建

目的 构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞.方法 分别克隆FGF18基因启动子区域的5’同源臂和3’同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒.提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区.结果 经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC.结论 成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产.     

人参皂苷Rb1对大鼠脑缺血再灌注损伤中NAIP表达的影响

目的:观察人参皂苷Rb1对神经元凋亡抑制蛋白(neuronal apoptosis inhibitory protein,NAIP)在脑缺血再灌注损伤中表达的影响,探讨人参皂苷Rb1对缺血性脑病的防治机制.方法:线栓法阻断大鼠大脑中动脉2 h,再灌注3 h～5 d制备脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法标记NAIP阳性细胞,观察人参皂苷Rb1对NAIP阳性细胞数的影响.结果:缺血再灌注后,缺血半暗带内的NAIP阳性细胞表达增加,海马CA 1区等部位的NAIP阳性细胞数量也明显增加,而缺血中心区无NAIP阳性细胞的表达.实验对照组中NAIP阳性细胞数量随再灌注时间延长逐渐升高,12 h达到高峰,至5 d时NAIP阳性细胞数量表达低于正常水平.实验用药组中NAIP阳性细胞数量在2 d时达到高峰,且其高峰值明显高于实验对照组中的高峰值,后随再灌注时间的延长而逐渐下降,至5 d时仍处于较高水平.结论:脑缺血再灌注后,NAIP表达增加是脑组织对损伤的一种保护性反应,其对缺血区周围的神经细胞的保护作用更为明显.NAIP在脑组织中的表达具有一定的时间规律性,并且人参皂苷Rb1可能通过上调NAIP的表达发挥对受损脑组织的保护作用.     

人参皂苷对脑缺血保护作用的研究进展

人参在我国已有几千年的药用历史，具有“大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津安神”之功效。近代医学研究证明，人参含有人参皂苷(ginsenoside)、人参素、人参烯、脂肪酸、挥发油、维生素、酶等多种成分。其中人参皂苷的研究尤为瞩目，包括绞股兰总皂苷(gypenosides，Gyp)、竹节人参皂苷、七叶皂苷等，在抗炎症、抗肿瘤、清除自由基损伤等方面的作用已经得到了肯定。但其发挥一系列作用的机制尚需进行深入的研究。本就人参皂苷在脑缺血再灌注损伤中的保护作用作一综述。     

青年教师在解剖学教学中应注意的问题

人体解剖学是高等医药院校中非常重要的一门基础课程,它着重阐明正常人体的形态结构,属于生物形态学科的范畴。但该课程内容繁杂,结构复杂,使学生感觉学习解剖学困难重重,同时对从事解剖教学的青年教师而言也是一种挑战。另外,青年解剖学教师大多来自非师范类院校,缺乏教育教学