EST技术及其在基因全长cDNA克隆上的应用策略

随着人类基因组计划的顺利进行 ,EST技术被广泛应用于基因识别、绘制基因表达图谱、寻找新基因等研究领域。利用人类基因组研究不断产生的数据 ,从 ESTs即 c DNA的部分序列入手 ,通过同源筛选 ,获得基因部分乃至全长 c DNA序列 ,避免或减轻了构建与筛选 c DNA文库等繁琐的实验室工作。本文从原理、应用及其在科学研究上产生的影响等方面对EST技术进行了概述     

EST技术及其在基因全长cDAN克隆上的应用策略

随着人类基因组计划的顺利进行，EST技术被广泛应用基因识别、绘制基因表达图普、寻找新基因等研究领域。利用人类基因组研究不断产生的，从ESTs即cDNA的部分序列入手，通过同源筛选，获得基因部分乃至全长cDNA序列，避免或减轻了构建与筛选cDNA库等繁锁的实验室工作。本从原理、应用有其在科学研究上产生的影响等方面对EST技术进行了概述。     

条件培养液改进小鼠胚胎干细胞嵌合体制备效率的观察

目的:探讨如何通过改善小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES)的培养条件来维持其未分化状态,提高嵌合体的制备效率.方法:以普通ES细胞培养液为对照,以TX-WES培养液为ES细胞条件培养液分别对15代以上的未工程化ES细胞和糖皮质激素受体(GR)工程化ES细胞进行培养并筛选,通过囊胚注射制作嵌合体来比较2种不同培养液培养ES细胞后嵌合体制备效率的差别.结果:未工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为25.0%,以TX WES培养液培养其嵌合率提高到53.8%(P＜ 0.05);GR工程化ES细胞以普通培养液培养其嵌合率为15.0%,以TX-WES培养液培养其嵌合率提高到52.3%(P＜0.05).结论:应用TX-WES培养液改善小鼠ES细胞的培养条件可提高嵌合体的制备效率,该方法为基因剔除小鼠研究的顺利开展奠定了良好的基础.     

医学细胞生物学综合性实验教学的设计与实施

在实验课教学中开展综合性实验是医学细胞生物学实验课教学改革的重要内容.介绍的综合性实验以小鼠胚胎干细胞的培养和基因转染为主线,穿插细胞的基本特征、细胞增殖动力学、细胞骨架、细胞融合及染色体的制备等教学内容,基本包括了常规医学细胞生物学实验课教学的主要内容.从课程内容、课程实施、课程小结等方面来介绍这一综合性实验课程的开展情况.     

精原干细胞的生物学特征

哺乳动物生精上皮是由高度复杂而排列有序的细胞群落组成，其生殖细胞在有丝分裂、减数分裂及减数分裂后细胞中经历着生成精子的变化过程。目前可利用动物模型研究精原细胞分化的停止和再启动，以探讨精原干细胞再生和分化的控制因素。生殖细胞凋亡是精子形成过程中不可避免的环节，其调节机制的研究已取得显著的进展。另外，精原干细胞的移植今后可能有重要的实际应用。     

精原干细胞的生物学特征

哺乳动物生精上皮是由高度复杂而排列有序的细胞群落组成 ,其生殖细胞在有丝分裂、减数分裂及减数分裂后细胞中经历着生成精子的变化过程。目前可利用动物模型研究精原细胞分化的停止和再启动 ,以探讨精原干细胞再生和分化的控制因素。生殖细胞凋亡是精子形成过程中不可避免的环节 ,其调节机制的研究已取得显著的进展。另外 ,精原干细胞的移植今后可能有重要的实际应用。     

胆管树干细胞在肝脏和胰腺再生中的研究进展

胆管树干细胞(biliary tree stem cells, BTSCs)是一类存在于胆管壁上胆周腺内的干细胞,具有分化为成熟肝细胞、胆管上皮细胞及胰腺内分泌细胞等类型细胞的多向分化潜能,在肝损伤治疗、糖尿病救治等方面具有巨大应用前景。本文结合胆管及其相关组织的胚胎发育过程、解剖学特征、BTSCs谱系分布特点及分子标志、体外扩增特性、基础及临床研究现状等,对BTSCs的生物学特性进行阐述,并对其在肝脏和胰腺器官再生中的研究进展和应用前景进行总结和展望。     

ALT水平对乙型肝炎肝硬化患者肝脏硬度值的影响

目的探讨ALT水平对乙型肝炎肝硬化肝脏硬度值(LSM)分布的影响。方法选取2012年1月-2015年5月在北京友谊医院及各分中心经肝穿刺诊断为乙型肝炎肝硬化的初治患者,收集入组患者的人口学特征、血常规、生化、HBV DNA、AFP、LSM、腹部超声和肝穿刺资料。比较乙型肝炎肝硬化患者中不同ALT水平的LSM分布特征。组间比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis H检验,计数资料组间比较采用χ~2检验,相关性分析采用Pearson相关和偏相关。结果共入组104例患者,根据ALT水平分成3组[≤2倍正常值上限(ULN)、2~5 ULN和≥5 ULN],3组在性别构成比、BMI、HBeAg状态、HBV DNA水平、Alb水平、PLT方面差异均无统计学意义(P值均0.05)。3组患者的LSM中位值分别为15.4、18.8及29.9 k Pa,LSM随着ALT升高而升高,3组间差异有统计学意义(χ~2=10.07,P0.05)。校正年龄后乙型肝炎肝硬化患者的LSM与ALT仍呈正相关(r=0.220,95%可信区间:0.101~0.468,P0.05)。结论在乙型肝炎肝硬化患者中,LSM随着ALT升高而升高,患者年龄在不同ALT水平组间有差异,而校正年龄因素后,LSM与ALT之间仍存在正相关关系。     

肝硬化失代偿与“再代偿”

肝硬化分期评价体系从关注疾病进展规律到进一步细化急性失代偿时疾病状态分类,提出病因治疗后失代偿期肝硬化可再代偿的概念,系统补充了失代偿期肝硬化分期评价体系,其中门静脉高压、系统性炎症变化等多种因素可影响失代偿期肝硬化的临床转归。肝硬化再代偿这一新概念的提出,需要更多的临床证据去阐明包括病毒性肝炎等在内的病因治疗后获得“再代偿”患者的临床特征及其潜在的机制。     

细胞工程实验教学改革的实践与探讨?

综合性实验教学是细胞工程实验教学改革的重要组成部分。为了提高教学质量,培养学生学习兴趣,以小班化教学为组成形式,开展细胞工程课程综合性实验教学模式改革,在实验教学内容整合、教学与科研相结合的讨论式教学模式及考核形式等方面进行实验教学改革。经过改革实践后,生物技术专业学生的细胞工程课程学习兴趣及综合素质得到明显提升。