白芍总苷对缺血性脑损伤后海马神经细胞线粒体保护作用的研究

目的探讨白芍总苷对缺血性脑损伤大鼠海马神经细胞线粒体（简称海马线粒体）的保护作用。方法选择雄性SD大鼠120只,分为6组,每组20只,除假手术组外采用阻断大脑右侧中动脉的方法复制缺血性脑损伤大鼠模型,造模后除模型组外,4组大鼠分别灌胃给予白芍总苷50、100、200mg/kg及尼莫地平1mg/kg（1次/d）,模型组和假手术组同步给予0.9%氯化钠溶液,疗程28d。采用HE染色法进行海马体组织病理学检查,透射电子显微镜下观察海马线粒体超微结构变化;分光光度法测定海马线粒体膜肿胀程度,荧光偏振度法测定膜流动性,Trinder酶试剂盒法测定膜总磷脂含量,荧光法测定膜通透性转换孔（MPTP）开放度和膜电位;采用Clark氧电极法测定海马线粒体呼吸功能,改进氧电极法测定呼吸酶（NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶）活性,无机磷法测定Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶活性,比色法测定ATP含量,原子化学发光法测定游离Ca2+水平。结果与模型组比较,白芍总苷200mg/kg组和尼莫地平1mg/kg组神经细胞数量和细胞形态基本正常;白芍总苷200mg/kg组海马线粒体数量、膜磷脂层和嵴结构基本正常。白芍总苷100、200mg/kg组和尼莫地平1mg/kg组海马线粒体A520nm值升高、微粘度（浊）值降低（P＜0.05或0.01）,MPTP开放度降低且膜电位升高（P＜0.05或0.01）,海马线粒体呼吸功能明显改善[Ⅲ态（R3）、呼吸控制率（RCR）、磷氧比（P/O）、氧化磷酸化效率（OPR）升高且R4降低,P＜0.05或0.01],NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性升高（P＜0.05或0.01）,Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶活性和ATP含量升高（P＜0.05或0.01）,游离Ca2+水平降低（P＜0.05）。白芍总苷100、200mg/kg组膜总磷脂含量升高（P＜0.05或0.01）。结论白芍总苷具有抑制缺血性脑损伤大鼠海马线粒体病变并保护线粒体功能的作用。     

白芍总苷通过抑制内质网应激减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的研究

目的 探讨白芍总苷（TGP）对大鼠脑缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用及其机制。方法 将240只实验用SD大鼠随机分为假手术组,模型组,TGP低（50mg/kg）、中（100mg/kg）、高（200mg/kg）剂量组和尼莫地平（NMP,15mg/kg）组,每组40只。采用线栓法阻断大脑中动脉2h复制大鼠脑I/R模型,造模前7d开始1次/d灌胃给药（假手术组和模型组灌胃给予生理盐水）。24h后,采用mNSS评分法评价大鼠神经功能,伊文思蓝渗透法检测血脑屏障（BBB）通透性,TTC染色法检测脑组织梗死体积,HE染色法和TUNEL染色法分别检测脑组织病理学改变和神经细胞凋亡,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）水平,Western blot法检测葡萄糖调控蛋白78（GRP78）、磷酸化胰腺内质网激酶（p-PERK）、C/EBP同源蛋白（CHOP）、核因子-?B（NF-?B）、激活型半胱胺酸蛋白酶-12（Cleaved Caspase-12）、激活型半胱胺酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）蛋白表达。结果 与模型组比较,TGP中、高剂量组和NMP组mNSS评分降低[(9.98±1.07)分、(6.41±0.83)分、(8.26±0.95)分比(14.63±1.52)分,P均<0.01]、伊文思蓝渗透量降低[(7.76±1.50)μg/g、(5.49±1.13)μg/g、(7.31±1.20)μg/g比(12.71±2.04)μg/g,P均<0.01]、脑梗死体积降低[(24.93±4.12)%、(16.52±3.05)%、(19.08±3.71)%比(39.48±5.16)%,P均<0.01];大脑皮质神经细胞形态结构损伤和凋亡明显改善,凋亡指数（AI）降低[(43.51±6.27)%、(22.34±4.85)%、(37.29±5.36)%比(68.15±8.43)%,P均<0.01];TNF-α水平降低[(1.77±0.24)ng/mL、(1.61±0.19)ng/mL、(1.89±0.26)ng/mL比(2.26±0.31)ng/mL,P均<0.01]、IL-1β水平降低[(41.76±6.21)pg/mL、(36.98±5.73) pg/mL、(41.15±6.40)pg/mL比(52.64±7.02)pg/mL,P均<0.01]、IL-6水平降低[(15.72±3.14)pg/mL、(9.84±2.63)pg/mL、(13.07±2.91)pg/mL比(21.34±3.85) pg/mL,P均<0.01];GRP78表达量降低[(0.41±0.09)、(0.18±0.05)、(0.27±0.08)比(0.96±0.21),P均<0.01]、p-PERK表达量降低[(0.75±0.14)、(0.24±0.05)、(0.38±0.09)比(0.94±0.19),P<0.05或P<0.01]、CHOP表达量降低[(0.14±0.04)、(0.07±0.03)、(0.19±0.05)比(0.44±0.10),P均<0.01]、NF-?B表达量降低[(0.67±0.15)、(0.67±0.15)、(0.58±0.13)比(0.89±0.18),P均<0.01]、Cleaved Caspase-12表达量降低[(0.74±0.16)、(0.52±0.11)、(0.61±0.15)比(0.95±0.22),P<0.05或P<0.01]、Cleaved Caspase-3表达量降低[(0.18±0.06)、(0.12±0.03)、(0.35±0.08)比(0.64±0.13),P均<0.01]。与NMP组比较,TGP高剂量组mNSS评分降低[(6.41±0.83)分比(8.26±0.95)分,P<0.01]、伊文思蓝渗透量降低[(5.49±1.13)μg/g比(7.31±1.20)μg/g,P<0.01];神经细胞形态结构损伤明显改善,AI降低[(22.34±4.85)%比(37.29±5.36)%,P<0.01];TNF-α水平降低[(1.61±0.19) ng/mL比(1.89±0.26)ng/mL,P<0.05]、IL-6水平降低[(9.84±2.63)pg/mL比(13.07±2.91)pg/mL,P<0.05];GRP78表达量降低[(0.18±0.05)比(0.27±0.08),P<0.01]、p-PERK表达量降低[(0.24±0.05)比(0.38±0.09),P<0.01]、CHOP表达量降低[(0.07±0.03)比(0.19±0.05),P<0.01]、NF-?B表达量降低[(0.67±0.15)比(0.58±0.13),P<0.05]、Cleaved Caspase-3表达量降低[(0.12±0.03)比(0.35±0.08),P<0.01]。结论 TGP对大鼠脑I/R损伤具有保护作用,其机制可能与抑制内质网应激相关炎症和凋亡通路有关。     

大蒜素通过抑制内质网应激减轻心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的:探讨大蒜素对大鼠心肌缺血再灌注(MIR)损伤的保护作用及内质网应激(ERS)的影响.方法:通过夹闭左冠状动脉前降支30 min复制MIR大鼠模型,实验设假手术组、模型组、大蒜素低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)剂量组,每组各20只.成模后,大蒜素各剂量组腹腔注射给药,假手术组和模...     

白芍总苷抑制局灶性脑缺血大鼠海马神经元损伤的机制研究

目的探讨白芍总苷抑制局灶性脑缺血海马神经元损伤的作用机制。方法通过短暂性（2h）阻断大脑中动脉制备局灶性脑缺血大鼠模型。白芍总苷高、中、低剂量组分别按200、100、50mg/kg灌胃白芍总苷,假手术组、模型组给予0.9%氯化钠溶液,1次/d,共28d。采用HE染色法观察海马神经元病理学改变,TUNEL法观察海马神经元凋亡情况并计算凋亡指数（AI）,透射电子显微镜下观察海马神经元超微结构变化,Westernblot法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、NF-资B表达,黄嘌呤氧化酶法、生化分析法、硫代巴比妥酸法分别检测抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量,ELISA法检测炎症细胞因子IL-1茁、IL-6、TNF-琢水平。结果高、中剂量白芍总苷能明显改善海马神经元病理性改变及神经元超微结构病变,抑制海马神经元凋亡（P＜0.05）;明显上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax、NF-资B表达,提高Bcl-2/Bax（均P＜0.05）;提高SOD、CAT活性,降低MDA含量（均P＜0.05）;降低IL-6、TNF-琢水平（均P＜0.05）。其中高剂量白芍总苷可降低IL-1茁水平（P＜0.05）。结论白芍总苷能调控凋亡相关蛋白表达,抑制氧化应激和炎症级联反应,这些作用可能是其抑制局灶性脑缺血后海马神经元损伤的重要机制。     

白芍总苷预处理对缺血性脑损伤大鼠血脑屏障保护作用的研究

目的探讨白芍总苷（TGP）预处理对缺血性脑损伤大鼠血脑屏障的保护作用及其机制。方法采用随机数字表法将180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平（NMP）10mg/（kg·d）预处理组和TGP50、100、200mg/（kg·d）预处理组,每组30只;采用阻断大脑右侧中动脉的方法制备缺血性脑损伤大鼠模型。造模前7d开始,TGP50、100、200mg/（kg·d）预处理组分别1次/d灌胃给予浓度为10、20、40mg/ml的TGP溶液（5ml/kg）,NMP10mg/（kg·d）预处理组同步灌胃给予2mg/ml的NMP溶液（5ml/kg）,假手术组和模型组同步给予0.9%氯化钠溶液（5ml/kg）。造模术后24h行各指标检测：伊文思蓝渗透法测定血脑屏障通透性,干湿比重法计算脑组织含水量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性,高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶（CAT）活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量,ELISA法测定TNF-α、IL-1β含量,Westernblot法检测脑组织闭合蛋白（Occludin）、闭锁连接蛋白-1（ZO-1）、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9蛋白表达水平。结果与模型组比较,经TGP100、200mg/（kg·d）或NMP10mg/（kg·d）预处理能够明显抑制缺血性脑损伤大鼠脑组织伊文思蓝含量和含水量升高,抑制SOD、CAT活性降低和MDA、TNF-α、IL-1β含量升高,抑制Occludin、ZO-1蛋白表达下调和MMP-2、MMP-9蛋白表达上调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与NMP10mg/（kg·d）预处理组比较,经TGP200mg/（kg·d）预处理能够抑制脑组织伊文思蓝含量升高,抑制SOD活性降低和MDA、TNF-α含量升高,抑制Occludin、ZO-1蛋白表达下调和MMP-2蛋白表达上调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论TGP预处理对缺血性脑损伤大鼠血脑屏障具有一定的保护作用,其机制可能与抑制氧化应激和炎症反应、抑制Occludin、ZO-1蛋白表达下调和MMP-2、MMP-9蛋白表达上调有关。     

1例美罗培南致血小板减少

1例老年女性因慢性阻塞性肺疾病急性加重期接受美罗培南、低分子肝素治疗1 d后出现黑便、血小板减少.停用低分子肝素后,黑便好转,但血小板进一步减少,停用美罗培南后血小板逐步恢复.考虑为美罗培南引起血小板减少,联合低分子肝素导致消化道出血.     

鸡矢藤环烯醚萜苷体外抗肿瘤活性研究

摘 要 目的：探讨并评价鸡矢藤环烯醚萜苷(IGPS)化学组成和体外抗肿瘤活性。方法: 采用超声提取和大孔树脂分离纯化的方法制备IGPS,并用LC MS方法鉴定分析其化学组成;利用四甲基偶氮唑蓝( MTT)法研究其对正常细胞小鼠成纤维细胞系NIH 3T3的毒性及人肺癌细胞系A549、SPC A 1,人结肠癌细胞系COLO205、HCT 116,人白血病细胞系HL 60、K562,人乳腺癌细胞系MCF7、BT 549,人胃腺瘤细胞系SGC7901,人子宫颈癌细胞系Hela的增殖抑制作用;用流式细胞术检测IGPS对SGC7901、Hela和HCT 116肿瘤细胞凋亡的影响。结果: 提取纯化的IGPS主要由鸡矢藤苷、鸡矢藤次苷、鸡矢藤苷酸和车叶草苷组成;与阴性对照组相比,IGPS浓度在500μg·ml^-1及以下时对正常细胞NIH 3T3无毒性作用;对SGC7901、Hela、HCT 116、COLO205、BT 549和MCF7细胞均有细胞增殖抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.05),而对人肺癌细胞系A549、SPC A 1和人白血病细胞系HL 60、K562无细胞增殖抑制作用;IGPS对SGC7901细胞抑制作用最强,IC50为156.6 μg·ml^-1;IGPS能够有效诱导SGC7901、Hela和HCT 116细胞的凋亡。结论: 鸡矢藤环烯醚萜苷对多种肿瘤细胞具有一定的体外抗肿瘤作用。