Studies on the function and regulation of low－affinity glucocorticoid receptor

Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｌｏｗ－ａｆｆｉｎｉｔｙｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｒｅｃｅｐｔｏｒ￥ＬｅＹｉｎｇｙｉｎｇ（乐颖影）；ＸｕＲｅｎｂａｏ（徐仁宝）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏ...     

高、低亲和力糖皮质激素受体同源性的研究

我们以前的工作表明糖皮质激素(GC)靶细胞上除存在经典的高亲和力、低容量GC受体(GR_H)外,尚存在低亲和力GC受体(GR_L)。GR_L可介导大剂量GC的作用。本文初步探讨了GR_L与GR_H在分子结构以及基因水平上的相互关系。利用两种抗大鼠肝GR_H单克隆抗体(MabN250:为抗GR_H N端免疫活性区的单抗,MabBuGR_1:为抗GR_H DNA结合区的单抗)制备Mab-Sepharose 4 B亲和层析柱,将[~3H]曲安缩酮(TA)与大     

大鼠外周血白细胞糖皮质激素受体的测定

为了测定糖皮质激素受体的结合参数，以利于今后进步探讨ＧＲ改变在某些疾病发生中的作用及对治疗的指导意义。材料和方法以「＾３Ｈ」地塞公为配基，建立了大鼠外周血ＧＲ的放射配体结合测定方法。结果Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图分析「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合呈一直线，表观结合容量和平衡解离常数分别为（３３８７±３２８）位点细胞和（２。３５±１．１３）ｎｍｏｌ／Ｌ（ｘ±ｓ，ｎ＝５），「＾３Ｈ」Ｄｅｘ特异结合有明显的甾体特     

Studies on the homogeneity between high-and lowaffinity glucocorticoid receptor

The homogeneity between the high-and low-affinity glucocorticoid receptors(GR_H and GR_L)was testified by immunoaffinity chromatography using Mab N250(recognizing the immunogenic domain at the N terminal of GR_H)and Mab BuGR1(recognizing the DNA binding domain of GR_H).The specific binding peak of 0.98μmol/L[~3H]triamcinolone acetonide(TA)was higher than that of 52.50nmol/L[~3H]TA.The re-sult suggests that the antigenic determinants of GR_L are similar to those of GR_H.ThecDNA of rat liver GR_H was introduced into GR_H-and GR_L-negative mouse fibroblast cellline E82.A3 by calcium phosphate coprecipitation.A number of clones which expressGR_H were selected with G418(400μg/ml).The results of radioligand binding assay indicatethat GR_H gene is expressed successfully and GR_L also may be encoded by GR_H gene.     

大鼠外周血白细胞糖皮质激素受体的测定

目的为了测定糠皮质激素受体（GR）的结合参数,以利于今后进一步探讨GR改变在某些疾病发生中的作用及对治疗的指导意义。材料和方法以［3H］地塞米松（Dex）为配基,建立了大鼠外周血GR的放射配体结合测定方法。结果Scatchard作图分析[3H]Dex特异结合呈一直线,表现结合容量(Ro)和平衡解离常数（Kd）分别为（3387±328）位点／细胞和（2.35±1．13）nmol/L（±s,n=5）,[3H]Dex特异结合有明显的甾体特异性。结论大鼠外周血白细胞[3H]Dex特异结合部位具备了鉴定受体所必须的基本条件。     

大鼠烫伤后肝胞液糖皮质激素特异结合部位的变化

本文用Pseudoscatchard分析法测定了对照和烫伤后1、12,24小时大鼠肝胞液糖皮质激素特异结合部位结合参数的变化。与对照组相比,烫伤后1小时,糖皮质激素受体(GR)的结合容量显著减少,烫伤后12小时部分恢复,烫伤后24小时完全恢复。糖皮质激素低亲和力结合部位(LAGS)的结合容量在烫伤后12小时有下降趋势,但t检验与对照组相差不显著。GR和LAGS的解离常数在烫伤后无显著变化。对以上变化的可能病理和临床意义作了讨论。     

糖皮质激素受体基因在受体缺失型哺乳动物细胞中的表达

本文在证实小鼠成纤维细胞系Ｅ８２．Ａ３无糖皮质激素受体（ＧＲ）的基础上，采用磷酸钙共沉淀法，用含大鼠肝ＧＲｃＤＮＡ的质粒ｐＲＧＲ－Ｎｅｏ转染给Ｅ８２．Ａ３细胞，并用Ｇ４１８筛选稳定表达细胞，Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析表明，转化细胞特异性结合［３Ｈ］曲安缩酮的结合参数及甾体特异性与经典ＧＲ相同，说明所筛选得的细胞确实表达了ＧＲ。     

氢化可的松对原代培养大鼠肝细胞酪氨酸转氨酶的诱导作用

为了探讨糖皮质激发低亲和力结合部位（ＬＡＧＳ）介导大剂量糖皮质激素（ＧＣ）的效应，本文研究了氢化可的松（Ｆ）对原代培养大鼠肝细胞酪氨酸转氨酶（ＴＡＴ）诱导的量效关系。结果表明，Ｆ浓度在１—１０ｎｍｏｌ／Ｌ时，量效关系呈饱和趋势；超过１０ｎｍｏｌ／Ｌ直到１０μｍｏｌ／Ｌ，ＴＡＴ活性又不断上升，这种效应可被糖皮质激素受体（ＧＲ）的竞争性拮抗剂ＲＵ４８６完全阻断。提示ＬＡＧＳ也能介导Ｆ对ＴＡＴ活性的诱导。