目标外显子组捕获测序发现INPP5E突变致Joubert综合征1例

目的:鉴定一个中国Joubert综合征家系的致病基因及位点。方法:对该Joubert综合征家系的先证者进行目标外显子组捕获测序,通过生物信息学分析找到候选的致病基因及位点,利用聚合酶链式反应(PCR)和Sanger测序进行验证。结果:在先证者的9号染色体INPP5E基因上存在2个杂合变异位点,分别为c.1524CG,p.Asp508Glu以及c.1688GA,p.Arg563His。这两个位点在家系中符合遗传共分离规律。结论:目标区域捕获测序结合Sanger测序发现INPP5E基因的c.1524CG以及c.1688GA位点为引起该Joubert综合征家系临床病变的变异位点,这是国内首次报道的由INPP5E基因突变导致的Joubert综合征病例,且c.1524CG为首次发现的新致病位点。     

断指再植术的术后观察与护理136例

目的 探讨断指再植术成功的关键因素。方法 对136例断指再植术患者的护理进行回顾总结。结果 共再植136例185指，其中不完全离断144指，完全离断41指，离断时间20～600min，平均300min。按再植指计算，术后存活182指，存活率99．5％。结论 断指再植成功的关键取决于4个方面：高超的显微外科手术，耐心细致的心理护理，术后密切观察患指血运，以及指导患者正确的功能锻炼。     

桃仁在小鼠生理性月经样模型中对子宫内膜崩解的作用

目的:研究桃仁在小鼠生理性月经模型中的作用。方法:假孕雌鼠蜕膜化诱导后切除双侧卵巢,引发孕酮撤退,造成蜕膜化子宫内膜崩解坏死,模拟月经样出血,建立小鼠生理性月经样模型。在孕酮撤退前至孕酮撤退后24h给予模型小鼠桃仁30mg/(kg·次),观察小鼠子宫大体形态与组织形态变化。结果:孕酮撤退24h后,与对照组相比,给予桃仁的小鼠子宫颜色较深,充血明显;崩解的蜕膜化组织以及崩解组织外围的基底层,有大量红细胞渗出。而空白对照组未见此现象。桃仁处理小鼠脱膜相对崩解面积与对照组未见显著差异,而其相对充血面积高于对照组(P=0.009)。结论:桃仁能够促进小鼠月经样模型崩解期的红细胞渗出,其药理作用与作用机制有待进一步研究。     

月经发生中低氧诱导因子-1A对VEGF的调节

目的在小鼠月经样模型和人蜕膜化子宫内膜基质细胞模拟月经发生基础上,探索低氧诱导因子-1A(HIF1A)对血管内皮生长因子(VEGF)的表达调控作用,以及月经发生中HIF1A对VEGF mRNA表达的调控机制。方法建立小鼠月经样模型,用ChIP方法检测HIF1A是否直接调控Vegf mRNA的表达;利用HIF1A抑制剂甲氧雌二醇(2ME)抑制HIF1A的功能,检测小鼠月经样模型中HIF1A、VEGF蛋白的表达量;人子宫内膜基质细胞体外诱导蜕膜化并模拟月经发生,检测HIF1A与VEGF mRNA的表达;用siRNA敲降的方法抑制HIF1A,检测VEGF mRNA的表达。结果小鼠月经样模型在孕酮撤退0h,HIF1A结合的Vegf promoter的相对百分比较低,随后在8h和12h逐渐上升,在12h达到峰值(P0.05);2ME抑制HIF1A入核的同时,抑制了VEGF的表达量(P0.05);人蜕膜化子宫内膜基质细胞中,孕酮撤退显著上调HIF1A和VEGF mRNA的表达量(P0.01);敲降HIF1A后,VEGF mRNA的上调受到明显的抑制(P0.01)。结论在月经发生中,孕酮撤退能够激活HIF1A转录因子的功能,HIF1A被激活后,结合于VEGF promoter区并启动VEGF mRNA的表达。     

白细胞在小鼠药理性孕酮撤退月经样改变模型中的作用

探讨小鼠药理性孕酮撤退月经样改变模型中白细胞的作用.方法 雌性去势NIH小鼠在蜕膜化后给予米非司酮,间隔8 h检测白细胞的数量和定位以及基质金属蛋白酶(MMP)-9的定位.结果 白细胞在双侧子宫角崩解前(给予米非司酮后16 h)和修复期(给予米非司酮后32 h)较多,其在月经中的作用可能依赖于蜕膜化状态.与生理性孕酮撤退月经模型存在差异,可能是由于内分泌环境造成的,源自嗜中性粒细胞的MMP-9定位存在区域性分布特征.结论 在此模型中,白细胞对子宫内膜崩解和修复重建起作用.     

金属基质蛋白酶MMP3和MMP7在小鼠药理性孕酮撤退月经模型中的定位

目的 本研究旨在研究金属基质蛋白酶(MMPs)在小鼠药理性孕酮撤退月经模型中的定位. 方法 卵巢切除的小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮处理,免疫组化检测金属基质蛋白酶MMP3和MMP7定位. 结果 MMP3从米非司酮处理后0h到24 h,存在于腔上皮下的局部基质、上皮、蜕膜化区域以及基底层和功能层的交界处；从32 h到48 h存在于腔上皮以及其下基质区域.MMP7从0h到24 h存在于基底层,上皮和中间蜕膜化区域,从32 h到48 h与MMP3的定位相一致. 结论 MMP3和MMP7蛋白质在此模型中定位呈区域性分布.     

五子衍宗丸和金匮肾气丸促进小鼠生精能力恢复基因表达谱的研究

目的:对五子衍宗丸和金匮肾气丸促进无精子症模型小鼠生精能力恢复的睾丸全基因表达谱进行比较分析,获得2中药改善生精能力的差异表达基因。方法:白消安致小鼠无精子症模型灌胃给予五子衍宗丸(生药0.048g/日/只)和金匮肾气丸(生药0.04g/日/只)78天(2个生精周期),以正常动物为对照,通过基因芯片技术进行数据分析。结果:在检测的31722个基因中,给药小鼠与正常对照组比较,有32个共同上调的基因,12个共同下调的基因;五子衍宗丸组均表现为以基因下调为主,金匮肾气丸组均表现为以基因上调为主。利用KEGG进行Pathway分析五子衍宗丸和金匮肾气丸基因表达谱的数据,差异表达基因主要分布于脂肪细胞因子信号通路、细胞周期、MAPK信号通路、Wnt信号通路、Notch信号通路、Ecm受体作用、Jak-Stat信号通路、细胞因子-细胞因子受体作用等8个信号通路。结论:两种经典补肾中药均具有较强的、明确的促进生精功能恢复的作用,但对睾丸生精能力的恢复作用明显不同。五子衍宗丸可能通过刺激小鼠的免疫功能,促进生精能力的恢复,而金匮肾气丸通过影响细胞增殖相关的多个信号通路刺激生精细胞的再生。     

新型超细晶铜材料植入大鼠子宫中Cu2+释放及对子宫组织的影响

目的:研究新型超细晶铜材料与普通铜材料植入大鼠子宫腔的Cu2+释放以及对子宫形态的影响。方法:将普通铜材料(对照组)和新型超细晶铜材料(实验组)铜丝,分别植入12周龄雌性Wistar大鼠左侧子宫,右侧未植入子宫为自身对照。分别在12 h、1 d、3 d、7 d、15 d和30 d处死大鼠,收集外周血清、宫腔灌洗液、子宫和肝脏组织,用电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP)测定样本中Cu2+的含量,并对子宫组织行常规组织形态学分析。结果:宫腔植入铜材料后,与对照组相比,实验组大鼠血清及肝脏组织中的Cu2+浓度无差异。两组宫腔灌洗液中Cu2+浓度在植入3d时最高,7d、15d时降低且实验组低于对照组(P<0.05);两组子宫组织Cu2+浓度在植入12 h时最高,植入1d、3d时降低(P<0.05),随后趋于平稳,且植入7d、15d时实验组Cu2+浓度低于对照组(P<0.05)。两组子宫组织在植入早期表现为急性无菌性炎症,但实验组组织损伤修复显示更快。结论:新型超细晶铜材料作为宫内节育器新材料,能够在时间和程度上显著降低Cu2+暴释现象,有望成为替代现有铜材料的重要选择。     

五子衍宗丸对无精子症模型小鼠生精能力恢复作用的基因表达谱研究

目的:研究五子衍宗丸对无精子症模型小鼠生精能力恢复作用的睾丸全基因表达谱。方法:利用白消安无精子症小鼠动物模型,给予五子衍宗丸灌胃给药78天(2个生精周期),以造模后自然恢复、溶媒和正常动物为3种对照,通过基因芯片技术进行数据分析。结果:五子衍宗丸对睾丸生精能力具有明显促进作用,在睾丸全基因表达谱中具有明显调节作用的基因中,差异表达2倍以上的基因842个(占2.65%,上调355个,下调487个),具有较强烈作用的差异表达4倍、5倍以上的上调基因和下调基因分别27个、9个和72个、23个,提示五子衍宗丸在促进生精过程中的基因表达以负向抑制/下调作用为主,以正向促进/上调作用为辅;主要通过对黏附功能、细胞周期、细胞因子-细胞因子受体作用、Hedgehog信号通路、Jak-Stat信号通路、Mapk信号通路、Notch信号通路、Toll样受体信号通路、Wnt信号通路等9个信号通路系统的干预调节实现生精能力提高的效果。结论:五子衍宗丸对无精子小鼠生精能力的恢复作用,主要是对生精干细胞的诱导分化和细胞增殖分裂相关基因的负向下调作用的调节并通过多途径实现的。     

洗洁精对雄性大鼠生殖功能的影响

目的:评价家庭日常生活用洗洁精对雄性大鼠的生殖毒理。方法:将2种市售民用洗洁精(LB、BM)以1/万、1‰、1%3个剂量溶于饮水中,10周龄SD雄性大鼠自由摄取连续100d,以饮用正常水大鼠为对照组,进行比较分析。结果:LB和BM洗洁精3个剂量下,对动物生长发育和体重均无明显影响,对生殖系统的附睾和会阴复合体组织重量无明显影响,在1%剂量下睾丸组织明显减轻(P(0.05),比对照组分别下降12.3%和11.7%。2种洗洁精在3个剂量下的储精囊和前列腺均水肿,重量明显增加,表现出明显的剂量效应关系;精子功能分析中运动性、精子数目、精子形态等指标,均明显下降(P(0.05～0.0001),且表现出明显的剂量效应关系;睾丸组织形态分析显示LB在1%剂量下生精功能受到明显抑制和阻断。实验结果表明生殖毒性LB强于BM。结论:雄鼠在大剂量长期摄入LB和BM洗洁精可产生明显的生殖毒性作用。