CTGF对破骨前体细胞RAW264.7增殖及碳酸酐酶Ⅱ分化的影响

目的研究结缔组织生长因子(CTGF)对体外培养的破骨细胞前体细胞RAW264.7增殖及对核因子Kappa B配体受体(RANKL)诱导体外培养的破骨细胞前体细胞RAW264.7分化为成熟多核破骨细胞的影响。方法使用200 ng/mLCTGF干预培养的破骨细胞前体细胞RAW264.7,采用3H-TdR掺入法检测RAW264.7细胞增殖率;使用200 ng/mL CTGF与RANKL单独或共同处理RAW264.7细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察TRAP阳性多核细胞,Western blot检测碳酐酶Ⅱ蛋白的表达。结果 CTGF可显著促进RAW264.7细胞增殖;200 ng/mLCTGF与RANKL共同处理RAW264.7细胞可促进RAW264.7细胞分化为成熟多核破骨细胞;200 ng/mL CTGF与RANKL共同处理RAW264.7细胞可促进RAW264.7细胞碳酐酶Ⅱ蛋白的表达。结论 CTGF促进体外培养的破骨细胞前体细胞RAW264.7增殖,促进RANKL诱导的破骨细胞前体细胞RAW264.7分化为成熟多核破骨细胞。     

重组结缔组织生长因子对体外培养成骨细胞核结合因子α1基因表达的影响

目的:研究发现,结缔组织生长因子可促进软骨细胞和成骨细胞的增殖及其表型的发生,在骨骼发育以及骨量维持方面发挥重要作用,但其对成骨细胞的作用机制目前尚不清楚。观察重组结缔组织生长因子对体外培养人成骨细胞核结合因子α1基因表达的影响。方法:实验于2006-01/2007-01在日照市人民医院完成。①实验材料:外科手术取正常成人髂骨松质骨,患者对试验知情同意。②实验方法:体外培养正常人成骨细胞,用不同浓度0,50,100,200,1000μg/L的重组结缔组织生长因子(0μg/L作为空白对照组)干预48h后,抽提细胞总RNA和总蛋白。③实验评估:采用半定量反转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹分析方法观察不同浓度重组结缔组织生长因子对体外培养人成骨细胞核结合因子α1基因表达的影响。结果:半定量反转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹结果显示,50,100,200,1000μg/L重组结缔组织生长因子干预后均可显著上调成骨细胞核结合因子α1的表达,并呈明显剂量依赖关系,与空白对照组比较,差异显著(P<0.01)。结论:重组结缔组织生长因子可剂量依赖性上调成骨细胞核结合因子α1基因的表达,核结合因子α1可能参与了结缔组织生长因子对成骨细胞增殖和分化的调节。     

2型糖尿病家系一级亲属同胞代谢综合征患病状况的研究

研究2型糖尿病（T2DM）家系一级亲属同胞（n=142）和同胞配偶中的无糖尿病家族史的一级亲属同胞（n=138）代谢综合征（MS）的患病状况，结果显示T2DM家系一级亲属同胞MS的患病率显著高于无糖尿病家族史的一级亲属同胞（P〈0．01）。     

雌二醇诱导人成骨样MG-63细胞表达下调基因的筛查

目的 筛查17β雌二醇（E2）诱导MG-63细胞下调表达cDNA片段，寻找MG-63细胞中E2相关基因，探讨雌激素的骨保护作用机制。方法 用改良cDNA代表性差异分析法筛查E2干预MG-63细胞表达下调的cDNA片段，Southern杂交和快速Northern杂交分析cDNA片段来源后。克隆到pGEM-Teasy载体，蓝白筛选挑取阳性克隆进行测序和同源性比较分析。最后选取部分阳性差异表达克隆行Northern杂交分析。结果 得到2个表达下调的cDNA条带，证实差异表达cDNA片段经E2干预后表达下调。随机挑取20个克隆测序得到19个序列，分别代表14个不同基因，均与已知基因高度同源，这些基因与骨基质形成、转录信号转导及细胞分化发育调节等相关，其中1个克隆经Northern杂交证实其受E2干预表达下调。结论 cDNA代表性差异分析法可快速筛查差异表达基因。MG-63细胞受E2诱导下调表达的部分基因可能参与了雌激素介导的骨重建过程从而起到骨保护作用。     

17β-雌二醇对体外培养人成骨细胞CTGF和PAIP-1基因表达的作用

目的　观察结缔组织生长因子 (CTGF)和多聚腺苷酸结合蛋白相互作用蛋白 1(PAIP 1)mRNA在体外培养的人成骨细胞增殖分化不同阶段的表达 ,研究 17β- 雌二醇 (E2 )对成骨细胞CTGF和PAIP 1mRNA表达的作用 ,探讨雌激素对骨组织保护作用的新机制。方法　用改良的钙 钴法ALP染色 ,vanGieson法 1型胶原染色 ,0. 1%茜素红矿化结节染色 ,半定量RT- PCR检测成骨细胞碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素 (OC)和 1型胶原mRNA的表达 ,半定量RT- PCR和Northernblot方法检测成骨细胞CTGF和PAIP- 1mRNA表达。结果　半定量RT -PCR和组织化学染色的结果均表明 ,成骨细胞接种培养后 0～11d为细胞增殖阶段 ,7～ 15d为骨基质成熟阶段 ,15d后为骨基质矿化阶段 ;在成骨细胞培养的不同阶段 ,均检测到CTGF和PAIP- 1mRNA的表达 ,E2 可显著下调成骨细胞CTGFmRNA的表达 ,呈时间剂量依赖关系 (P <0 . 0 1) ,但对PAIP 1mRNA表达无明显作用。结论　E2 时间剂量依赖性下调成骨细胞CTGFmRNA的表达 ,但对PAIP 1mRNA表达无明显影响。     

40例糖尿病死因分析

本收集我院1999年～2004年间住院死亡的40例糖尿病患，对其死因进行分析。临床资料1999年～2004年我院共收治糖尿病患1016例，其中1型糖尿病67例，2型糖尿病949例；男性443例。女性573例。死亡40例，男女各20例，糖尿病平均病程11．60年，平均死亡年龄男性74．85岁，女性74．10岁，住院病死率3．84％。男女病例病死率见表1。     

硫辛酸治疗糖尿病及糖尿病慢性并发症

近年来的研究表明,硫辛酸不仅参与葡萄糖的代谢过程,而且直接介导胰岛素调节的葡萄糖在外周组织中的分布,同时它还具有清除自由基的作用,对糖尿病慢性并发症有一定的防治作用。现综述如下。１对糖代谢的影响胰岛素抵抗是２型糖尿病的重要发病机制之一,糖尿病患者在胰...     

Pramlintide能改善胰岛素治疗的2型糖尿病患者的代谢

Ｐｒａｍｌｉｎｔｉｄｅ是一种人工合成的胰岛淀粉样多肽类似物,在１型糖尿病病人中,已证明应用Ｐｒａｍｌｉｎｔｉｄｅ能降低餐后血糖及血浆果糖胺。本文旨在证明在使用胰岛素治疗的２型糖尿病病人中,加用Ｐｒａｍｌｉｎｔｉｄｅ能否改善代谢控制。设计和方法２０３名...     

糖尿病性神经病变的发病机制及治疗进展

糖尿病神经病变是Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病患者常见的慢性并发症,严重影响糖尿病患者的生活质量。近年的研究表明,糖尿病神经病变是多因素作用的结果,其发病机理主要与高糖引起的代谢紊乱、神经缺血、必需脂肪酸代谢异常、自身免疫机制异常及神经修复异常等因素有关。本文就糖尿病神经病变的发病机理及其防治作一简述。1糖尿病种经病变的发病机理1．1高糖引起代谢紊乱1．1．1多元醇通路激活多元醇通路包含醇糖还原酶（AR）和山梨醇脱氢酶（SD）。AR在高糖条件下被激活,并与一氧化氮合成酶竞争性摄取NADPH,将葡萄糖转化为山梨醇。山梨醇在…     

1型糖尿病基因治疗研究进展

1型糖尿病自身免疫发病机制涉及到免疫耐受、自身抗原提呈、T细胞活化以及细胞凋亡等异常。转染β细胞特异性抗原基因可诱导免疫耐受,转染前炎性因子受体拮抗蛋白基因及干扰协同刺激信号可阻止抗原提呈细胞及T细胞活人,可通过抑制细胞凋亡来阻断针对胰岛的自身免疫反应,最终达到治疗糖尿病的目的。此外,通过转基因技术可使非胰岛β细胞获得合成分泌胰岛素的能力,用于治疗胰岛素缺乏所致糖尿病亦将成为可能。