管竞环论肾系疾病辨证论治选药组方筛选法

管竞环是武汉市第一医院主任医师、教授,全国第二、三、四批名老中医药专家学术经验继承工作指导老师,世界中医药学会联合会肾病专业学术顾问,从事中医肾病临床、科研、教学近50年,中医理论功底深厚,临床疗效卓著;在科研方面,首次运用元素检测方法把中药四性、五味和方剂四性成功进行了量化,并出版了《中医药理论量化与微量元素》,     

脂多糖促进人近端肾小管上皮细胞TLR4的表达

目的:研究人近端肾小管上皮细胞(HKC)在脂多糖(LPS)刺激下Toll样受体4(TLR4)的表达及作用。方法:实验细胞分两组,LPS刺激组(50mg/LLPS加入体外培养的HKC)和正常对照组;应用免疫荧光染色在激光共聚焦显微镜下观察LPS刺激24h后TLR4在HKC中的分布及表达强弱;半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测各组TLR4及内参照β-actin在mRNA水平和蛋白水平的表达量;Annexin V-FITC结合流式细胞仪检测各组细胞的早期凋亡率情况。结果:LPS刺激组TLR4的免疫荧光强度显著高于正常对照组,TLR4主要分布于HKC的胞膜及胞质区;刺激组TLR4 mRNA表达高于正常对照组(1.051±0.082比0.38±0.036),差异有显著性(P<0.01);刺激组TLR4蛋白表达高于正常对照组(0.371±0.033比0.105±0.008),差异有显著性(P<0.01);LPS刺激组细胞的早期凋亡率(41.29%)显著高于正常对照组(2.36%)。结论:LPS能刺激HKC高表达TLR4,且促进HKC的早期凋亡,TLR4可能在LPS诱导的HKC凋亡中发挥一定的作用。     

重组人促红细胞生成素对人肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护机制

目的:探讨重组人促红细胞生成素(rHuEPO)在人肾小管上皮细胞(HK-2)缺血再灌注损伤保护机制。方法:体外培养HK-2细胞,随机分为5组:①正常对照组;②缺血再灌注损伤组;③预先给药组:缺血损伤30min前预先给予rHuEPO;④即时给药组:再灌注损伤5min前给予rHuEPO;⑤延迟给药组:再灌注损伤30min后给予rHuEPO。用AnnexinV/PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡;用RT-PCR及Western印迹法分别检测蛋白激酶B(Akt)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA及蛋白活性水平。结果:缺血再灌注诱导细胞损伤后,细胞内Akt(Ser473)、GSK-3β(Ser9)水平下降,Caspase-3基因及蛋白水平均上调,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),而Akt、GSK-3β基因水平不变(P>0.05);rHuEPO各干预组与缺血再灌注损伤组相比,细胞内Akt(Ser473)、GSK-3β(Ser9)表达水平上调,Caspase-3基因及蛋白水平均下调,预先给药组调节幅度最大,即时给药组次之,延迟给药组上调幅度最小,差异均有统计学意义(P<0.05);同时预先给药组(9.17%±0.35%)、即时给药组(12.47%±0.86%)和延迟给药组(15.63%±0.75%)细胞凋亡率明显低于缺血再灌注损伤模型组(17.97%±1.06%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:rHuEPO可能通过增强Akt活性,抑制其下游因子GSK-3β蛋白活性,从而抑制其下游凋亡蛋白酶Caspase-3活性的变化,减轻了抗霉素A诱导的人肾小管上皮细胞的缺血再灌注损伤。     

分阶段辨证施治配合免疫抑制剂治疗原发性肾病综合征临床疗效观察

目的观察分阶段辨证施治配合免疫抑制剂治疗原发性肾病综合征(PNS)临床疗效。方法将60例PNS患者随机分成两组各30例。对照组予以足量、规范免疫抑制剂;治疗组临床在对照组治疗基础上分阶段中药辨证施治。疗程24周。结果治疗组临床总有效率为93.33%,对照组为73.33%,两组比较有显著性差异(P0.05);治疗组症状积分改善及减少痤疮发生、降低神经系统兴奋性明显优于对照组(P0.05)。结论分阶段辨证治疗原发性肾病综合征可提高临床有效率,减少激素副作用。     

参芎注射液对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化中凋亡因子的影响

目的:探讨参芎注射液对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化影响及其作用机制.方法:4.25%高糖腹膜透析液和脂多糖(LPS)腹腔注射建立大鼠腹膜纤维化模型.32只SD雄性大鼠随机分为4组:正常对照组(N):大鼠不做任何处理;模型组(M):每日1次腹腔注射15 ml腹透液;参芎低剂量组(D):每日1次腹腔注射15 ml腹透液+参...     

管竞环教授治疗慢性肾衰竭的临证思辨经验

管竞环教授曾是全国中医肾病专业委员会副主任委员,著名肾病专家,全国第二、三、四批名老中医药专家学术经验继承工作指导老师,国务院政府津贴获得者。从事肾脏病的临床、科研工作40余年,经验丰富,     

中国儿童隐匿阴茎诊断与治疗的系统评价

目的 系统评价术前体格检查对中国儿童隐匿阴茎的诊断效能及其临床意义.方法 通过检索获得国内公开发表的研究术前体格检查(POPE)诊断及手术治疗儿童隐匿阴茎的文献,筛选文献,采用QUADAS工具进行质量评价,通过提取纳入文献中有关数据,采用SPSS 13.0、Metadisc 1.4软件进行曲线拟合、异质性检验、Meta分析并进行综合受试者工作特征分析及临床治疗探讨.结果 35篇文献符合纳入标准,得出3条拟合曲线.15篇文献符合Meta分析研究纳入标准,拟合研究对象61190人(阳性报道465人).异质性检验显示存在阈值效应,同时存在其他异质性.Meta分析的结果显示,POPE诊断隐匿阴茎的总敏感度为0.967(95%CI 0.943～0.983),总特异度为0.998(95%CI 0.997～0.998),总诊断优势比13570.4(95%CI:7245.4～25417.0),调整SROC曲线下面积0.9392,Q*指数为0.9527.模拟就诊前保守减肥治疗后POPE诊断隐匿阴茎的总敏感度为0.984(95%CI 0.948～0.997),总特异度为1(95%CI 1～1),总诊断优势比163715.5(95%CI:16400.04～1634329.96),调整SROC曲线下面积0.9970,Q*指数为0.9797,与真实AUC、Q*相比,差异具有统计学意义(PAUC<0.002,PQ*<0.05).结论 ①POPE对诊断儿童隐匿阴茎具有较高的准确度,但存在较高的误诊率;②肥胖是造成高误诊率的主要原因,术前减肥能显著提高POPE诊断法的诊断效能,降低假阳性率;③POPE诊断阳性的患儿最佳手术时间为13岁左右;④应慎行包皮环切术.     

维持性血液透析患者钙磷乘积与营养状态的关系

目的回顾性分析维持性血液透析患者钙磷乘积与营养状态的关系。方法对武汉市第一医院维持性血液透析110例终末期。肾脏病患者的临床资料进行回顾性分析,统计其透析前血清钙磷和一般营养状态等指标。钙磷乘积≤55（mg／d1）^2为A组,〉55（mg／d1）^2为B组,比较两组的差异。结果与A组相比,B组血磷（P）明显较高（P〈0．01）;血浆白蛋白（Alb）、透析前尿素氮（BUN）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）的含量均较高（P〈0．05）;血钙（Ca）、血红蛋白（Hb）、甲状旁腺激素（iPTH）无统计学意义（P〉0．05）。结论血液透析患者钙磷乘积的升高,可能与营养状态的改善,血磷摄入增加有关。     

参芎注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤肾脏病理的保护作用

目的观察参芎注射液对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法选取SD雄性大鼠24只,随机分为假手术组、模型组和给药组各8只。分别制备肾缺血再灌注损伤模型。给药组大鼠于术前连续3d腹腔注射参芎注射液(给药剂量33.3mL/kg体重)。模型组与假手术组均腹腔注射等量生理盐水。24h后处死大鼠,测定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)并观察肾脏组织的病理学改变。结果模型组大鼠血清Cr与BUN均明显高于假手术组(均P0.01);给药组大鼠血清Cr与BUN均较模型组明显降低(均P0.01)。假手术组大鼠肾小管上皮细胞未见明显缺血性改变,模型组大鼠肾小管上皮细胞缺血性改变明显,给药组大鼠肾小管上皮细胞缺血性改变较模型组明显减轻。结论参芎注射液对急性肾缺血再灌注损伤大鼠肾脏有明显的保护作用。     

重组人红细胞生成素对肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)通路对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺血再灌注(IR)损伤过程中细胞凋亡的调控以及重组人红细胞生成素(rHuEPO)对其保护作用.方法 正常培养的HK-2细胞,分为7组:正常对照组、IR组、LY294002干预组(P13K-Akt阻断剂,10 μmol/L)、LiCl干预组(GSK-3β阻断剂,20 μmol/L)、rHuEPO干预组(20 U/L)、rHuE-PO+LY294002干预组、rHuEPO+LiCl干预组.Western印迹法检测Akt(Ser473)、GSK-3β(Set9)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性;MTT法检测细胞活力;Annexin V和PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡.结果 IR损伤诱导HK-2细胞凋亡率上调(15.20%±1.43%)、Akt活性水平下降、GSK-3β及caspase-3酶活性水平上调,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);与IR组相比,LY294002干预使细胞凋亡率进一一步上调(18.20%±2.06%)、Akt活性水平下调、GSK-3β及caspase-3酶活性上调,LiCl干预使细胞凋亡率下调(12.30%±0.85%)、Akt活性水平上调、GSK-3β及caspase-3酶活性下调,差异均有统计学意义(P＜0.05).rHuEPO干预组与IR组相比,细胞凋亡率下降(11.10%±1.62%)、Akt活性水平升高,GSK-3β及caspase-3酶活性下调,差异有统计学意义(P＜0.05).与rHuEPO干预组相比,rHuEPO+LY294002干预组细胞凋亡率升高(13.40%±1.94%)、Akt活性水平下降,GSK-3β及caspase-3酶活性上调,rHuEPO+LiCl双干预细胞凋亡率下调(7.50%±1.31%)、Akt活性水平上升,GSK-3β及caspase-3酶活性下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 IR损伤可引起肾小管上皮细胞凋亡,Akt活性降低,GSK-3B活性升高影响caspase-3依赖的外源性凋亡途径可能是其凋亡机制之一.rHuEPO可通过增强Akt活性,降低GSK-3β及caspase-3酶活性,减轻细胞凋亡,对HK-2IR损伤有一定的保护作用.