脂质体介导血管内皮生长因子对不同时间断蒂大鼠随意型皮瓣的影响

目的 通过血管内皮生长因子基因对大鼠随意型皮瓣的转染,探讨基因治疗对不同时间断蒂的大鼠随意型皮瓣成活的影响.方法 以SD大鼠为实验模型制作背部随意型皮瓣,实验组注入脂质体包裹的PcDNAVEGF165(目的 基因组),对照组分别注入PcDNA(空白质粒组)和生理盐水(生理盐水组),于用药后1、3、5、7 d,每组每时相点分别随机选取10只断蒂,断蒂后7 d处死大鼠,观察下述指标:①皮瓣成活率.②皮瓣组织标本行常规HE染色检测平均微血管数目及内径.③行VEGF免疫组织化学染色检测VEGF表达情况.④取皮瓣组织标本在电镜下观察超微结构.结果 ①皮瓣成活率:1、3、5、7 d断蒂实验组皮瓣成活率分别为(45.45±12.24)%、(82.95±3.81)%、(85.00±3.38)%、(85.96±3.25)%.1 d断蒂实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),3、5、7 d断蒂各实验组明显高于相应对照组(P<0.05),3、5、7 d断蒂各实验组则随着断蒂时间的延迟差异无统计学意义(P>0.05).②平均微血管数目及内径:各实验组与相应对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).③各实验组VEGF染色深度明显高于对照组(P<0.05).④超微结构:实验组内有新生血管形成,内皮细胞内可见较多粗面内质网,线粒体等结构,组织内成纤维细胞增多,细胞合成代谢旺盛.结论 皮下注射脂质体介导VEGF基因可提高皮瓣成活率,促进早期断蒂,是一种简单,高效,经济,相对安全的基因治疗方法.     

自体微粒皮加近亲微粒皮混合移植治疗大面积烧伤14例

2008年3月-2009年10月,笔者单位用自体微粒皮+近亲微粒皮移植救治大面积深度烧伤患者14例,取得满意效果,为微粒皮移植提供了新的选择方式.     

皮肤软组织扩张术的并发症及其预防

为探讨皮肤软组织扩张术的并发症及其预防措施,分析了34例皮肤软组织扩张术中出现的并发症原因,结果皮肤软组织扩张术并发症的发生与术者对局部解剖的熟悉程度、手术操作技巧、切口的选择、术区消毒、扩张器的放置及手术部位均有密切关系。熟悉局部解剖关系,熟练手术操作技巧,根据不同的手术部位选择不同的手术切口,严格消毒,正确放置扩张器是预防皮肤软组织扩张术并发症的关键。     

1997例小儿烧伤临床分析

为总结小儿烧伤的防治经验,对我院1987年1月1日～2002年12月31日16年间收治的(不包括门诊及急诊治疗的未住院的小儿患者人数)1997例12岁以下小儿烧伤的病历资料进行了回顾性分析。结果,1～5岁年龄段为小儿烧伤高峰期;烫伤是主要致伤原因达88．5％;主要死亡原因是侵袭性感染和烧伤后低血容量性休克。我院小儿烧伤住院患儿呈逐年增多趋势,以农村小儿居多。因此普及烧伤知识,提高防范意识,高度重视1～5岁儿童的护理,给予及时、正确的治疗。     

miR-148a-5p参与了高蛋氨酸饮食诱导ApoE-/-小鼠的肝细胞凋亡

文题释义：凋亡：是一种程序性细胞死亡,其特征是进行性的核和细胞质收缩、染色质浓缩和凋亡小体脱落。凋亡由称为半胱天冬酶的特定类型的半胱氨酸蛋白酶执行,一旦激活,就可以裂解细胞底物并导致细胞死亡。最常见的凋亡指标为抑制凋亡基因Bcl-2和促进凋亡基因Bax,Bcl-2增高,细胞凋亡减少;Bax增高,细胞凋亡增加。微小RNA(miRNA)：是一组内源性非编码小RNA,在动物、植物、病毒和其他生物中普遍存在,可调节将近60%的基因表达,这些基因负责细胞的增殖、分化、凋亡和其他生理过程。miRNA可以在多种疾病中异常表达,并对这些疾病的诊断和预后评估起重要作用。背景：高蛋氨酸饮食可以导致ApoE^-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义。 目的：探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用。方法：12只ApoE^-/-小鼠随机分为2组,每组6只,ApoE^-/-对照组为普通饮食,ApoE^-/-高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食。苏木精-伊红染色观察2组肝组织形态学变化;TUNEL染色观察肝细胞的凋亡情况;Western blot测定Bax、Bcl-2的表达改变;荧光定量PCR检测miR-148a-5p的表达;运用Target Scan靶基因预测软件预测miR-148a-5p的靶基因;双荧光素酶活性实验明确其靶向关系。结果与结论：①与对照组相比,ApoE-/-高蛋氨酸组肝脏组织肝小叶结构发生明显紊乱,部分细胞呈胞浆疏松化变性,肝细胞凋亡增加,Bax的表达明显上升且Bcl-2的表达显著下降(P < 0.01);②荧光定量PCR结果显示,ApoE-/-高蛋氨酸组miR-148a-5p的表达增加(P < 0.05);③靶基因预测软件提示,Bcl-2为miR-148a-5p的潜在靶基因;④双荧光素酶活性实验确定了miR-148a-5p与Bcl-2的靶向关系(P < 0.05);⑤肝细胞中过表达miR-148a-5p后Bax的表达显著上升且Bcl-2的表达明显下降(P < 0.01);⑥提示在高蛋氨酸饮食诱导的ApoE-/-小鼠肝细胞中,miR-148a-5p通过负调控Bcl-2促进肝细胞凋亡,这可能是造成肝损伤的机制之一。 ORCID: 0000-0003-1524-1117(马芳) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

脂质体介导血管内皮生长因子基因促进大鼠皮瓣早期断蒂的观察

1材料与方法 1.1 重组质粒的制备 pcDNA血管内皮生长因子(VEGF)165(华中科技大学同济医学院杨操博士提供)含VEGF165基因片段,位于BamH I和EcoR I 2个酶切位点之间.将其转入大肠杆菌HB101感受态细胞,挑选抗氨苄西林克隆进行小量快速提取,用BamH I和EcoR I双酶切鉴定.同时送北京华大生物公司测序.将保存的大肠杆菌菌种通过碱裂解法提取大量质粒后进一步纯化.质粒经核酸蛋白微量仪(Smart SPECTM型,美国 Bio-Rad公司)检测,定量为12.5μg/μL,以等渗盐水稀释至1μg/μL备用.     

局部应用血管内皮生长因子基因对大鼠皮瓣不同部位作用的实验研究

目的局部应用血管内皮生长因子基因转染大鼠皮瓣,初步探讨其对皮瓣成活率的影响及对皮瓣不同部分促血管作用效果。方法将30只SD大鼠作为实验模型,随机分为3组,每组10只,制作背部随意皮瓣,分别注入脂质体包裹的PcDNAVEGF165（目的基因组,实验组）,PcDNA（空白质粒组,对照组）,NS（生理盐水组,对照组）。术后4d断蒂,断蒂后7d处死大鼠观察：（1）各组皮瓣成活率比较。（2）取皮瓣远端活组织标本行常规HE染色,检测平均微血管数目及内径。（3）取皮瓣远端活组织标本行VEGF免疫组化染色观察VEGF表达情况。（4）取目的基因组皮瓣远段,中段,近段成活组织标本常规HE染色,检测平均微皮瓣血管数目。结果目的基因组皮瓣平均成活率明显高于空白质粒组和生理盐水组两对照组,平均微血管数目明显多于两对照组,且为管径较小的新生血管,均具有统计学意义（P〈0.05）。免疫组化染色强度高于两对照组。目的基因组皮瓣远端血管数目多于近端,具有统计学意义（P〈0.05）。结论局部注射VEGF基因后可以增加缺血皮瓣血管新生,提高皮瓣成活率,在皮瓣不同部位促血管增生作用不同。     

医院感染病原菌及耐药性分析

目的 了解医院感染病原菌的分布及耐药情况。方法 对临床分离的医院感染病原菌及耐药性和社区感染病原菌进行分析。结果 该年度共出院15542人次，1027人发生医院感染1077次，医院感染发病率为6．6％，例次发病率为6．9％。1027名病人中，共分离出病原菌132株，3／4的病原菌为革兰阴性菌，其中铜绿假单胞菌所占比例最高，达总数的22．7％。铜绿假单胞菌对羧苄青霉素耐药率达66．7％，对庆大霉索的耐药率更高达77．3％，而对头孢哌酮的耐药率也达到50．0％。结论 医院感染病原菌主要为革兰阴性条件致病菌，对常用的抗菌药物耐药率较高，而且呈多重耐药趋势。     

长链非编码RNA SNHG1对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响.方法 纳入2019－2021年在宁夏医科大学总医院烧伤整形外科接受手术治疗的22例增生性瘢痕患者,收集其增生性瘢痕组织与瘢痕旁正常皮肤组织(瘢痕旁3 cm以内),从中分离培养成纤维细胞.采用qRT-PCR从组...