门静脉输注诱导耐受中CD4~+T细胞和CD8~+T细胞的不同作用

目的:探讨不同T细胞在门静脉输注诱导耐受中的作用。方法:门静脉输注经丝裂霉素处理过的C57小鼠脾细胞给BALB/c,7 d后分离受鼠脾细胞,流式分选其中CD3+、CD4+、CD8+T细胞,过继输注给另一BALB/c,并同时行C57或C3H来源的心脏移植,观察并比较心脏移植物存活时间。结果:过继输注PVI鼠T细胞后,可以转移耐受;过继输注PVI鼠CD4+T细胞,可使供体来源的C57供心存活时间延长,而对第三系C3H供心存活时间无明显延长。过继输注PVI鼠CD8+T细胞无此效应。结论:在门静脉输注诱导耐受的模型中,CD4+T细胞可以转移耐受,且此耐受为抗原特异性,CD8+T细胞无此效应。     

肝癌肝移植术后复发转移的综合治疗

目的 探讨肝癌肝移植术后复发、转移的综合治疗效果,并分析影响肝癌复发、转移后生存时间的危险因素.方法 29例肝癌肝移植术后复发、转移患者,根据不同治疗方式分为综合治疗组(11例)和单纯化疗组(18例).比较两种治疗方式疗效,采用多元回归分析影响肝癌复发、转移后生存时间的因素.结果 与单纯化疗组比较,综合治疗组复发、转移后生存时间明显延长(t=5.617,P<0.01).肿瘤TNM分期,病理分型,术后复发、转移时间和复发后治疗方案影响患者的生存时间(t=2.843,3.061,22.781,5.617,P<0.01).结论 对肝癌肝移植术后复发、转移患者采取综合治疗,可延长患者生存时间,较单纯化疗优越.肿瘤TNM分期,病理分型,术后复发、转移时间和复发后治疗方案是影响复发、转移后患者生存时间的危险因素.     

CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌肝移植肿瘤复发中的作用

目的 探讨肝癌肝移植病人移植前后外周血和肿瘤组织中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪检测肝癌肝移植病人和其他肝移植病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞的比例,并采用正常人作对照.用免疫组化法检测肝癌病人和非肝癌病人肿瘤组织中FoxP3的表达及CD8+T细胞浸润的比例.观察肝癌肝移植病人术后及肿瘤复发后调节性T细胞的变化及其对肿瘤复发的影响.结果 流式细胞检测显示肝癌肝移植、非肝癌肝移植的病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例较正常人明显升高,分别为(10.15±1.00)%、(5.30±1.64)%和(3.20±1.18)%,P<0.05.肝癌肝移植肿瘤复发病人较未复发病人外周血CD4+CD25+FOXP3+T比例明显升高,分别为(15.15±1.50)%和(6.80±1.50)%,P<0.01.免疫组化检测显示肿瘤组织中FOXP3+T细胞增多,CD8+T细胞浸润明显减少.结论 肝癌肝移植肿瘤复发的病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例升高.调节性T细胞可能通过减少CD8+T细胞浸润,加速肿瘤复发.     

门静脉输注供者脾细胞诱导的供者特异性免疫低反应性

目的 探讨经门静脉输注供者脾细胞能否诱导皮肤移植小鼠产生供者特异性的免疫低反应性及其可能机制.方法 取Balb/c小鼠,随机分为空白对照组(经小鼠门静脉输注RPMI 1640培养液)、受者脾细胞组(经小鼠门静脉输注Balb/c小鼠脾细胞)、供者脾细胞组(经小鼠门静脉输注C57BL/6小鼠脾细胞)、空白移植对照组(经小鼠门静脉输注RPMI 1640培养液,7 d后移植C57BL/6小鼠的皮肤)、实验对照组(经小鼠门静脉输注Balb/c小鼠脾细胞,7 d后移植C57BL/6小鼠的皮肤)、实验组(经小鼠门静脉输注C57BL/6小鼠脾细胞,7 d后移植C57BL/6小鼠的皮肤)以及第三方移植组(经小鼠门静脉输注C57BL/6小鼠脾细胞,7 d后移植C3H小鼠的皮肤).记录空白移植对照组、实验对照组、实验组和第三方移植组移植皮肤的存活时间,并观察移植皮肤的病理学变化;脾细胞输注后7 d,分别获取空白对照组、受者脾细胞组和供者脾细胞组小鼠的外周血、脾脏和肝脏,用流式细胞仪测定样本中CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞)的比例.结果 实验组移植皮肤的存活时间为(19.8±4.6)d,明显长于空白移植对照组、实验对照组和第三方移植组,但仍未达到长期存活.皮肤移植后7 d,空白移植对照组和实验对照组的移植皮肤呈现重度急性排斥反应的病理学改变,而实验组移植皮肤呈现中度急性排斥反应的病理学改变.供者脾细胞组外周血、肝脏和脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例明显高于空白对照组和受者脾细胞组.结论 门静脉输注供者脾细胞可特异性地延长供者皮肤移植物的存活时间,减轻移植物的排斥反应,该效应可能与受者体内的CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞增加有关.     

西罗莫司和环孢素A对Th17细胞和调节性T淋巴细胞分化影响的比较

目的 比较西罗莫司(SRL)和环孢素A(CsA)对体外诱导CD4+T淋巴细胞向Th17和调节性T淋巴细胞分化的影响.方法 使用抗CD3和抗CD28单克隆抗体(简称抗CD3单抗和抗CD28单抗)刺激CD4+T淋巴细胞,并在培养体系中分别加入转化生长因子β(TGF-β);TGF-β+白细胞介素6(IL-6);TGF-β+IL-6+SRL;TGF-β+IL-6+CsA.72 h后用流式细胞术检测细胞内Foxp3和IL-17的表达水平,观察CD4+T淋巴细胞的分化情况及SRL和CsA对CD4+T淋巴细胞体外分化的影响.结果 在经抗CD3单抗和抗CD28单抗刺激后,TGF-β可诱导Foxp3+细胞(调节性T淋巴细胞,Treg)的增殖与分化,而TGF-β+ID6可诱导Th17细胞的增殖与分化.在培养体系中加人SRL和CsA,均可使Th17细胞的增殖与分化减少;SRL可促进Treg的增殖与分化,而CsA抑制Treg的增殖与分化.结论 SRL可以促进CD4+T淋巴细胞向Treg增殖与分化,而抑制Th17细胞的增殖与分化;CsA既抑制Treg的增殖与分化,又抑制Th17细胞的增殖与分化.     

染料木黄酮在减轻肾间质纤维化中的作用

目的 探讨染料木黄酮(Genistein)在减轻单侧输尿管结扎模型(UUO)诱导肾间质纤维化中的作用及可能机制.方法 将30只SD大鼠随机分为5组,A组:假手术+DMSO 1 ml/d×14 d;B组:假手术+Genistein每日20 mg/ks体重×14 d;C组:UUO+DMSO 1 ml/d×14 d;D组:UUO+Genistein 5mg/kg体重每日×14d;E组:UUO+Genistein 20mg/kg体重每日×14d.术后14d比较各组大鼠左/右肾重量和长度的比值;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清INF-y和TGFa1表达;病理观察肾小管扩张和肾间质增生的程度,免疫组织化学观察肾脏á-SMA和ED-1表达.结果 C、D、E组左/右肾重量及长度比值均明显高于A、B组,但E组左/右肾重量及长度比值、血清TGF-a1及INF-y浓度、肾小管扩张分数和肾小管容量分数、á-SMA和ED-1的表达均低于C组.结论 染料木黄酮可明显降低由单侧输尿管结扎模型所导致的肾间质纤维化的病理改变,其可能机制是染料木黄酮抑制TGF-a1及INF-y的表达,从而抑制肾小管上皮细胞向成纤维细胞转化.     

术前调节性T细胞水平与肝癌肝移植术后肿瘤复发的关系

目的:探讨术前调节性T细胞(Treg)水平与肝癌肝移植术后肿瘤复发的关系.方法:搜集2006年1月至2007年2月在我院实施的32例肝癌肝移植病人术前外周血及肿瘤组织,采用流式细胞技术检测外周血CD4 D25 调节性T细胞的比例,采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中FoxP<,3> 细胞浸润的比例,以正常人的外周血、正常肝组织及肝硬化组织作对照.对32例病人随访18个月,观察肿瘤复发时间.分析术前Treg水平与肝癌肝移植术后肿瘤复发时间的相关性,单因素回归判断术前Treg水平对肿瘤复发时间的影响.结果:肝癌病人外周血及肝脏中Treg的水平较正常人为高:术前外周血Treg水平与肝移植术后肿瘤复发时间呈负相关(r=-0.87);术前Treg水平是影响术后肿瘤复发时间的独立危险因素(P<0.01);高Treg组病人肝移植术后一年肿瘤复发率高于低Treg组者,差异有统计学意义(P<0.05).结论:术前调节性T细胞水平可作为肝癌肝移植术后肿瘤复发的预测指标之一.     

完全腹膜外腹腔镜疝修补术治疗老年腹股沟疝的效果评价

目的：探讨完全腹膜外腹腔镜疝修补术应用于老年腹股沟疝中的临床效果。方法选取收治的98例老年腹股沟疝患者作为研究对象,随机分成2组,每组49例。对照组给予传统疝修补术治疗,研究组给予完全腹膜外腹腔镜疝修补术治疗。观察并比较两组患者围术期指标及并发症的发生情况。结果研究组手术时间、手术出血量、住院时间、正常活动时间均显著优于对照组（ P＜0.01）;研究组患者并发症发生率为8.16％,显著低于对照组（ P＜0.05）。结论完全腹膜外腹腔镜疝修补术应用于老年腹股沟疝中具有创伤小、恢复快且并发症少等优点,值得临床推广应用。