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1.
目的探讨靶向表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的RNA干涉(RNAi)技术抑制恶性胶质瘤体外细胞系U251的EGFR表达后,在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法在人EGFR开放阅读框的细胞内区酪氨酸激酶结构域选择1个siRNA靶序列、进行短发夹RNA(shRNA)表达载体psiRNA-2400的构建,并以含有随机序列的psiRNA-scr表达质粒为对照进行了脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系表达。应用RT-PCR检测EGFR表达水平,应用MTT法、流式细胞术和Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转染前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导shRNA基因治疗对U251细胞生长抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组化的方法进行EGFR、PCNA和GFAP表达比较。结果脂质体介导、靶向EGFR的shRNA可显著抑制U251细胞ECFR表达,MTT法分析显示psiRNA-2400转染组细胞生长抑制率为68%;与对照组和psiRNA-scr转染组比较,细胞周期分析结果表明psiRNA-2400转染组G_0~G_1期细胞数没有明显变化,进入S期的细胞数较对照组减少了12.7%~13%,而进入G_2期细胞则增加了10.5%~11.7%。Matrigel基质生长实验显示对照组和psiRNA-scr转染组细胞呈正常形态贴壁生长,而psiRNA-2400转染组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示psiRNA-2400显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组EGFR表达下降、PCNA标记指数降低而GFAP表达上调。结论靶向EGFR的RNAi技术可以显著抑制U251细胞的EGFR表达,在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。因此,shRNA表达质粒介导的基因治疗可以成为胶质瘤靶向性EGFR治疗的新策略。 相似文献
2.
3.
目的 总结冠状动脉旁路移植术治疗冠心病的体会。 方法 回顾性分析 3 0 6例冠状动脉旁路移植术。男 2 49例 ,女 5 7例。应用体外循环 2 3 4例 ,非体外循环 72例。搭桥数 1~ 6支 人 ,平均 (3 .45± 1.2 5 )支 人。对手术方法、主要并发症和术后处理进行分析总结。结果 二次开胸 5例 (1.6% ) ,低心排综合征 10例 (3 .3 % ) ,应用IABP4例 (1.3 % ) ,肝功能不全 6例 (2 .0 % )。肾功能不全 7例 (2 .3 % ) ,反复发作房颤 2 3例 (7.5 % ) ,肺功能不全 6例(2 .0 % ) ,脑合并症 3例 (1.0 % ) ,胸腔积液 41例 (13 .4% )。死亡 7例 (2 .3 % ) ,其余病人康复出院。结论 合理的选择病人 ,成熟的手术技术 ,良好的心肌保护及术后处理的加强是提高冠状动脉旁路移植术疗效的重要措施。 相似文献
4.
目的 评价第三代CT定量诊断胆囊结石的准确率及敏感性.方法 120例胆囊结石的病人在使用第三代CT检查后7天内施行胆囊切除手术,术后剖开胆囊,进行结石计数和最大结石的最大径线测量.结果 120例胆囊结石患者,其中87例有确切结石计数和测量结果(72.5%);33例CT检查未发现胆囊结石(27.5%).CT图像中显示的胆囊结石的数目:均数±标准差=3±15个;范围为2~82个与手术发现的数目:均数±标准差=68±316个;范围为2~1326个,两者比较具有显著性差异(P<0.001).CT图像发现的胆囊内最大结石的最大径线值:均数±标准差=1.08±1.06cm,范围为0~2.4cm;与手术测量值均数±标准=1.68±0.14cm范围为0.67~3.1cm,两者比较有显著性差异(P<0.001).结论 用第三代CT进行胆囊结石的定量诊断不够准确,敏感性也有不足. 相似文献
5.
目的探讨锥颅减压术在抢救急性颅内血肿所致脑疝的临床应用价值.方法对23例急性颅内血肿致脑疝者,开颅前行锥颅术清除血肿以争取抢救时间.结果 18例脑疝症状改善.结论锥颅减压术使脑疝持续时间缩短,为尽快开颅清除颅内血肿争取得宝贵时间,减少急性颅内血肿并发脑疝的死亡率及致残率. 相似文献
6.
7.
目的 探讨全肝容积灌注CT成像(VPCT)评估兔肝血流灌注及体积对肿瘤坏死率的影响。方法 采用兔肝VX2移植瘤作为实验组,并设立对照组。实验组及假手术对照组在术后14 d通过全肝VPCT并获得相应的灌注参数,测量并计算实验组肿瘤体积(TV)、肿瘤坏死率(TNR)。检查完后对所有实验组肿瘤标本进行病理学观察。结果 实验组癌组织与对照组肝组织灌注血流量(BF)、灌注血容量(BV)、动脉灌注量(ALP)、门静脉灌注量(PVP)、动脉灌注指数(HPI)比较,差异均有统计学意义(P <0.05),实验组癌旁组织与对照组肝组织BF、BV、ALP、PVP、HPI比较,差异均无统计学意义(P >0.05)。Pearson相关性分析显示,TNR与ALP、HPI呈负相关(r =-0.410和-0.356,均P <0.05),TNR与BF、BV、PVP无相关性(r =-0.016、-0.155和0.256,均P >0.05);TV与BF、BV、PVP、ALP、HPI无相关性(r =0.062、0.292、0.140、0.142和0.014,均P >0.05);肝VX2移植瘤TNR与TV无相关性(r =-0.098,P >0.05)。HE染色发现肿瘤边缘区为富含血管的环形癌组织,中央为坏死区。结论 兔肝VX2移植瘤TNR与全肝VPCT反映的肿瘤动脉灌注高低有关,与TV无明显关联。 相似文献
8.
目的:研究eIF3S10在肺癌中的表达及其与化疗反应的关系,探讨其在肺癌预后中的作用。方法:收集在湖南省肿瘤医院治疗的31例支气管纤维镜检肺癌组织和20例肺良性病变组织及10例肺癌边缘正常组织的石蜡组织切片。采用免疫组织化学技术检测eIF3S10蛋白在肺癌组织、肺良性病变组织和正常肺组织中的表达,并分析eIF3S10表达水平与患者化疗敏感性的关系。结果:肺正常组织和肺良性病变组织中eIF3S10阳性率分别为30%和15%,而肺癌组织中eIF3S10的阳性率达61%。eIF3S10表达水平与化疗敏感性存在一定相关性。结论:肺癌组织中有eIF3S10过表达,而肿瘤组织eIF3S10表达过高可能提示患者对化疗反应敏感。 相似文献
9.
用噬菌体表面展示技术筛选与肝癌细胞系结合的抗体模拟肽 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:从噬菌体展示肽库中,筛选可与肝癌细胞特异性结合的抗体模拟肽。方法:通过生物淘选使噬菌体富集。利用ELISA法,鉴定噬菌体单克隆原种的亲和性,并进行统计学分析。通过竞争ELISA,分析筛选所得抗体模拟肽的结合位点,并进一步分析抗体模拟肽的序列组成。结果:随着淘选次数的增加,出现噬菌体的富集。ELISA的结果显示,相对于正常肝细胞,筛选所得环状7肽对肝癌细胞系SMMC7721和BEL7402均有良好的结合活性(P<0.05),且与SMMC7721细胞的结合活性明显优于与BEL7402细胞的亲和性(P<0.05)。在α=0.01的水平上,7肽单克隆噬菌体原种可明显与scFv竞争结合SMMC7721细胞(0.005
相似文献
10.
生长抑制因子1基因核定位序列-绿荧光蛋白融合表达载体的构建及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建p33^ING1b核定位序列(nuclear locating sequence,NLS)-绿荧光蛋白融合表达载体,将其转染到人胚肺纤维母细胞系MRC-5,建立稳定表达该融合蛋白的细胞模型。方法应用逆转录PCR获得p33^ING1b的NLS序列,然后将NLS序列插入绿荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C1的多克隆位点,构建pEGFP-C1-NLS-绿荧光蛋白融合表达载体,再用此载体转染MRC-5细胞系,观察活细胞绿荧光蛋白的亚细胞定位。结果成功构建了pEGFP-C1-NLS-绿荧光蛋白融合表达载体,由该载体表达的绿荧光蛋白-NLS肽段融合蛋白产生的绿色荧光信号全部定位于胞核部位,而空载体转染的细胞表达的绿色荧光蛋白,绿色荧光信号定位于细胞浆中。结论在活细胞内,生理情况下p33^ING1b完全定位于细胞核,并且在其亚细胞定位的转运过程中,NLS肽段起着决定性作用。 相似文献