HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗宫颈癌的研究

目的探讨HSV-TK/GCV自杀基因系统对人宫颈癌细胞系Hela体外及体内杀伤作用及其产生的旁观者效应.方法采用脂质体转染法将GINaTK载体转入包装细胞PA317.取病毒上清液感染人宫颈癌细胞Hela,得到带有HSV-TK基因的Hela/TK细胞,并将其分别用于体外和体内实验.结果载体HSV-TK导入了PA317细胞.体外实验结果显示,当Hela/TK细胞数占混合细胞10%时,低浓度(10μg/ml)的GCV就可将50%左右的肿瘤细胞杀死.体内实验结果显示GCV可明显抑制Hela/TK细胞在BALB/C小鼠体内的肿瘤形成.经GCV治疗后,肿瘤体积分别较对照组肿瘤体积缩小约11.1%、30.6%和47.2%(均P＜0.001);RT-PCR检测HSV-TK基因在肿瘤组织中有表达;实验组肿瘤组织与对照组相比存在明显的病理学改变.结论逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入人宫颈癌细胞Hela并获稳定表达,HSV-TK/GCV自杀基因系统在体内外对宫颈癌细胞均有杀伤作用,且存在明显的旁观者效应.     

线粒体DNA与人宫颈细胞癌变的关系

目的探讨线粒体DNA与人宫颈细胞癌变的关系.方法采用PCR方法制备地高辛标记的3条人mtDNA探针,对一株人宫颈癌Hela细胞系、1例原代培养人皮肤成纤维细胞和24例子宫颈癌患者的活检癌组织及癌旁宫颈组织的染色体或间期细胞核进行了荧光原位杂交分析.结果 3条mtDNA探针在原代培养人皮肤成纤维细胞染色体或间期核中均未出现阳性杂交信号;而在人宫颈癌Hela细胞和24例肿瘤组织标本的部分染色体或间期细胞核中均出现了阳性杂交信号.而在癌旁组织的部分染色体或间期细胞核中虽也出现了阳性杂交信号.但与肿瘤组织标本相比有显著性差异.结论表明癌细胞核基因组中存在mtDNA的同源序列,这些同源片段的出现可能与细胞癌变有关.     

宫颈癌线粒体DNA D-Loop区基因突变的研究

目的研究原发性宫颈癌组织中线粒体DNA(mtDNA)基因突变情况及其在肿瘤发生、发展中的作用.方法选择24例原发性宫颈癌组织及其邻近的癌旁组织,用PCR的方法将线粒体DNA D-Loop区同时扩增并测序.结果24例子宫颈癌患者的D-Loop区中,共有9例存在30个突变位点,总突变率为37.5%(9/24).其中有8个属于微卫星不稳定,新发现13个多态性位点.结论线粒体D-Loop区是一个具有高度多态性和突变性的区域,在宫颈癌中突变率较高.     

宫颈黏膜细胞线粒体DNA核内整合及其与c-myc基因表达的关系

目的：探讨宫颈黏膜细胞核内线粒体DNA（mtDNA）整合与c—myc基因表达的关系。方法：采用免疫组（IHC）检测c—myc基因表达：采用原位杂交方法对宫颈黏膜细胞核内mtDNA序列进行检测：结果：宫颈癌黏膜细胞核内mtDNA序列的检出率为27．5％，不典型增生为13．3％、正常宫颈黏膜细胞未发现有,mtDNA序列整合 宫颈黏膜细胞c-myc基因表达率在mtDNA序列检出组为67％，显著高于mtDNA序列列未检出组（36％）。结论：宫颈黏膜细胞mtDNA序列核内整合可能参与了宫颈癌的发生：c-myc基因表达可能与宫颈黏膜mtDNA序列整合有关。     

实事求是,建章立制,促进检验科科教研发展

很多人都认为,检验科数据资料详实丰富,搞科研、写论文应该不是太大的问题,但事实恰恰相反.本文以无锡市妇幼保健院检验科为例,加以说明.2005年检验科共有正式职工23名,其中具有检验专业本科学历人员11名,论文发表数寥寥无几.与此相反,该院中心实验室有正式职工8名,本科学历以上人员只有4名,而每年撰写论文却近十篇.     

无锡地区外周血胎儿染色体非整倍体高通量测序的临床应用

目的评估无锡地区外周血胎儿染色体非整倍高通量测序(NIPT)技术在胎儿染色体非整倍体疾病筛查中的应用价值及筛查效率。方法收集2015年4月至2017年9月于南京医科大学附属无锡妇幼保健院就诊、行NIPT并完成妊娠结局随访的单胎妊娠孕妇10 269例。对NIPT结果为高风险的孕妇,建议进行羊膜腔穿刺行产前诊断,低风险者随访妊娠结局。评价无锡地区NIPT在筛查胎儿常见染色体疾病的敏感性、特异性、阴阳性预测值等指标。结果 10 269例单胎妊娠孕妇中,高风险131例(1.27%,131/10 269),NIPT对筛查T21、T18、T13的敏感性分别为97.29%、100%、100%,特异性分别为99.98%、99.92%、99.97%,筛查T21、T18、T13阳性预测值分别为94.74%、39.46%、57.14%,阴性预测值分别为99.99%、100%、100%。结论NIPT对T21的产前筛查效率近似诊断水平,对染色体数目异常嵌合体也有一定的筛查价值,对性染色体、常染色体拷贝数异常的筛查效率有待进一步提高。     

加强人才梯队建设 推进实验室可持续发展

介绍了无锡妇幼保健院实验室根据人才梯队建设的要求,从人才培养对象的选择、培养和任用3个方面进行了有益的尝试以及取得的明显成效.     

线粒体DNA A1555G位点突变与氨基糖甙类抗生素致聋遗传易感性的研究

应用PCR-限制性内切酶酶切片段长度多态性技术,对83例过去应用过氨基糖甙类抗生素药物而目前有听力下降的患者的外周血线粒体DNA的A1555G位点突变情况进行了研究.结果发现6例患者线粒体DNA的12S rRNA基因A1555G位点发生了点突变的阳性率7.2%.而其余77例患者及50例正常人无一例在此位点有突变.研究显示mtDNA A1555G点突变是药物性耳聋遗传易感性最常见的基因突变类型.     

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素研究进展

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)是一种热休克蛋白90(HSP90)抑制剂,能够靶向性抑制肿瘤源性的HSP90,使其效应蛋白即多条细胞信号转导通路的关键调节蛋白降解,从而使细胞生长、分化受抑制,引起细胞凋亡,抑制肿瘤生长。大量试验证明,17-AAG是一种独特的靶向性治疗肿瘤的药物,能有效抑制多条维持肿瘤增殖和生存的细胞信号转导途径。临床Ⅰ-Ⅱ期试验显示该药具有良好的药理作用特征。此外,它还能和放疗、传统化疗药物联合应用协同发挥抗肿瘤作用。