人心肌肌钙蛋白T的提取、纯化及鉴定研究

目的 :探究一种简便易行的人心肌肌钙蛋白T(cTnT)的提纯方法并进行鉴定。　方法 :采用匀浆、离心、70℃加热、冰浴、饱和硫酸铵盐析、透析、DEAE 纤维素层析等方法提纯cTnT ,并进行鉴定和免疫活性检测。　结果 :1 0 0g心肌组织中获得cTnT 2 1 .35 6mg ,纯度最高达 91 .7%。　结论 :建立的方法能成功提取纯度较高 ,且具有免疫活性的人心肌cTnT ,为建立适用于临床的cTnT检测方法奠定基础     

液体闪烁测量方法及其应用研究

液体闪烁测量是一种先进的、实用性很强的核辐射探测技术。应用范围很广。因力它对软β射线的计数效率很高,是测量~3H、~(14)C、~(35)S和~(45)Ca等低能β发射核素最主要的、甚至是不可替代的方法。广泛地用于χ射线、硬β射线、内转换电子、甚至γ射线的测量。切伦科夫测量则又是~(32)P、~(24)Na和~(86)Rb等高能β发射核     

肿瘤抑素活性肽段及其衍生物研究新进展

肿瘤抑素(tumstatin)是继内皮抑素(endostatin)和血管生成抑素(angiostatin)发现以来,来源于人血管基膜Ⅳ型胶原蛋白的极具潜力的肿瘤抑制因子。它强大的抗肿瘤新生血管生成、诱导肿瘤细胞和内皮细胞凋亡等生物活性,使其成为近年来的研究热点。本文详细介绍了肿瘤抑素活性肽段及其衍生物的研究进展。对Tum-5、T7肽和19肽以及这些活性肽段连接NGR导向肽或人源性IgG3铰链区等肽段后形成的衍生物作了较详细的介绍。肿瘤抑素的活性肽段及其衍生物,以高选择性、高活性、低毒性等优点正成为抗肿瘤药物研究的新希望。     

时间分辨荧光免疫分析用标记试剂——N1-(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺四乙酸钐钠的研制△

时间分辨荧光免疫分析是一种利用镧系元素(多用铕、钐和铽离子)作标记物的免疫分析.镧系元素螯合物在激发光作用下,产生发射光,其激发光与发射光之间有很宽的Stokes位移,发射光谱峰很窄,具有不同的最大发射波长,如铽(Tb3+)、铕(Eu3+)和钐(Sm3+)分别为544、613和643　nm;其荧光寿命长,最长可达1　ms,比血浆等的本底荧光寿命长几个数量级.将Eu3+、Sm2-和Tb3+分别螯合到多功能螯合剂,如N1(对-异硫氰基苄基)-二乙三胺-N1,N2,N3,N3-四乙酸(简称异硫氰基苄基DTTA)上,可得到螯合有不同镧系离子的螯合剂.     

铕标记人血清白蛋白的研究

铕标记人血清白蛋白的研究赵启仁，林汉，张福华，刘洁在时间分辨荧光免疫分析（ＴｒＦＩＡ）技术中，制备比活性高、免疫活性强的Ｅｕ标记物是关键之一．这需要用具有双功能基团的螯合剂将Ｅｕ３＋和抗原连接起来．已有的螯合剂有：１-（对-重氮苯基）-ＥＤＴＡ、氨基苯?..     

时间分辨荧光免疫分析试剂的研制(简报)

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroimmunoassay,简称TrFIA),是新近发展起来的一种非同位素免疫分析技术。由于其灵敏度高,线性范围宽、准确、快速、操作简便,且具有试剂稳定、保存期长、无同位素污染等优点,因而是当代最有发展前途的免疫分析技术.     

肿瘤抑素T7肽及其衍生物T7-NGR载体构建及表达

目的为了提高作用靶向性，将导向肽NGR与肿瘤抑素L肽的C端连接，获得L肽及其衍生物T广NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素L肽及T7-NGR的克隆载体pMD-T7和pMD-T7N，经酶切和测序鉴定后，将2种载体分别双酶切，经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后，切下目的片段与酶切回收的质粒载体pET28a在低熔点琼脂糖中直接进行连接反应。阳性克隆经酶切和测序鉴定，转化感受态EcoliBL21（DE3），IPTG诱导表达。结果酶切和测序鉴定结果正确，分别成功构建表达载体pET-T7和pET-T，N，经IPTG诱导，完成了表达条件的优化。Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示．当IPTG浓度为1mmol/L时．25℃诱导8h．分别获得了T7肽和T7-NGR的表达产物。结论已经成功构建T，肽和T7-NGR的表达载体．获得了表达产物,为下一步的小肽活性实验奠定了基础。     

生物样品微量元素的NAA和PIXE分析法及其在生物医学中的应用

中子活化分析(NAA)利用核反应显示化学元素含量,具有非核方法所没有的优点。质子激发X射线分析(PIXE)、电离横截面比核反应截面大几个数量级。NAA和PIXE分析法具有高灵敏度、多元素同时分析、用样量小、快速和易于自动化等特点,是当前分析微量元素最新核技术。我们和协作单位一起,首先将这两种方法应用于生物医学研究。在生物材料的NAA和PIXE分析中诸如样品灰化、制靶、辐照、化学分离、数据获取、谱解析、质量控制等方面进行了很多开创性工作,并建立了灵敏度、精确性等达到世界先进水平的可靠方法学。其中NAA的放     

酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析中关键试剂的研究

目的研制成镧系元素发光时间分辨荧光分析中的关键试剂。方法用过碘酸钠法研制成辣根过氧化物酶标记链霉亲和素，用戊二醛二步法研制成碱性磷酸酶标记链霉亲和素和用化学合成法研制成5-氟水杨酸磷酸酯等关键试剂。结果HRP标记SA总蛋白回收率为29．8％，纯度为97％。ALP标记SA的总蛋白回收率为56％，纯度为98％，分子量为159kD，其中ALP分子量为94kD，生物活性良好。5-氟水杨酸磷酸酯，测得熔点为157℃～159℃、纯度为99．43％-100％、红外吸收光谱、紫外吸收光谱及核磁共振谱等特性鉴定与文献记载一致。结论研制成的各种关键试剂质量良好，已成功地应用于科研中。     

时间分辨荧光免疫分析技术研究

时间分辨荧光免疫分析(Time-resolved fluoroimmunoassay，TRFIA)是一种全新的国际上公认的最有发展前途的非同位素免疫分析技术。镧系元素(Eu、Tb、Sm、Dy等)螯合物有突出的固有特点：激发最大波长到发射最大波长之间的Stokes位移很大，前者对后者无干扰。激发光谱段较宽，可增加激发能；发射光谱带窄，50％发射谱带宽度不足