小鼠肝癌 H-22 细胞膜相关抗原肽提取物的抑瘤作用及其免疫机制的研究

目的应用小鼠肝癌 H-22 细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物免疫小鼠,观察其对小鼠自身移植肿瘤生长及免疫学参数的影响,为制备肿瘤疫苗提供实验依据.方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×103的细胞膜 TAP 提取物,皮下免疫小鼠,检测胸腺细胞周期时相和T细胞亚组百分数的变化;并检测脾细胞 Con A 反应性、IL-2 和 IFN-γ分泌活性、CTL 杀伤活性的变化,以及脾脏 T 细胞 CD3、CD69 和 TCR 的表达和抑瘤效应.结果TAP 提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,平均出现时间延迟,生长速度减慢;同时,脾细胞 CD69表达增加,Con A 反应性、IFN-γ和 IL-2 分泌活性和 CTL 杀伤活性不同程度增强;胸腺细胞 CD3 表达显著增高、CD+4 和 CD+8 T 细胞百分数也不同程度增高.结论小鼠肝癌 H-22 细胞膜 TAP 提取物具有免疫原性,能有效激发免疫系统功能,抑制自身移植肿瘤的生长.     

黑色素瘤B16细胞热休克蛋白 抗原肽复合物的体内外抑瘤效应 *

黑色素瘤B16细胞胞浆HSP-抗原肽复合物（HAC）的制备、免疫原性的诱导及其抑瘤作用的研究。方法:采用Tris-HCl提取和Sephacryl S-200凝胶过滤制备B16细胞HAC,通过C57BL/6J小鼠体内诱导特异性CTL,再经体内、体外实验检测其抑瘤作用。结果:凝胶过滤获得的含60～97 kD蛋白的41,47和53管的HAC可以降低肿瘤发生率、延长肿瘤出现时间及降低小鼠死亡率。结论: B16 细胞胞浆中的60～97 kD的HAC具有免疫原性及抑瘤作用,为制备肿瘤疫苗提供了实验依据。     

大鼠脊髓照射后细胞凋亡及其与细胞增殖的关系

目的:评价大鼠脊髓照射后少突神经胶质细胞凋亡与细胞增殖的关系。方法:选择9～10周龄Fisher雌性大鼠,用氟烷吸入法麻醉,对2cm脊髓胸2～腰2(C2～T2)段行X射线照射。用2、8和22Gy单次剂量或2、8和22Gy初次剂量照射后1～63天间再次给予8Gy照射。大鼠在单次剂量22Gy照射前30分钟和照射后2小时给予腹腔注射环己酰亚胺(2mg/kg),以延迟细胞凋亡的出现。在不同剂量照射后0、4、8、12或24小时杀鼠,心脏用10%福尔马林灌注10分钟,取C2～T2段中部,石蜡包埋,染色,计算细胞凋亡指数和总凋亡产量(TAY,为照射后24小时内总凋亡细胞的百分数)。细胞增殖…     

体外照射引起发育大鼠脑中生长因子水平的改变

目的 :研究胚胎大鼠脑发育期生长因子 [脑中胰岛素样生长因子 - (IGF- )和 - (IGF- )、脑衍生神经营养因子(BDNF)和神经营养蛋白 (NT- 3)的基因表达 ]在辐射诱导代偿性反应中的作用。方法 :1动物 :受孕 Wistar大鼠于妊娠 15或 17d,给予10、2 0或 40 c Gy单次 X射线全身照射 ,管电压 2 5 0 k V,剂量率 6 7m Gy/s,照射后 4或 2 4h杀鼠 ,取脑组织迅速深低温冻存和石蜡包埋。 2检测 :检测 IGF- 、BDNF和 NT- 3蛋白应用免疫细胞化学法 ,检测 IGF- 和 IGF- 的 m RNA分别采用原位杂交和 Northern印迹杂交方法。结果 :1原位杂…     

肝癌H-22细胞膜抗原肽提取物对小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用

目的应用小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物免疫小鼠,观察其对小鼠自身移植肿瘤生长及免疫学参数的影响,为制备肿瘤疫苗提供实验依据.方法采用微酸洗脱法制备分子量≤3000 Da的细胞膜TAP提取物,皮下免疫小鼠,检测胸腺细胞增殖反应、T细胞亚组百分数的变化,脾细胞Con A反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应.结果 TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低(P＜0.01),平均出现时间延迟(P＜0.001),生长速度减慢;同时,脾细胞Con A反应性(P＜0.01)、IFN-γ(P＜0.05)和IL-2分泌活性和CTL杀伤活性(P＜0.05)不同程度增强;胸腺细胞3H-TdR自发掺入率(P＜0.05)及CD4 和CD8 T细胞百分数(P＜0.05)也有不同程度增高.结论小鼠肝癌H-22细胞膜TAP提取物具有免疫原性,能有效激发免疫系统功能,抑制自身移植肿瘤的生长.     

012 多(ADP-核糖)聚合酶DNA结合域的过量表达抑制电离辐射所致DNA双链断裂的再结合

目的 :评价多二磷酸腺苷 (ＡＤＰ)＿核糖基化的反式显性抑制作用对辐射诱导ＤＮＡ双链断裂 (ＤＳＢ)的再结合动力学的影响。方法 :①ＣＯＭ３和ＣＯＲ３细胞均为ＳＶ４０转化的仓鼠细胞系ＣＯ６０的稳定转染子 ,前者含地塞米松(Ｄｅｘ)诱导的多ＡＤＰ＿核糖聚合酶 (ＰＡＲＰ＿１)ＤＮＡ结合域 (ＤＢＤ)选择性过表达结构及人糖皮质激素受体 (ＨｇＯ)组成型过表达的结构 ,而后者为仅含ＨｇＯ质粒的对照细胞。②照射前在两种细胞培养基加或不加５×１０-８ｍｏｌ /ＬＤｅｘ,培养２４ｈ,取适量细胞悬液(８×１０６/ｍＬ)与等体积１ .８%的低熔点…     

低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽提取物抑瘤作用的影响

目的：观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽（TAP）提取物抑瘤作用的影响,为低剂量辐射与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据。 方法：采用微酸洗脱法制备分子量≤3 000的细胞膜TAP提取物,皮下免疫小鼠,免疫前12 h给予75 mGy X射线全身照射,检测胸腺细胞周期时相、脾细胞Con A反应性及脾T细胞CD4、CD8亚组的变化,同时观察体内抑瘤效应。 结果：TAP提取物免疫小鼠后,移植肿瘤的发生率降低,平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞Con A反应性增强,胸腺细胞周期百分数无显著变化。小鼠免疫前12 h给予75 mGy全身照射可增强TAP提取物的抑瘤效应,与单纯TAP组相比,胸腺细胞S期百分数明显增加,脾细胞CD8+ T细胞百分数增高。 结论：低剂量辐射能进一步激发免疫系统功能,增强小鼠肝癌H-22细胞膜TAP提取物的抑制肿瘤作用。     

四种诱发大鼠运动病刺激模式的比较

目的 :比较 4种刺激模式对运动病的诱发效应。方法 :将 60只雄性 SD大鼠随机分为对照组、三角形 组、三角形 组、梯形 组和梯形 组。以刺激前后食高岭土量为指标 ,对三角形 组和 组分别采用三角形刺激模式 (频率 0 .1 Hz,峰速 2 4 0°/ s)刺激 1 h和 1 .5 h,对梯形 组和 组分别采用梯形刺激模式 (加速度 1 0°/ s2 ,峰速 2 4 0°/ s,持续 5 min,减速至 0 )刺激 1 h和 1 .5 h,诱发运动病。结果 :在所用的 4种刺激模式中 ,三角形 组和梯形 组高岭土摄入量与对照组相比差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ,梯形 组与对照组相比差异有显著性 ( P<0 .0 5 )。同时三角形 组和梯形 组高岭土摄入量与三角形 组比差异也有显著性 ( P<0 .0 5 )。结论 :用三角形 组或梯形 组的刺激模式诱发运动病的效果较好     

树突状细胞与紫外线辐射

近年来,随着树突状细胞(DC)体外培近年来,随着树突状细胞(DC)体外培养技术的成熟,人们对其分化发育、亚群分类、体内分布与迁移、对抗原摄取、加工、呈递和与某些疾病的关系等进行了深入研究。DC与免疫激发、免疫抑制、移植免疫、抗感染免疫及自身免疫疾病的发生密切相关。鉴于DC独特的生物学功能及其在免疫应答中的独特地位,使其在免疫中的重要作用越来越受到生物医学界的关注。     

肿瘤相关抗原肽与低剂量全身照射的协同抑瘤作用

目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据。方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小鼠75mGyX射线全身照射,12h后以TAP提取物皮下免疫小鼠,检测脾细胞CD3、CD69和TCRαβ表面标记、脾T细胞亚组百分数的变化、脾细胞ConA反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果小鼠经TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞CD3分子和CD69分子的表达显著升高,脾细胞ConA反应性、IFNγ分泌活性和CTL杀伤活性显著增强,IL-2分泌增多。而同时给予LDR的小鼠不仅上述功能不同程度增强,脾CD8+细胞百分数显著增高。结论LDR与细胞膜TAP具有协同抑瘤作用,细胞免疫力的明显增强可能为其机制之一。