大鼠脊髓损伤修复差异表达cDNA文库的构建

目的　 运用改良消减杂交技术构建大鼠脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库 ,为寻找在脊髓损伤后的修复过程中起关键作用的分子提供帮助。方法　在经典消减杂交的基础上引进SMART反转录、长距离PCR、磁性分离系统、离心柱色谱等方法建立改良消减杂交技术 ,通过两轮消减杂交构建差异表达基因的cDNA消减文库 ,并对文库中的差异基因进行批量克隆与生物信息学分析。结果　 将两轮消减杂交后的差异表达基因转化大肠杆菌JM10 9以建立差异表达基因文库 ,库容量大小为 2× 10 3。从文库中随机挑取 90个克隆进行酶切鉴定与测序分析 ,得到 4 0个差异基因序列 ,其中 32个已知序列 ,8个新序列。 结论　 通过改良消减杂交成功建立了脊髓损伤修复过程中出现的差异表达基因文库 ,为筛选在大鼠脊髓损伤修复过程中起关键作用的基因 ,进一步探讨脊髓损伤修复的分子机制奠定了基础     

夏季饮食的学问

夏季炎热多雨，暑热挟湿，常常使人脾胃受困，食欲不振；天气闷热又使许多人喜欢 吃寒凉食物，往往因吃得太多，伤及脾胃；人们由于出汗过多而损耗大量的体液和营养物质 ，并且因天热而致胃液分泌减少，降低了消化能力，再加上睡眠不足、津液损耗，从而大大 降低了食欲，造成人体出多而入少的局面。所以，许多人一到夏天就精神萎靡、体倦乏力、 体重下降，此谓之“ 夏”或“苦夏”。要预防 夏，必须通过科学饮食来增强食欲、增加营养物质，从而达到祛暑消疲的目 的。炎热季节的饮食应以甘寒清淡、利湿清暑、少油之品为宜。像西瓜、冬瓜、绿…     

应用锚定消减杂交技术克隆分析大鼠脊髓原代神经元损伤、修复相关基因

目的克隆大鼠脊髓原代神经元细胞损伤、修复相关基因,从分子水平探讨中枢神经系统损伤修复的机制.方法建立脊髓原代神经元体外损伤模型,运用改良的锚定消减杂交技术,克隆分析与原代脊髓神经元细胞损伤、修复相关的基因.结果随机挑选110个消减杂交得到的cDNA克隆,测序分析得到27个有功能线索的差异表达序列,其中23个为已知基因,包括Snc、Clu等与神经系统发育及退行性病变相关基因.结论运用锚定消减杂交技术成功克隆了一批与脊髓神经元损伤、修复相关的基因,为探求中枢神经系统损伤修复的分子机制奠定了基础.     

生肌膏质量标准研究

目的:研究制定生肌膏的质量标准。方法:择生肌膏的制备工艺、药味或有效成分鉴别和有效成分含量测定三大项目进行研究。制备工艺研究重点是对生地、当归、生龟板的提取,改高温油炸法为水煎提取法,相应调整其他工艺环节;药味或有效成分鉴别采用薄层色谱法、理化法和显微鉴别法;有效成分含量测定采用高效液相色谱法。结果:制备工艺研究成功,取得了一系列重要技术参数,新工艺制品疗效提高36%;成品制剂中全部方药均实施了鉴别检测;生地、当归、炉甘石三味成功进行了主要有效成分含量测定。结论:该研究为制定新的质量标准奠定了坚实基础。     

药用数学题解

1　某药动学数学模型为 C(t) =4 0 (e- 0 .2 t- e- 2 .3t) ,求Tmax。解 :上述数学模型原公式为 C(t) =Ka FD0Ke- Ka(e- Ket -e- Kat) ,其中 C为血药浓度 ,F为吸收系数 ,D0 为给药剂量 ,Ka为分布速率常数 ,Ke为消除速率常数 ,求 Tmax,即求最大血药浓度时间。根据有关公式 ,有 :Tmax=1Ka- Kaln Ka Ke 1.2 (h)。2　设一容器内有 10 0 L 溶液 ,内含 2 0 g净盐。若每 min均们注入 3L 净水 ,同时使流出 2 L 溶液 ,问 1h后 ,溶液中还有多少净盐 ?解 :设 t时溶液中含 x净盐 ,据题意 ,dxdt=- 210 0 +t,dxx=- 2 dt10 0 +t,两边同时积分 ,dxx…     

浅谈甘草在临床上的不合理应用

甘草为豆科甘草属植物的根和根茎。主含皂甙、三萜类成份和黄酮类化合物，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的作用。在临床应用十分广泛，据报道〔１〕在１５０张处方中，甘草出现的频率为７１４％，然而在临床应用过程中存在着一些不合理的现象，...     

轴突导向信号的研究进展

在神经发育过程中,轴突沿特定的路径延伸,穿越很长的路线到达靶区并与之形成精确的神经连接.轴突在前进过程中受到多种因素的影响,其中最主要的是具有吸引或排斥作用的导向分子,这类分子既可以通过长程也可以通过短程方式指导轴突选择正确的前进路线,目前发现的轴突导向分子家族主要有netrins,slits,semaphorins和ephrins.此外,神经营养因子、细胞黏附分子、胞外基质分子等对轴突延伸也具有导向作用.这些分子与相应的受体结合,启动下游的一系列信号转导途径,调控生长锥的细胞骨架动力学,使轴突按特定的路径前进并最终到达靶标.     

改良消减杂交法克隆大鼠脊髓损伤修复相关基因

目的 克隆大鼠脊髓损伤修复相关基因，从分子水平了解中枢神经系统损伤修复的机制。方法 建立大鼠脊髓损伤模型，运用基于聚合酶链反应(PCR)的改良消减杂交技术，克隆与脊髓损伤修复相关的基因。结果 随机选取l10个克隆进行研究，排除假阳性克隆和重复序列后，筛选到47个差异表达序列，其中39个已知序列，8个未知序列。39个已知序列中，包括synuclein、clusterin等与神经系统发育及退行性病变密切相关的蛋白编码序列；8个未知序列中，69号末端含有Leu拉链结构，包含该序列的基因可能编码DNA结合蛋白。结论 运用基于PcR的改良消减杂交技术成功克隆到损伤脊髓上调表达的基因序列，为探讨中枢神经系统损伤修复的分子机制奠定了基础。     

旋光法测定薄荷醇石蜡溶液中薄荷醇的含量实验研究

目的:对薄荷醇石蜡溶液中薄荷醇进行含量测定。方法:首先确定薄荷醇在石蜡溶液中的比旋度,进而以此为据,测量不同浓度标准溶液的旋光度。用旋光度对浓度进行线性回归,然后进行方法学验证分析。结果:薄荷醇在石蜡溶液中的比旋度为(-)51°±1;°液体石蜡2dm试管旋光度为(+)0.29°±0.01;°取平均值作为测定常数。在每1m l溶液含薄荷醇6m g~12m g范围内,旋光度与浓度呈现良好线性关系,方法学验证分析符合规定。结论:旋光法可用于测定薄荷醇石蜡溶液中薄荷醇的含量。