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目的:探讨复方丹参注射液(ISM)对H2O2诱导的PC12细胞凋亡保护作用的机制.方法:在H2O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上,采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst-PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况,RT-PGR检测par-4和NF-gB P 65基因mRNA表达,Western b1ot检测Par-4和NF-κB P 65蛋白表达.结果:不同剂量ISM预处理1 h可提高PC12细胞的存活率,降低par-4和NF-κB P 65的mRNA表达以及蛋白表达.结论:ISM可剂量依赖性地对抗H2O2的神经毒性作用,其机制可能与降低凋亡基因par-4的表达有关. 相似文献
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目的 :探讨H2 O2 对PC12细胞半胱天冬酶 3(caspase 3)和核转录因子 kappaBP6 5 (uclearfactor kappaB ,NF κBP6 5 )基因表达的影响。方法 :不同剂量H2 O2 (0~ 4 0 0nmol·L-1)处理PC12细胞 8h ,采用RT PCR检测Caspase 3、NF κBP6 5mRNA表达变化 ,Westernblot检测Caspase 3P 2 0活性片段和NF κBP6 5蛋白表达的变化 ,用比色法检测Caspase 3相对活性。结果 :随H2 O2 浓度从 10 0~ 4 0 0nmol·L-1增加 ,Caspase 3、NF κBP6 5mRNA表达和Caspase 3P2 0活性片段及NF κBP6 5蛋白表达水平逐渐增加 ;随H2 O2 浓度从 5 0~ 4 0 0nmol·L-1增加 ,Cas pase 3相对活性增加 (P <0 .0 5 ) ,在 4 0 0nmol·L-1H2 O2 时Caspase 3相对活性达最大值。 结论 :H2 O2 可剂量依赖性的增加Caspase 3mRNA表达和Caspase 3P 2 0活性片段 ,增加Caspase 3活性 ;H2 O2 可剂量依赖性的增加NF κBP6 5mRNA表达和NF κBP6 5蛋白表达。 相似文献
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目的 探讨H2O2对PC12细胞前列腺细胞应答凋亡蛋白-4(prostate apoptosis response-4,par-4)和陔转录因子-κBP65(NF-κBP65)基因表达的影响。方法 用不同终浓度H2O2(0~400nmol/L)处理PC12细胞8h.或终浓度200nmol/l H2O2处理PC12细胞不同时间(0~8h),采用RT-PCR检测par-4、NF-κBP65 mRNA表达变化.Western blot检测Par-4和NF-κBP65蛋白表达的变化。结果 随H2O2浓度从100~400nmol/L增加,par-4、NF-κBP65 mRNA表达和Par-4、NF-κBP65蛋白表达水平逐渐增加;200nmol/L H2O2作用PC12细胞0~8h,par-4 mRNA表达和Par-4蛋白表达,在2~8h随时间延长表达增加;在0~8h NF-κBP65 mRNA表达和NF-κBP65蛋白表达无明显变化。结论 H2O2可时间、剂量依赖性的增加par-4 mRNA表达和Par-4蛋白表达;H2O2可剂量依赖性的增加NF-κBP65 mRNA表达和NF-κBP65蛋白表达;NF-κBP65 mRNA表达和NF-κBP65蛋白表达无时间依赖性。 相似文献
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复方丹参注射液对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨复方丹参注射液 (ISM)对 H2 O2 诱导的 PC1 2细胞凋亡的保护作用机制。方法 在 H2 O2 诱导 PC1 2细胞凋亡模型的基础上 ,采用 MTT比色分析测定细胞存活率 ,Hoechst- PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况 ,RT- PCR检测 par- 4和 caspase- 3基因 m RNA表达 ,Western blot检测 par- 4蛋白表达和 caspase- 3P2 0活性片段 ,比色法检测 caspase- 3相对活性。结果 不同剂量 ISM预处理 1 h可提高 PC1 2细胞存活率 ,降低 par- 4和 caspase- 3的 m RNA表达以及 Par- 4的蛋白表达 ,caspase- 3 P2 0活性片段和 caspase- 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论 ISM可剂量依赖性地对抗 H2 O2的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par- 4表达有关 ,与 caspase- 3的关系尚需进一步探讨。 相似文献
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目的探讨阿魏酸钠(sodium femlate,SF)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法在H_2O_2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上,采用MTT比色分析检测细胞存活率,RT-PCR检测前列腺凋亡响应基因Par-4(prostate apoptosis response-4,Par-4)和核转录因子-κB p65(nuclear factor-kappaB,NF-KB)mRNA表达,Westem blot检测Par-4和NF-κBp65蛋白表达。结果不同剂量SF预处理1h可提高PC12细胞的存活率,降低Par-4和NF-κBp65的mRNA表达以及蛋白表达。结论SF可剂量依赖性地对抗H_2O_2的神经素毒性作用,其机制可能与凋亡基因Par-4表达有关,与NF-κB的关系尚需进一步探讨。 相似文献
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目的 探讨H2O2诱导PC12细胞凋亡的作用机制。方法用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst—PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况;通过RT—PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测par-4、NF—KB、caspase-3基因表达水平的变化;用比色法检测Caspase-3相对活性。结果(1)用终浓度分别为0~400nmol/L H2O2处理PC12细胞8h,随H2O2浓度从25~400nmol/l。增加,PC12细胞存活率逐渐降低(P〈0.05): 相似文献
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NF-κB 是一种具有多向转录调节作用的蛋白质.它分布广泛,并调节多种基因的转录调控,参与炎症反应、免疫应答以及细胞的增生、转化和凋亡等重要的生理病理过程.最近研究表明, NF-κB与中枢神经系统中神经细胞的生长、发育、塑型有关,并在急、慢性神经退行性变如脑损伤、脑缺血、癫痫、阿尔茨海默病及帕金森病等病理过程中起重要作用. 相似文献
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阿魏酸钠对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用的探讨 总被引:7,自引:1,他引:7
目的 探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法 在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par 4蛋白表达和Caspase 3P2 0活性片段 ,用比色法检测Caspase 3相对活性。 结果 不同剂量SF预处理 1h可提高PC12细胞的存活率 ,降低 par 4和cas pase 3的mRNA表达以及Par 4的蛋白表达 ,Caspase 3P2 0活性片段和Caspase 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论 SF可剂量依赖性地对抗H2 O2 的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par 4表达有关 ,与Caspase 3的关系尚需进一步探讨 相似文献