芦荟对应激性胃溃疡的保护作用

应激性溃疡（stress ulcer，SU）是机体在应激状态下胃或肠黏膜出现的急性糜烂和溃疡，是严重心理障碍和危重临床疾病的常见并发症。现代社会生活节奏加快，压力大，应激原多，应激性胃溃疡的发病率因此有所提高，同时因该病不一定出现症状，潜在危害性较大。有研究表明，长期精神紧张、焦虑或情绪波动的人易患消化性溃疡，可能与机体神经内分泌失调、胃黏膜屏障保护功能削弱及胃黏膜损伤因素作用相对增强等因素有关。芦荟是一种常用中药，可以改善机体的应激能力，其生物活性物质具有较强的促进血液循环和新陈代谢、促进伤口愈合、提高人体免疫力、促进消化和吸收等功效。本实验选用冷束缚应激溃疡模型，观察芦荟对应激状态下大鼠胃黏膜损伤及胃液pH值的影响，以探讨芦荟对应激性溃疡的保护作用。     

UPLC-Q-Orbitrap HRMS法同时测定秦艽炮制前后8种成分

目的建立一种UPLC-Q-Orbitrap HRMS定量分析方法,同时测定秦艽炮制前后8种化学成分(龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、木犀草素、异牡荆素、芹菜素、山柰酚)含量的变化。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温35℃。质谱采用负离子检测模式进行检测。结果秦艽经清炒、酒炙后环烯醚萜类含量均明显升高,且清炒后龙胆苦苷和马钱苷酸含量具有统计学差异。黄酮类在清炒和酒炙后含量变化不大。2类成分总的含量变化为环烯醚萜类成分含量清炒酒炙生品;黄酮类成分含量生品酒炙清炒。结论建立的UPLC-Q-Orbitrap HRMS同时测定秦艽炮制前后8种成分的方法准确、稳定,为进一步研究秦艽炮制前后主要成分的变化奠定了基础。     

柴胡疏肝散对实验性肝郁证大鼠的影响

目的:研究柴胡疏肝散对肝郁证大鼠行为、血液流变及脑组织中单胺类神经递质的影响。方法:雄性SD大鼠用枷锁法造模后,观察大鼠体重、免疫器官重量、IL-2、神经递质、血液流变学的变化。结果:模型组大鼠体重下降,糖水消耗量降低,胸腺、脾脏、及IL-2含量下降,血流变呈血瘀样表现,NA、DA及5-HT含量下降,柴胡疏肝散可明显对抗上述改变。结论:柴胡疏肝散对大鼠实验性肝郁证有明显对抗作用。     

CD11c~+DCs促K14-VEGF转基因小鼠银屑病样发病

目的研究CD11c~+DCs对银屑病的促进作用及机制。方法取K14-VEGF转基因小鼠皮损皮肤进行表型鉴定。将CD11c~+DCs注射入未发病的转基因小鼠颈部皮下,对小鼠进行PASI评分;组织学检测小鼠耳朵和颈背部皮肤;检测骨髓、血液、脾脏和颌下淋巴结处T淋巴细胞和DCs;免疫荧光法检测皮损中CD4、CD8、IL-17a、IFN-γ和CD31含量;HE染色方法观察小鼠心、肝、脾、肺和肾的变化。结果 K14-VEGF小鼠皮损中90%FLT3阳性细胞表达CD11c。实验组表皮层厚度均显著高于对照组(P0.01)。血液中CD3~+CD4~+T淋巴细胞数降低(P0.01);骨髓、血液、脾脏和颌下淋巴结中的Th1和Th17细胞减少;同时,骨髓和颌下淋巴结中的CD11c~+DCs减少(P0.01);皮损皮肤中表达CD4~+T、CD8~+T、IL-17a~+和IFN-γ~+的细胞均增多(P0.01),血管增多(P0.01)。结论 CD11c~+DCs可通过促使K14-VEGF小鼠皮肤中T淋巴细胞及血管增多使该小鼠银屑病样病变提前发生,提示CD11c~+DCs可能在银屑病的发生发展中起重要作用。     

大鼠面神经核内非运动神经元的放电样式

目的　探讨大鼠面神经核内非运动神经元的放电样式。方法　在切断面神经引起面运动神经元逆行溃变后 ,细胞外记录面神经核内非运动神经元的单位放电 ,观察其放电样式与呼吸周期的关系。结果　在 18只大鼠共记录到 142个自发放电神经元 ,其中呈非呼吸相关性放电的神经元 (NRRNs) 12 7个 (89.4% ) ;呈呼吸相关性放电的神经元 (RRNs) 15个 (10 .6 % )。结论　面神经核不仅控制面部骨骼肌的运动 ,而且还参与呼吸等功能活动的调节     

离体猪肾自体全血再灌注损伤模型

缺血再灌注 (ｉｓｃｈｅｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ,ＩＲ)肾损伤 ,在临床常见于机体处于失血或中毒性休克以及肾移植、肾部分切除、肾实质切开取石等手术的过程中。目前对ＩＲ肾损伤的研究所采用的动物模型可分为在体和离体两类。在离体研究中 ,国外多选用大鼠和猪的肾制备ＩＲ肾损伤模型 ;灌注液常用ＵＷ (Ｕｎｉ ｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎ)液和ＥＣ(Ｅｕｒｏ -Ｃｏｌｌｉｎｓ)液[1,2 ] ;但由于灌注液配制复杂、价格昂贵 ,国内在此方面的研究尚无法广泛开展。为了寻找从生物源性接近于人类的器官和既廉价又近于体内状态的…     

川芎嗪对大鼠缺氧性呼吸抑制的保护作用

目的探讨川芎嗪(TMP)对缺氧大鼠呼吸中枢的保护作用。方法制备缺氧大鼠模型,观察TMP对缺氧大鼠的呼吸活动和存活时间的影响,采用尼氏染色和免疫组化方法分别检测TMP对缺氧大鼠脑干神经元尼氏体及FOS蛋白表达的影响。结果TMP可显著推迟缺氧性呼吸抑制和动物死亡的发生(P<0.01);与空气对照组相比,缺氧后脑干神经元尼氏染色着色变浅,但缺氧加TMP组着色深于单纯缺氧组,其灰度值明显低于单纯缺氧组(P<0.05);缺氧后FOS蛋白在脑干的阳性表达神经元主要见于孤束核、最后区、舌下神经核、中缝苍白核、下橄榄核、外侧网状核、面神经核、斜方体核,但缺氧加TMP组的阳性表达强度明显低于单纯缺氧组(P<0.05)。结论TMP对呼吸中枢的缺氧性损害具有保护作用,脑干内FOS蛋白可能参与了这一过程。     

趋化因子CCL2在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用

目的:探讨趋化因子CCL2在实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)中的作用及其可能机制。方法:选取CCL2~(-/-)敲除小鼠和C57BL/6小鼠,利用髓鞘少突细胞糖蛋白(Myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG33-35)建立EAE小鼠模型,观察小鼠发病情况,并根据Konot神经功能评分标准对其进行评分;待模型组小鼠发病评分普遍为4~5分时,收集CCL2~(-/-)、C57BL/6模型组和C57BL/6空白组小鼠(n=10)脊髓组织进行HE染色观察和免疫组化检测,分析小鼠脊髓组织的病理变化和CD4~+、CD8~+T淋巴细胞数量改变。结果:CCL2~(-/-)、C57BL/6模型组小鼠发病率分别为0%、100%;其中,1只CCL2~(-/-)模型组小鼠在免疫后第21天出现轻微拖尾随后恢复正常。免疫后第21天时,CCL2~(-/-)模型组小鼠的神经功能评分明显低于C57BL/6模型组(P0.05)。HE染色结果显示,C57BL/6模型小鼠的脊髓组织中脱髓鞘现象明显,其炎性细胞数目显著高于CCL2~(-/-)组(P0.05);同时,免疫组化结果表明,CCL2~(-/-)小鼠脊髓组织中CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞均分别低于C57BL/6小鼠对照组(P0.05),尤其CD8~+细胞量改变存在显著差异(P0.05)。结论:趋化因子CCL2可能通过抑制T淋巴细胞的浸润抑制EAE的发生发展。     

基于O型口蹄疫病毒VP21-33肽段增强VP1141-160肽段免疫原性的新型纳米颗粒疫苗研究

目的 研究O型口蹄疫病毒中VP21-33肽段能否增强VP1141-160肽段的免疫原性及其可能的免疫机制。方法 分别构建两种新的含有VP1和VP2的重组质粒 (PcDNA3.1-VP1、PcDNA3.1-VP2),并将重组质粒制备成纳米颗粒,检测其体外转染效率。然后将上述纳米颗粒作为基因疫苗免疫Balb/c小鼠,PBS及空载质粒作为对照。液相阻断ELISA方法检测不同时间小鼠血清中抗体情况;流式细胞术和免疫组化染色的方法分析免疫小鼠外周血、脾脏和腹股沟淋巴结中CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞的差异;淋巴细胞增殖实验检测免疫28 d后小鼠外周血中淋巴细胞的增殖能力。结果 对重组质粒进行鉴定,结果显示重组质粒(PcDNA3.1-VP1、PcDNA3.1-VP2)构建成功;体外转染实验结果显示该纳米颗粒体外转染效率约为28%,具有较高的转染效率。ELISA检测显示VP1与VP2共同免疫小鼠血清中的抗体滴度均在初次免疫后的第21和28 d达到最高,并显著高于对照组(F=4.625,P<0.05);流式和免疫组化染色结果分析发现VP1与VP2共同免疫小鼠血液、淋巴结和脾脏中CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞数均显著高于对照组;淋巴细胞增殖实验结果显示VP1与VP2共同免疫小鼠淋巴细胞增殖能力均显著高于对照组(F=12.73, P<0.05)。结论 O型FMDV VP2的1-33肽段能增强VP1的141-160肽段的免疫原性,其可能通过激活细胞免疫和体液免疫实现。