凋亡抑制蛋白XIAP和促凋亡因子Smac在胰腺癌化疗抵抗中的作用

目的探讨x-相关凋亡抑制蛋白（XIAP）和促凋亡因子Smac在胰腺癌细胞化疗抵抗中的作用，以及转染胞浆表达型Smac基因靶向下凋XIAP对化疗药物诱导的胰腺癌细胞凋亡的影响。方法应用流式细胞术检测顺铂、5-FU介导的Panc-1、BXPC-3的凋亡率及胞浆染色分析细胞XIAP表达变化，Western blot分析XIAP、Smac、Caspase-3表达水平；构建pEGFP-NI／Smac真核表达载体并转染胰腺癌Panc-1细胞，流式细胞术检测转染Smac基因前后Panc-1细胞的凋亡敏感性。结果与BXPC-3细胞相比，Panc-1对顺铂或5-FU介导的凋亡具有较强抵抗性，Western blot分析显示Panc-1细胞高表达XIAP，在化疗药物作用下化疗敏感细胞BXPC-3胞浆内XIAP水平下降明显多于Panc-1细胞，而且凋亡的BXPC-3细胞释放入胞浆内的成熟Smac蛋白水平明显高于Panc-1细胞。转染胞浆表达型Smac基因至化疗抵抗Panc-1细胞，可明显下调其XIAP表达水平，促进效应Caspase-3分子活化，显著提高顺铂、5-FU诱导的细胞凋亡率。结论胰腺癌细胞XIAP的表达水平下调与其化疗敏感性有关，XIAP是克服化疗抵抗的重要靶分子，而上调Smac活性蛋白的胞浆表达作为一种有效调节信号，通过拮抗XIAP的凋亡抑制作用协同化疗药物促进胰腺癌细胞凋亡。     

Smac合成肽靶向下调凋亡抑制蛋白XIAP提高胰腺癌细胞化疗敏感性

目的:探讨包含目的蛋白功能结构域的Smac合成肽能否增强胰腺癌细胞的化疗药物敏感性及其作用机制.方法:化学合成SmacN7细胞可穿透融合多肽,共沉淀实验观察SmacN7细胞穿透肽与胰腺癌Panc-1细胞内的XIAP的相互作用,应用流式细胞术检测SmacN7细胞穿透肽与顺铂、5-FU联用对Panc-1细胞凋亡的影响,MTT法检测SmacN7细胞穿透肽应用前后Panc-1细胞的化疗药物敏感性.结果:SmacN7融合多肽能与内源性XIAP结合,明显下调Panc-1细胞XIAP表达水平,显著增强顺铂或5-FU诱导的Panc-1细胞凋亡,使其对顺铂、5-FU的药物半数抑制浓度(IC50)分别降低1.98倍、2.62倍.结论:应用包含目的蛋白功能结构域的Smac合成肽能靶向下调胰腺癌Panc-1细胞XIAP表达,显著提高其化疗敏感性,为胰腺癌的生物治疗协同化疗提供了新思路.     

残胃对~(14)C-尿素呼气试验影响的研究

目的:评估用 ~(14)C-尿素呼气试验(~(14)C-UBT)检测残胃幽门螺杆菌(HP)感染的准确性。方法:残胃32例及对照组40例病人先用金标准(胃镜检查时于胃窦和胃体各取两块粘膜活组织,作快速尿素酶试验和常规病理切片5张,Giemsa 染色镜检 HP)定性,再用(~14)C-UBT 检测 HP。用 X~2检验两组结果的准确性。结果:用金标准检测的残胃和对照组的阴性病人(分别为20例和14例)再用~(14)C-UBT 检测未出现假阳性,而残胃组的12例和对照组的26例阳性病人用~(14)C-UBT 检测各出现一例假阴性。两种方法检测的准确性无显著性差别,X~2=0.315,P>0.5。结论:残胃对用~(14)C-UBT 检测 HP 的准确性无影响。     

急性心肌梗死和心房纤维性颤动患者CD62P、CD63与vWF检测的意义

目的 探讨急性心肌梗死(AMI)和心房纤维性颤动(AF)患者血小板膜糖蛋白CD62P、CD63与vWF临床检测的意义。方法采用流式细胞技术和夹心酶免疫吸附试验检测AMI和AF患者CD63、CD62P和vWF的变化。结果 AMI和AF患者的CD62P分别为11．29％和8．72％、CD63分别为8．72％和2．66％，明显高于对照组(3．37％和1．32％)，AMI组的vWF为167．83％，明显高于对照组(102．71％)，AF组为117．05％，与对照组比较无显著性差异。结论急性心肌梗死和心房纤维性颤动患者CD62P和CD63的表达水平明显增高，进一步证实CD62P和CD63为血栓形成的血小板活性物质，参与血栓性疾病的促凝血作用。     

血清降钙素原测定在儿科感染性疾病诊断中的应用

目的 探讨血清降钙素原(PCT) 在儿科细菌感染性疾病诊断中的应用价值.方法 采用半定量固相免疫测定法测定106例儿科感染性疾病患者血清PCT水平,并与C-反应蛋白(CRP) 及外周血白细胞(WBC)计数比较,分析各指标在细菌及病毒感染中的差异.结果 以血清PCT≥0.5 ng/ml为阳性阈值,细菌感染组PCT阳性率为81.0%,病毒感染组为18.6%,两组比较有显著性差异(P＜0.01).PCT对细菌感染诊断敏感性达80.9%,特异性为81.4%,阳性预测值86.4%、阴性预测值74.5%,敏感性明显优于CRP或WBC计数(P＜0.01).结论 血清PCT可作为细菌感染的敏感、有效诊断指标,对鉴别儿科细菌感染与病毒感染具有重要参考价值.     

微剂量~(14)C-尿素呼气试验诊断幽门螺杆菌感染

本研究旨在评价微剂量(37kBq)~(14)C-尿素呼气试验(~(14)C-UBT)对幽门螺杆菌(HP)感染的诊断效果。106例病人清晨空腹饮下37kBq~(14)C-尿素水溶液,海胺溶液吸收20分钟呼气CO_2mmol,液闪仪测定~(14)C放射性活性,结果以dpm/mmolCO_2表达。19例志愿者第二日重复试验。以Warthin-Starry组织染色和快速尿素酶试验作为参照标准,ROC分析法确定~(14)C-UBT最适判别值。结果得出~(14)C-UBT最适判别值为250dpm/mmol CO_2;实验对HP感染诊断的敏感性、特异性和准确性分别为98.3％(58/59)、98.7％(46/47)、和98.7％(104/106);实验重复性良好;体重校正对诊断效果无影响。研究结果提示微剂量~(14)C-UBT诊断HP感染具有高度的准确性,且简单和安全;试验无需试餐和加用非标记尿素,结果不需以体重校正。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的临床分离及耐药机制分析

目的：了解我院耐亚胺培南铜绿假单胞菌（IRPA）的临床分布情况,并探讨其耐药机制。方法：对2009年1月～2010年12月我院住院患者临床分离的非重复性IRPA的数据资料进行统计分析,采用PCR方法检测金属酶基因和外膜通道蛋白基因。结果：从404株铜绿假单胞菌中共分离出100株IRPA,分离率为24.75%。其中90株（90.0%）IRPA来源于下呼吸道痰液标本;IRPA主要来源于重症医学科（ICU）;IRPA对阿米卡星最敏感率为73.0%（耐药率为27.0%）,其次是哌拉西林/他唑巴坦（敏感率为63.0%）,哌拉西林（敏感率为59.0%）,庆大霉素（敏感率为58.0%）,头孢他啶（敏感率为57.0%）,其余药物的敏感率均〈50.0%。仅1株IRPA检测出IMP基因阳性（1.0%）,测序为IMP-9型金属酶基因,其余金属酶基因均未检出;oprD2基因缺失的IRPA有65株（65.0%）。结论：我院IRPA主要是由于外膜通道蛋白oprD2缺失引起,且已有IMP-9型IRPA在我院流行,需引起重视。     

血清抗CCP抗体水平变化对早期类风湿关节炎的诊断价值

目的:研究血清抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体水平变化对早期类风湿关节炎(RA)的诊断价值。方法:选取我院2016年12月-2017年3月收治的320例早期RA患者(RA组),另选同期150例其他风湿病患者(非RA组)和140例健康体检者(健康组),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别对三组受试者的抗CCP抗体水平予以检测,并分析抗CCP抗体诊断RA的特异度、阳性预测值、敏感度、阴性预测值。结果:健康组血清抗CCP抗体水平同其他两组比较,明显较低,RA组水平显著较非RA组高,差异均有统计学意义(P0.05)。血清抗CCP抗体诊断早期RA的特异度为82.07%,阳性预测值为84.10%,敏感度为85.94%、阴性预测值为84.10%。结论:早期RA患者血清抗CCP抗体表达异常,其诊断敏感度及特异度较高,可为早期RA临床诊治提供指导,值得推广。     

人胰岛素样生长因子受体-1基因突变与儿童矮小症发病的相关性及作用机制分析

目的探讨人胰岛素样生长因子受体-1(IGF-1R)基因多态性与儿童特发性矮小症(ISS)的相关性。方法选取2014年2月至2017年3月在我院就诊的ISS患儿179例(ISS组),同时选取358例正常儿童作为对照组,采用SnaPshot技术检测IGF-1R基因的rs1976667、rs2684788位点基因型和等位基因频率,同时测定患儿胰岛素样生长因子(IGF-1)水平。结果 ISS组和对照组rs1976667位点基因型及等位基因型比较差异无统计学意义(P>0.05);ISS组和对照组rs2684788位点基因型及等位基因型比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中ISS组AA基因型和等位基因A频率分别为11.73%和31.28%,明显高于对照组;ISS组rs1976667位点不同基因型患儿IGF-1比较差异无统计学意义(P>0.05);ISS组rs2684788位点基因型AA患儿IGF-1为(143.16±38.11)ng/mL,明显低于GG型和GA型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-1R基因rs2684788位点与ISS发生有一定关系,值得进一步研究。     

雷公藤多甙对IL-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖和IL-6分泌的影响

目的:观察雷公藤多甙对IL-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖和IL-6分泌的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎的作用机理.方法:培养大鼠滑膜细胞株RSC-364,运用CCK-8法检测不同剂量的雷公藤多甙对IL-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364增殖的影响,酶联免疫吸附实验检测细胞株培养上清中的IL-6的含量.结果:经过IL-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364,在不同浓度的雷公藤多甙的作用48h后,其增殖明显受到抑制,并呈剂量依赖性.同时各剂量组均可抑制IL-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364分泌炎性因子IL-6的分泌.结论: 雷公藤多甙抑制IL-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364的过度增殖和IL-6的分泌,这可能是其治疗类风湿性关节炎的作用机理之一.