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1.
2.
不对称PCR制备单链探针检测登革Ⅱ型病毒复制型RNA和复制中间体RNA 总被引:1,自引:0,他引:1
登革病毒是具包膜的单股正链RNA虫媒病毒 ,病毒的复制过程发生在感染细胞胞浆 ,复制型 (RF)RNA是病毒半保留复制的循环模板 ,复制中间体 (RI)RNA的合成则是病毒复制所必需的。经RT PCR获得的DNA模板进行不对称PCR扩增 ,当限制性引物终浓度为 2 5 0nmol L ,两引物比例为 1 0 0∶1时 ,即得到不对称PCR的预计单链和双链DNA产物。此单链产物用于标记探针进行核酸杂交。结果表明不对称PCR制备单链探针进行核酸杂交可用于检测病毒复制型RNA和复制中间体RNA的合成 相似文献
3.
白纹伊蚊和埃及伊蚊defensin A基因克隆及序列分析 总被引:5,自引:0,他引:5
应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensinA基因 ,并与文献报道的defensinA的5个型的cDNA序列进行同源性比较 ,发现此两序列中存在内元 ;从埃及伊蚊体内扩增的片段为蚊虫defen sinAl的前体AaDefAl;从白纹伊蚊体内扩增的片段为defensinA的 1个新型 ,命名为DefA6。 相似文献
4.
在淡色库蚊的乙酰胆碱酯酶ace1基因上发现了1个可变剪接,与实验室敏感株1个个体的ace1基因的编码区相差了24个碱基,导致所编码的成熟蛋白在44~51氨基酸残基处缺失了8个氨基酸。经过在昆虫杆状病毒表达系统中的表达,推测这段基因的可变剪接可影响乙酰胆碱酯酶的活性。 相似文献
5.
目的 比较抗性品系和敏感品系主要生物学特性的异同 ,求抗性品系相对适合度 ,为杀虫剂的合理使用提供理论依据。方法 观察并记录淡色库蚊抗性品系及敏感品系吸血、繁殖和发育等生物学特性 ,组建实验种群生命表。结果 抗性品系吸血率低于敏感品系且差异显著 ;卵期死亡率高于敏感品系且差异显著 ;卵、幼虫和蛹的发育历期均长于敏感品系且差异显著 ;抗性品系适和度为 0 .66。结论 淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系存在适合度缺陷。 相似文献
6.
目的建立西尼罗病毒的空斑形成试验方法,应用于病毒滴度测定和实验感染蚊虫及来亨鸡血液样本中病毒的定量检测。方法将稀释的样本接种常规制备的Veto细胞单层,用琼脂糖凝胶覆盖,孵育一定时间后,加中性红染色,计数空斑数,计算空斑形成单位。结果在琼脂糖凝胶中西尼罗病毒可形成直径大约1~3mm的圆形或类圆形空斑。20%病毒鼠脑悬液的病毒滴度为10^7空斑形成单位。感染蚊虫样本和来亨鸡血液样本也出现典型的空斑。结论建立了西尼罗病毒的空斑形成试验方法,该方法可应用于病毒滴度测定和实验感染蚊虫及来亨鸡血液样本中病毒的定量检测。 相似文献
7.
目的 探讨检测媒介蚊虫体内登革病毒的方法。 方法 以埃及伊蚊和白纹伊蚊两种有效媒介为研究对象 ,在人工经口感染大剂量登革 2型病毒 (DEN- 2 )的基础上 ,通过蚊细胞培养病毒分离和蚊头部压片免疫荧光技术进行病毒抗原检测。 结果 埃及伊蚊感染 DEN- 2病毒 1d后 ,接种 C6 / 36细胞 ,盲传一代后第 5 d出现空斑现象 ,确证细胞发病。白纹伊蚊经口感染登革病毒后 ,取吸血雌蚊每日进行头部压片免疫荧光检测 ,结果显示 ,从蚊虫感染后第 1d~第 2 0d内均能检测到病毒抗原。 结论 用免疫荧光技术 ,可直接检测出感染蚊体内是否携带登革病毒 ,是较为简便、省时、敏感的方法 相似文献
8.
DNA条形码( DNA Barcoding )技术是一种新的物种识别方法,它是分子生物学和生物信息学相结合的产物。在最近几年里,该技术已成为生物分类学中引人注目的研究热点。这一概念认为,类似于商店里使用扫描仪读取条形码,对地球上每一种生物通过快速分析其DNA中的一段基因(线粒体细胞色素c氧化酶Ⅰ亚基, mt COⅠ)加以识别。理论上, DNA条形码已被证明在生物分类鉴定中具有非常重要的作用,并推动了一系列相关学科的发展,但目前不同分类学家对其持的意见也不尽相同。本文综述了DNA条形码技术的产生、发展概况、原理与操作及其在分类中的应用,并概括了DNA条形码在应用于物种分类中可能存在的问题。 相似文献
9.
本文克隆白蚊伊蚊气味受体基因OR21a分析其是否与搜寻宿主或吸血行为相关。通过设计简并引物,PCR扩增得到白纹伊蚊气味受体基因OR21a段,采用SYBR荧光定量PCR方法,以自纹伊蚊β-肌动蛋白基因作为内参,比较了OR21a因在未吸血雌蚊、雄蚊、打断吸血雌蚊和饱血雌蚊头部表达量的差异。结果显示,白纹伊蚊OR21a因在未吸血雌蚊头部表达量最高,饱血雌蚊头部表达量最低,而在雄蚊头部的表达量介于打断吸血雌蚊和饱血雌蚊之间。本研究发现白蚊伊蚊会依据不同的生理需求改变OR21a因的表达量,推测可能与白纹伊蚊搜寻宿主及吸血行为有一定的相关性。 相似文献
10.
目的在实验室内观察溴氰菊酯泡腾片及乳油浸泡蚊帐对淡色库蚊和致倦库蚊的灭效。方法强迫接触法。结果当药剂浓度为2mg·ai/m2时,溴氰菊酯2种剂型浸帐对淡色库蚊的杀灭效果均达到100%,当药剂浓度达到10mg·ai/m2时,其对致倦库蚊杀灭效果不足100%。溴氰菊酯泡腾片浸泡蚊帐杀灭淡色库蚊的LC50为0.23mg·ai/ml,而乳油浸帐的LC50为0.31mg·ai/ml,方差分析结果表明,二者差异有统计学意义(t=3.04,P=0.023);溴氰菊酯2种剂型浸帐对致倦库蚊的LC50分别为1.16和1.33mg·ai/ml,差异无统计学意义(t=1.65,P=0.470)。溴氰菊酯的2种剂型均采用5、10和20mg·ai/nl2 3种浓度浸泡蚊帐,对淡色库蚊和致倦库蚊的毒杀效果随着药物浓度的增高,LT50值明显缩短;溴氰菊酯泡腾片浸泡蚊帐对2种蚊虫的灭效均稍强于乳油浸泡蚊帐,且泡腾片浸泡蚊帐对2种蚊虫的击倒死亡时问均短于乳油浸帐。结论溴氰菊酯泡腾片作为一种新剂型浸泡蚊帐具有良好的灭蚊效果。 相似文献