淡色库蚊中溴氰菊酯和生物丙烯菊酯抗性发展与击倒抗性基因频率之间的关系?

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC_(50)浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为217.8倍和41.6倍。PCR检测结果显示,kdr抗性基因的频率在逐代上升。F_7代时,溴氰菊酯筛选株和生物丙烯菊酯筛选株的kdr抗性基因频率已分别上升至98.96%和97.87%。结果表明,Phe1014的抗性纯合子频率和抗性杂合子频率均与LC_(50)值之间具有显著相关性。本文证明了高浓度的拟除虫菊酯杀虫剂筛选会使Phe1014突变频率快速的上升。     

登革1型和2型病毒混合感染样本的一步法实时荧光定量PCR检测方法的建立

本文旨在建立检测登革1型和2型病毒的一步法实时荧光定量PCR方法,为登革热的诊断和预测提供技术支撑。依据登革1型和2型病毒的保守区序列设计引物和探针,建立了同时检测两个血清型登革病毒的一步法实时荧光定量PCR方法。特异性实验结果显示,该方法可检测出登1型和2型病毒,与登革3型、4型病毒、黄热病毒、流感H3N2病毒均无交叉反应,具有较好的特异性。对登革1型和登革2型的灵敏度均为102copies/μL。应用该方法,可检测出登革1型和2型病毒混合感染C6/36后不同时间点病毒复制动态。在两个血清型登革病毒混合感染C6/36细胞72~120 h登革2型病毒的拷贝数与单独感染时登革2型病毒的拷贝数相比显著下降。上述研究证实建立的一步法实时荧光定量PCR方法具有特异性好灵敏度高、重复性好等特点,能够用于登革型和2型病毒混合感染样本的检测。     

免疫荧光技术检测室内感染蚊虫体内登革病毒的研究

目的　探讨检测媒介蚊虫体内登革病毒的方法。　方法　以埃及伊蚊和白纹伊蚊两种有效媒介为研究对象 ,在人工经口感染大剂量登革 2型病毒 (DEN- 2 )的基础上 ,通过蚊细胞培养病毒分离和蚊头部压片免疫荧光技术进行病毒抗原检测。　结果　埃及伊蚊感染 DEN- 2病毒 1d后 ,接种 C6 / 36细胞 ,盲传一代后第 5 d出现空斑现象 ,确证细胞发病。白纹伊蚊经口感染登革病毒后 ,取吸血雌蚊每日进行头部压片免疫荧光检测 ,结果显示 ,从蚊虫感染后第 1d～第 2 0d内均能检测到病毒抗原。　结论　用免疫荧光技术 ,可直接检测出感染蚊体内是否携带登革病毒 ,是较为简便、省时、敏感的方法     

白纹伊蚊气味受体基因OR21α的克隆及定量分析

本文克隆白蚊伊蚊气味受体基因OR21a分析其是否与搜寻宿主或吸血行为相关。通过设计简并引物,PCR扩增得到白纹伊蚊气味受体基因OR21a段,采用SYBR荧光定量PCR方法,以自纹伊蚊β-肌动蛋白基因作为内参,比较了OR21a因在未吸血雌蚊、雄蚊、打断吸血雌蚊和饱血雌蚊头部表达量的差异。结果显示,白纹伊蚊OR21a因在未吸血雌蚊头部表达量最高,饱血雌蚊头部表达量最低,而在雄蚊头部的表达量介于打断吸血雌蚊和饱血雌蚊之间。本研究发现白蚊伊蚊会依据不同的生理需求改变OR21a因的表达量,推测可能与白纹伊蚊搜寻宿主及吸血行为有一定的相关性。     

DNA条形码研究进展

DNA条形码（ DNA Barcoding ）技术是一种新的物种识别方法,它是分子生物学和生物信息学相结合的产物。在最近几年里,该技术已成为生物分类学中引人注目的研究热点。这一概念认为,类似于商店里使用扫描仪读取条形码,对地球上每一种生物通过快速分析其DNA中的一段基因（线粒体细胞色素c氧化酶Ⅰ亚基, mt COⅠ）加以识别。理论上, DNA条形码已被证明在生物分类鉴定中具有非常重要的作用,并推动了一系列相关学科的发展,但目前不同分类学家对其持的意见也不尽相同。本文综述了DNA条形码技术的产生、发展概况、原理与操作及其在分类中的应用,并概括了DNA条形码在应用于物种分类中可能存在的问题。     

白纹伊蚊唾液抗血小板凝集因子Apyrase基因片段的克隆测序

抗血小板凝集因子Apyrase是吸血昆虫唾液的重要功能因子 ,能水解被吸血宿主血液中血小板释放的ATP、ADP而抑制血小板凝集 ,以利吸血过程的顺利进行。本研究针对我国的白纹伊蚊 ,用兼并引物PCR法扩增了抗血小板凝集因子Apyrase的基因片断 ,并克隆入T载体进行了测序 ,经Clastal比较发现与埃及伊蚊相应序列有很高的同源性 ,为进一步的研究打下基础。     

三种温度对拟除虫菊酯杀灭淡色库蚊幼虫效果的影响

<正> 探讨温度对涤虫剂杀灭蚊虫作用的影响对合理使用杀虫剂,提高防蚊灭蚊效果都具有十分重要的参考价值。作者在实验室用标准浸渍法对淡色库蚊(Culex pipienspallens)四龄幼虫用6种拟除虫菊酯进行处理,每种杀虫剂试验用两个浓度,各自作4—8个重复,试虫数量为100—200条。处理完毕分别置于20℃、25℃和30℃的恒温箱内,24小时后观察结果。幼虫以不能逃避机     

我国蚊虫中昆虫共生微生物Wolbachia感染的研究

目的：研究我国蚊虫中昆虫共生微生物Wolbachia的感染情况。方法：采用依据Wolbachia的wsp基因序列建立的PCR分组检测方法，对我国蚊科中库蚊属、伊蚊属和按蚊属中一些蚊虫种类进行了检测。结果：库蚊属中尖音库蚊复组4个亚种的实验室种群和伊蚊属中的白纹伊蚊的4个地理株种群均有感染，感染的Wolbachia株属B组中的pip组；同时在白纹伊蚊种群中还发现了有A组和B组Wolbachia的双重感染；而同时检测的三带喙库蚊，刺扰伊蚊，埃及伊蚊的2个地理株，中华按蚊和斯氏按蚊没有发现Wolbachia的感染。结论：本研究应用该方法，成功地对我国蚊虫体内感染的Wolbachia株进行了检测与分组。