肝癌组织中β—和p^120—连环蛋白的表达

目的 揭示连环蛋白与肝癌的发生发展的关系。方法 应用RT－PCT和免疫组织化学观察细胞黏附与信号转导分子β－和p^120－连环蛋白在正常肝组织、肝癌旁结节性肝硬化组织和肝癌组织中p^120ctn mRNA的蛋白质表达情况及其与β－连环蛋白的关系。结果 所有肝组织中均表达p^120 ctn mRNA同工蛋白1A和3A。2例正常肝组织中β－和p^120-连环蛋白分子表现为胞膜表达而胞质无表达;17例癌旁结节性肝硬化组织表现为胞膜和胞质均有表达,以胞质为主,且胞膜表达有所增强。17例HCC组织中表现为胞膜表达明显减弱或消失,而胞质表达则增强。多数细胞胞膜表达呈现不连续性。结论 肝组织中可检测到p^120ctn同工蛋白1A和3A mRNA。此外,正常肝组织中β－和p^120-连环蛋白分布在胞膜,对维持正常的细胞黏附和信号转导起重要作用;结节性肝硬化肝组织中此2种分子出现了分布变化,而肝癌细胞中此2种分子发生了明显的转位现象,提示肝癌细胞在一定程度上改变了细胞黏附分子的正常功能和其所介导的信号转导作用。     

日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿与Th1／Th2细胞因子水平的动态变化

目的 观察小鼠感染日本血吸虫后急、慢性期肝肉芽肿病变与Th1/Th2细胞因子的动态变化,探讨Th1/Th2在肉芽肿形成及调节中的作用。方法 采用石蜡切片,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变,用ELISA双抗夹心法测定小鼠感染后0、4、6、8和12周血清及脾淋巴细胞IL-2、IFNr和IL-4水平的动态变化。结果 小鼠感染后6周出现明显肉芽肿病变,8周肉芽肿反应达高峰;12周则明显缩小;感染小鼠血清及脾淋巴细胞的Th1细胞因子IL-2和IFNr在感染后4～6周开始上升,8周达高峰,随后下降;而Th2细胞因子IL-4在感染后8周时迅速上升且随感染时间延长而明显升高。结论 Th1细胞因子IL-2和IFNr与血吸虫卵肉芽肿的诱导和形成密切相关。而Th2细胞因子ILL-4可抑制Th1细胞因子在血吸虫病慢性期虫卵肉芽肿自发性免疫调节中起重要作用。     

过表达整合蛋白α5β1的SMMC7721细胞株的建立和鉴定

构建过表达整合蛋白α５β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株。方法应用分子克隆技术和基因转染建立过表达整合蛋白α５β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株,应用ＲＴ－ＰＣＲ及流式细胞术鉴定ＳＭＭＣ７７２１细胞表面整合蛋白α５β１的表达。结果获得过表达整合蛋白α５／β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株α５．３－７７２１,β１．６－７７２１,α５β１．６－７７２１细胞。结论整合蛋白α５β１基因转染后,ＳＭＭＣ７７２１细胞整合蛋白α５β１的ＲＮＡ及蛋白质表达明显提高。过表达整合蛋白α５β１的ＳＭＭＣ７７２１细胞株的建立有助于研究整合蛋白α５β１在肝癌中的作用     

新型三聚β肽对人肝癌细胞系迁移和侵袭能力的影响

在肿瘤侵袭转移过程中，肿瘤细胞首先脱离原位，与基底膜和细胞外基质中的大分子蛋白成分黏附，并激活与基质蛋白溶解相关的蛋白水解酶类如基质金属蛋白酶(MMPs)，降解基底膜和细胞外基质，从而细胞移动并穿过基底膜和血管壁进入血液循环。在肿瘤细胞与细胞外基质的黏附过程中，整合蛋白起了非常重要的作用。Liu等根据整合蛋白β亚基和部分α亚基的保守序列设计的抗黏附β肽能阻断肿瘤细胞与基质的相互作用，对高转移的人肝癌裸鼠模型LCID20肝癌切除术后肝内转移和肺转移也具有强大抑制作用。     

EGFRvⅢ上调FAK磷酸化促进人胶质瘤细胞迁移

目的：探讨表皮生长因子受体突变体Ⅲ（epidermal growth factor receptor mutation typeⅢ，EGFRvⅢ）促进入胶质瘤细胞迁移运动的可能机制。方法：利用反转录病毒感染技术建立EGFRvⅢ过表达的人胶质瘤细胞U87 EGFRvⅢ，琼脂滴细胞迁移实验和Transwell细胞迁移实验观察EGFRvⅢ对细胞迁移运动的影响；Western印迹法检测黏着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）磷酸化的变化。将FAK突变体FAK（Y397F）导入U87 EGFRvⅢ细胞，观察细胞侵袭运动变化。结果：EGFRvⅢ促进入胶质瘤细胞U87的迁移运动，同时使FAK397位点磷酸化水平上调。将FAK突变体Y397F转入U87 EGFRvⅢ细胞，FAK磷酸化水平下调同时细胞迁移能力下降。结论：EGFRvⅢ通过上调FAK397位点磷酸化水平来促进胶质瘤细胞的迁移。     

人肝癌细胞诱导分化的体外研究

作者8年来选用全反式继甲酸（RA）为主要分化诱导剂，用体外细胞培养的方法，并用一系列形态学、生物学、生物化学的分子生物学的新技术和指标来研究RA对人肝癌细胞对SMMC－7721的逆转（分化诱导）作用，获得令人振奋的可喜成果。体外实验有利于药物直接作用于细胞，便于观察指     

亚硒酸钠对人肝癌细胞株甲胎蛋白、纤维连接蛋白及细胞膜糖链的影响

微量元素硒是机体正常生长的必需营养素,它能作为谷胱甘肽过氧化物酶组成部分,参与破坏机体代谢过程中产生的过氧化物,保障细胞膜或蛋白质中特定基团免受损害。随研究深入,发现体内硒水平与肿瘤发生率有密切关系。从实验动物获得的绝大多数资料支持硒是肿瘤细胞抑制剂的论点,特别是对上皮细胞。流行病学调查也提示硒缺乏与某些疾病产生有关。近年来报道用硒治疗消化道肿瘤,有一定成效。但从细胞水平研究硒对消化系     

TNF—α对人肝癌细胞E—钙粘蛋白、α5β1整合蛋白及粘着斑激酶蛋白表达的影响

目的：研究应用肿瘤坏死因子（TNF-α）单独处理SMMC－7721肝癌细胞不能引起肝癌细胞凋亡的原因。方法：采用免疫组化ABC法，结合图像分析仪及流式细胞术和Western印迹方法测定SMMC－7721细胞表面E－钙粘蛋白（E－cadherin)、α5β1整合蛋白（α5β1intergrin)、粘着斑激酶（FAK）表达及粘着斑激酶磷酸化的程度。结果：在肿瘤坏死因子的作用下，E－钙粘蛋白的表达略有下降，但无明显差异。整合蛋白α5亚基的表达明显下降，而整合蛋白β1亚基表达基本无变化。粘着斑激酶的蛋白表达随着肿瘤坏死因子浓度的增加略有下降，但变化不明显，粘着斑激酶的磷酸化程度无明显的变化。结论：单独用肿瘤坏死因子处理SMMC－7721肝癌细胞后，并没有阻断由整合蛋白，α5β1亚基及E－钙粘蛋白介导的2条信号通路，且由胱冬肽酶（caspases)介导的凋亡也没有被完全启动，不足以引起细胞的凋亡。     

醛糖还原酶ELISA测定及意义

从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶(AR),皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶(HRP)标记制备抗体-HRP交联物,利用夹心ELISA(抗体-抗原-酶标抗体)测定了22例糖尿病人及10例正常对照的红细胞AR水平.结果①糖尿病AR水平显著高于正常人;②AR水平病人约有5倍、正常人约有3倍的变异;③病人AR水平与空腹血糖水平明显相关,正常人无相关;④AR水平与性别、年龄、糖尿病病程无关.结论ELISA测定红细胞AR水平方法简便、特异,为研究AR提供了一个有用的方法.     

维甲酸影响新生大鼠皮肤上皮基底细胞DNA及蛋白质合成的体外实验

本文研究了维甲酸(RA)对体外培养的新生大鼠皮肤上皮基底细胞DNA和蛋白质合成的影响。RA(16 μmol/L)明显降低基底细胞~3H-dT掺入;显著增加~3H-亮氨酸和~3H-组氨酸掺入细胞蛋白质。经聚丙烯酰胺凝胶电泳与双相电泳辅以放射自显影术,证实有5种分子量不同的蛋白质受RA诱导合成,其中3种蛋白质为细胞表面膜蛋白。用~3H-甘露糖标记细胞糖蛋白糖链,发现RA可促进~3H-甘露糖的掺入,而且细胞表面糖蛋白中~3H-甘露糖掺入量比对照组增加43％。结果提示RA抑制上皮基底细胞增殖,诱导细胞合成蛋白质,主要为蛋白质的转换率增强,以及增加糖蛋白糖链合成。