抗流感病毒药物的新进展与临床应用

流感是发病率较高的病毒性疾病,临床上仍难于治疗.虽然应用了流感疫苗,流感导致的发病率和死亡率还是很高.所以有效抗流感药物的研发就变得十分重要和紧迫.     

新型抗生素S632A对单纯疱疹病毒Ⅰ型感染小鼠的治疗作用

目的研究新型抗生素S632A对单纯疱疹病毒Ⅰ型感染小鼠的治疗作用。方法建立小鼠单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)模型，观察给药后小鼠存活率和平均存活时间，并检测给药后不同时间小鼠脑组织病毒滴度，以及HE染色观察给药组小鼠脑组织病变程度。结果实验结果显示28mg／kg治疗剂量的S632A能够明显降低小鼠死亡率，延长其平均存活时间，降低脑组织病毒滴度，减轻脑组织病变程度，且与阳性对照药物阿昔洛韦(ACV)治疗效果类似，统计学上无显著差异。结论一定剂量的S632A在小鼠体内具有类似于ACV的治疗作用，值得进一步研究和开发。     

仙台病毒HN基因核酸疫苗的构建及表达

用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)从仙台病毒cDNA中扩增出HN全长序列片段,构建HN基因的真核表达载体pVAX1-HN,用PCR法、酶切进行鉴定.将重组质粒用脂质体法转染至COS 7细胞,用流式细胞术检测抗原蛋白表达,RT-PCR法检测HN基因mRNA表达情况.发现经PCR法和酶切鉴定,目的 片段大小与预期相符,经测序目的 基因序列与GenBank公布结果一致.转染后抗原蛋白表达达到68.3%,明显高于转染前(P＜0.01),HN基因mRNA明显表达.提示成功构建核酸疫苗pVAX1-HN,并在COS 7中能够瞬时表达,为进一步进行免疫学评价奠定基础.     

核酸疫苗pVAX1-F的构建及瞬时表达

目的:构建仙台病毒核酸疫苗pVAXl-F,并在COS 7细胞中表达.方法:利用PCR法以仙台病毒cDNA为模板扩增出F基因,与pMD18-T连接,测序正确后用HindⅢ/EcoR Ⅰ双酶切,将F基因引入经同样酶切的pVAX1载体,构建pVAX1-F表达载体,用PCR法和双酶切法鉴定,并将此重组质粒通过脂质体介导转染COS 7细胞,流式细胞术检测抗原蛋白表达、RT-PCR法检测外源基因的表达.结果:经PCR法和酶切鉴定,目的片段大小与预期相符,经测序目的基因序列与GenBank(EF679198)公布结果一致.重组质粒pVAX1-F转染COS 7细胞72 h后,能够表达抗原蛋白,流式细胞术检测达到58.3%,与对照组3.6%比较差异具有显著性(P<0.01),且F基因mRNA明显表达.结论:成功构建pVAX1-F,并能够在COS 7细胞中瞬时表达,为仙台病毒F基因核酸疫苗进行免疫学评价奠定基础.     

副黏病毒Tianjin株重组血凝素-神经氨酸酶单克隆抗体的制备及在临床检测中的初步应用

目的:建立双抗体夹心ELISA法,调查副黏病毒Tianjin株引起婴幼儿下呼吸道感染情况。方法:用纯化的重组HN片段免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备单克隆抗体。以兔抗Tianjin株多克隆抗体为捕获抗体,单抗G7G7E7为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA法,检测104例下呼吸道感染患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)标本。结果:获得3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株G7H4D3、G7D9G3和G7G7E7。3株单克隆抗体与副黏病毒Tianjin株有较高结合活性,与甲、乙型流感病毒,新城疫病毒(NDV),人副流感病毒(hPIV)1型、3型、肺炎支原体均无交叉反应性。ELISA相加试验和阻断试验表明,3株单抗识别相同或相近表位区域,识别的表位在抗病毒免疫应答中处于免疫优势地位。双抗体夹心ELISA法检测阳性率为1.92%(2/104)。结论:与RT-PCR和间接ELISA法比较,双抗体夹心ELISA法,具有敏感性高、特异性强的优点,适于临床检测使用。副黏病毒Tianjin株是婴幼儿下呼吸道感染的重要致病因子之一。     

板蓝根提取物抗甲1型流感病毒鼠肺适应株作用的研究

目的研究板蓝根提取液的抗甲1型流感病毒鼠肺适应株作用。方法以病毒滴鼻感染小鼠,建立病毒感染小鼠模型,观察小鼠病死率、肺指数及肺病理改变;用鸡胚培养法观察板蓝根提取物灭活甲1型流感病毒鼠肺适应株的作用。结果药物组小鼠病死率及肺指数明显低于模型组,有显著性差异。肺病理显示病变较模型组轻且炎性细胞渗出少。鸡胚实验结果显示板蓝根提取液能明显灭活病毒。结论板蓝根提取液具有一定的抗甲1型流感病毒鼠肺适应株和增强机体免疫力的作用。     

加强七年制医学生早期科研能力培养的探讨

目的通过医学微生物学的课外实践活动,加强七年制医学生早期科研能力的培养与训练。方法针对本专业的特点及结合教师的科研课题方向,指导学生参加部分科研项目;指导学生围绕感兴趣的某个专题查阅文献,撰写综述;由能力强的学生独立选题、立题设计出实验方案,再结合本教研室的实际情况,由教师适当地予以指导。结果学生通过课题的研究了解了医学微生物学的新进展、新发现及相关的科研思路,力求科研题目有前沿性。学生参加科研活动,通过实验设计了解了实验的整体过程,培养了科学的思维方法及独立思考、解决问题的能力,并培养了学生的严谨的科学态度。     

秋梨润肺浸膏对小鼠免疫功能及流感病毒的作用研究

目的：研究秋梨润肺浸膏对小鼠免疫功能的影响及对流感病毒鼠肺适应株（FM1）的体内防治作用。方法：小鼠舌下给予秋梨润肺浸膏,检测其体重、脾重及T、B细胞刺激指数等免疫指标;建立小鼠、鸡胚的流感病毒感染模型,观察药物对流感病毒增殖的抑制作用。结果：秋梨润肺浸膏使小鼠体重、脾指数及T、B细胞刺激指数增加;并有效阻止流感病毒对鸡胚的感染,降低了小鼠的死亡率。结论：秋梨润肺浸膏能增强小鼠免疫功能并具有一定的抗流感病毒作用。     

通过医学微生物学课外活动提高学生的创新能力

在加强学生专业理论知识传授的同时，积极引导学生开展课外科研活动，培养学生的创新能力及科研素质，应是一种提高学生综合能力的有效方法。