用细胞因子流式细胞计数术体外检测重组人IL-12的生物学活性

对重组IL-12生物学活性的鉴定目前国内外多采用淋巴细胞增生试验（MTT）、NK细胞杀伤试验（LDH）、IFN-γ产生等方法.细胞因子流式细胞（cytokine follow cytometry,CFC）是近年来体外细胞免疫功能研究中出现的新方法,不仅简单、快速,而且可以同时获得针对某种抗原特异性T细胞亚群数量及其功能的二维指标.本研究构建了人IL-12单链双亚基共表达载体,在HEK293细胞中表达重组IL-12.分别应用CFC、MTT、LDH等方法对其生物学活性进行鉴定.     

山东省HCV分离株C 区及NS5 区核苷酸序列分析

①目的 探讨山东省丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）分离株Ｃ区、ＮＳ５区的核苷酸序列及其基因型别。②方法 以ＲＴ－ｎｅｓｔ－ＰＣＲ方法从１例临床ＨＣＶ感染者血清中分别扩增出ＨＣＶＣ区（４３２ｂｐ）及ＮＳ５区（３１９ｂｐ）的基因片段,将其克隆于Ｔ载体上,以双脱氧末端终止法自动测序并进行序列分析。③结果 该分离株与ＧｅｎＢａｎｋ中５０多个１ｂ型分离株同源性均在９０％以上,其中Ｃ区与中国北京的１ｂ型株ＨＣＵ６３３７     

RKIP表达下调对宫颈癌细胞增殖的影响

目的探讨脂质体法转染Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因对宫颈癌细胞增殖的影响及RKIP在宫颈癌转移中的作用。方法应用脂质体法,将含有人RKIP基因的反义质粒asRKIP及空白质粒pcDNA3.1(-)分别转染宫颈癌Caski细胞,采用G418筛选出稳定转染的宫颈癌Caski细胞。空白质粒转染后Caski细胞即空白对照细胞命名为Caski-(-),asRKIP转染后Caski细胞分为平行的两组分别命名为Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞,应用Western Blotting方法检测各种Caski细胞中RKIP蛋白的表达,建立RKIP表达下调的宫颈癌细胞系(转染细胞系及对照细胞系);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、软琼脂集落形成实验和Transwell小室实验检测RKIP表达下调对宫颈癌细胞增殖的影响。结果成功建立了RKIP表达下调的Caski宫颈癌细胞系。Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞中RKIP的表达水平明显低于Caski-(-)细胞和Caski细胞,Cas-ki-asRKIP#1和Caski-asRKIP#2细胞的增殖速度比Caski-(-)细胞和Caski细胞快,差异有显著性(t=4.98～6.43,P<0.05);而Caski细胞和Caski-(-)细胞的增殖速度无明显差异(t=1.36,P>0.05)。各组Caski细胞均可以在双层琼脂中增殖形成细胞集落,Caski-asRKIP#1细胞和Caski-asRKIP#2细胞与Caski-(-)细胞、Caski细胞比较,形成的集落大且数目多,差异有统计学意义(F=19.98,P<0.05);Caski-(-)细胞与Caski细胞集落数目比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RKIP表达下调可能对宫颈癌细胞的增殖具有一定的促进作用。     

大肠埃希菌基因间重复序列PCR反应体系的优化

目的对大肠埃希菌ERIC-PCR反应体系进行优化。方法提取大肠埃希菌基因组DNA作为ERIC-PCR反应的模板,通过设计一个L9（3^4）正交试验对Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq DNA聚合酶4种因素进行优化。结果通过L9（3^4）正交试验优化的大肠埃希菌ERIC-PCR最佳反应体系（25μl）为：2.5μl 10×Loading buffer,Mg^2＋浓度2.0mmol/L,dNTPs浓度200μmol/L,引物浓度0.2μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U,模板DNA 40ng。应用该体系进行ERIC-PCR得到的DNA指纹图谱条带丰富、清晰、重复性好。结论采用正交试验优化的ERIC-PCR反应体系结果稳定可靠,对于大肠埃希菌在分子水平上的分型鉴定以及分子流行病学调查具有重要意义。     

胸主动脉腔内修复术治疗急性复杂性Stanford B型主动脉夹层

【摘要】急性Stanford B型主动脉夹层（ATBAD）是严重威胁患者生命的急危重症。近年来,腔内修复治疗(EVAR)急性B型主动脉夹层已得到广泛应用。然而,由于胸腹主动脉特殊的解剖结构、疾病本身的复杂性、术后支架相关并发症的发生及修复技术的多样性,对于急性复杂性Stanford B型主动脉夹层（cATBAD）,选择外科手术还是腔内修复治疗、如何更科学地选择支架及应用相关技术进行腔内修复治疗,仍是困扰许多介入医生的问题。本文就cATBAD的腔内修复治疗作一综述,以期提高对腔内修复治疗本病的认识。     

雌二醇诱发大鼠高血压后相关组织中Ca，Cu及Zn含量的变化

①目的探讨雌二醇诱发大鼠血压升高与某些离子的关系。②方法用原子吸收分光光度法（火焰法），检测了雌二醇诱发血压升高组及对照组大鼠血清、延髓、肾上腺、心肌和肾脏组织中Ｃａ２＋，Ｃｕ２＋和Ｚｎ２＋的含量，经ｔ检验统计处理。③结果与对照组相比，实验组大鼠血清和延髓中Ｃａ２＋的含量增加（ｔ＝２．３０３，Ｐ＜０．０５；ｔ＝２．０８５，Ｐ＜０．０５），而肾上腺和心肌中Ｃａ２＋含量减少（ｔ＝３．５１０，Ｐ＜０．０１；ｔ＝２．１０４，Ｐ＜０．０５）。血清和肾脏中Ｃｕ２＋含量增加（ｔ＝２．４５４，Ｐ＜０．０５；ｔ＝２．５６４，Ｐ＜０．０１），而延髓中Ｃｕ２＋含量减少（ｔ＝２．２５４，Ｐ＜０．０５）。延髓和肾上腺Ｚｎ２＋含量增高（ｔ＝２．５０２，Ｐ＜０．０５；ｔ＝２．１４７，Ｐ＜０．０５），而心肌和肾脏Ｚｎ２＋含量减少（ｔ＝２．０７７，Ｐ＜０．０５；ｔ＝２．４９８，Ｐ＜０．０５）。④结论Ｃａ２＋，Ｃｕ２＋和Ｚｎ２＋可能参与雌二醇诱发大鼠高血压     

钝顶螺旋藻多糖抗单纯疱疹病毒2型的作用

 【目的】探讨钝顶螺旋藻多糖(PSP)抗单纯疱疹病毒2型(HSV-2)的作用及可能机制,为进一步开发该药提供理论依据。【方法】实验选用HSV-2标准株(333株),以不同剂量的PSP作用于HSV-2复制周期的不同阶段,终点以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞保护率(MTT法)及荧光定量PCR(FQ-PCR)作为评价手段,判断PSP的抗病毒效果。【结果】PSP对Vero细胞毒性极低(TC50为1750μg/mL),对HSV-2无直接灭活作用,可抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的复制,其中50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL浓度的PSP对病毒复制的抑制率分别为63.94%、81.41%、85.63%;FQ-PCR结果显示随着PSP浓度及作用时间的增加,PSP对HSV-2DNA的抑制作用明显增强,具有良好的剂量和时效关系。【结论】PSP在体外具显著的抗HSV-2病毒作用,此作用发生在病毒吸附、病毒基因复制等多个环节上。     

危重病人口腔冲洗的随机对照研究

目的 比较口腔冲洗与常规口腔护理对危重病人护理效果。方法 将外科重症监护病人76例，随机分成2组：实验组与对照组。实验组38例，选用口腔冲洗；对照组38例，选用口腔护理(即生理盐水棉球法)，比较2组口腔细菌培养和口腔气味等情况。结果实验组口腔细菌培养阴性率94．7％，口腔异味发生率2．6％；对照组口腔细菌培养阴性为71．1％，口腔异味发生率为50％；其他如口腔溃疡实验组也较对照组低，差异显(P＜0．01)。结论 对于危重病人采用口腔冲洗较常规口腔护理能降低口腔感染、口腔异味等并发症的发生率。     

病原生物学实验教学创新模式的构建与探索

根据医学实验教学的特点和社会对高素质应用型医学人才的需求,结合实验教学中心的条件,针对目前病原生物学实验教学中存在的问题,对现有病原生物学实验教学模式进行了优化和创新,并从整合实验内容,编写实验教学大纲和实验教材;优化教学内容,探索有效的教学方法和教学手段;积极探索创新,开展本科生创新实践教学活动;实验考核多元化,加强学生实践操作技能的培养;利用教学资源,增加学生课内课外学习机会等方面进行了探索,取得了初步成效。