日本血吸虫和曼氏血吸虫减毒尾蚴免疫小鼠淋巴…

宿主经照射减毒血吸虫尾蚴免疫后获得显著的抗攻击感染的抵抗力。本文探讨紫外线减毒尾蚴免疫小鼠淋巴细胞表型的动态变化。方法：小鼠分别感染减毒日本血吸虫和曼氏血吸虫尾蚴（５００条／只），对照组分别感染两种正常尾蚴（２００条／只），免疫后第３、５、７、１０、１４和２１ｄ各组剖杀６－７只，摘取两侧腋窝淋巴结和脾脏分离细胞，采用双染色免疫荧光标记的单抗及ＦＡＣＳｃａｎ流式细胞仪进行细胞表型分析。结果：免疫小鼠     

大鼠实验性牙周炎一氧化氮含量改变的研究(英文)

目的：通过建立大鼠牙周炎实验模型，测量牙龈组织中亚硝酸盐(NO2-)和硝酸盐(NO3-)的含量，比较一氧化氮(NO)含量与附着丧失(AL)的关系，探讨NO在牙周炎病理进程中的作用。 方法： 健康Sprague-Dawley大鼠共72只，随机分为两组：正常对照组和牙周炎组，每组36只。参照Di Paola法复制大鼠牙周炎动物模型。分别于术后1、4和8周时处死动物，每个时点每组处死的动物数为12只。采用分光光度仪测量大鼠牙龈组织中亚硝酸盐（NO2-）和硝酸盐(NO3-)的含量，以间接确定NO含量；采用组织切片法观察牙周组织的组织学改变；应用Tiger细胞图像仪测量AL。 结果： 术后4周和8周时，实验性牙周炎组牙龈组织NO2-/NO3-含量明显高于正常对照组(P<0.01)；在牙周炎组，术后8周牙龈组织NO2-/NO3-含量明显高于术后4周(P<0.01)。在牙周炎组，术后4周和8周与术后1周比较，AL显著增加(P<0.01)；术后8周与4周比较，AL显著增加(P<0.01)。 结论： 牙周炎组牙龈组织NO2-/NO3-含量明显高于正常对照组；NO2-/NO3-含量与牙周组织的AL直接相关。结果表明NO在牙周组织的炎症和破坏过程中发挥作用，提示在牙周炎的治疗中控制NO具有临床应用价值。     

Construction of a recombinant plasmid harbouring the rhoptry protein 1 gene of Toxoplasma gondii and preliminary observations on DNA immunity

Objective To observe the immune responses elicited in BALB/c mice by a DNA vaccine. A ge ne encoding rhoptry protein 1 (ROP1) from Toxoplasma gondii (T. gondii) was cloned into vector pcDNA3.Methods Amplifyied gene fragments coding for ROP1 from the genomic DNA of T.gondii ZS2 were inserted into cloning vector, pUC18, and sub-cloned into pcDNA3. Mice wer e injected at a dosage of 100 μg recombinant plasmid DNA by intramuscular inje ction and boosted after 2 weeks. pcDNA3 and normal saline were used as control . 30, 50 and 70 days after the second immunization, NK cell activity, T lympho cyte proliferation and sub-clusters and serum IgG antibody were assayed.Results The specific gene fragment coding for ROP1 was amplified and a pcROP1 recombinan t was constructed. At 30 days after immunization, the spleens of the mice were obviously enlarged evidently. NKC activity and the proliferation of spleen T ly mphocytes seen on MTT assay were higher in pcROP1 group than in the controls. T he number of CD4(+) T cells exhibited no obvious increase compared with that of the control, but CD8(+) T cells were obviously increased (P&lt;0.05). At 90 d ays after vaccination, the titer of IgG antibody in the serum of vaccinated mice was positive (1∶100).Conclusion pcROP1 was constructed and it could elicit both cellular and humoral immune r esponses in immunized mice.     

紫外线减毒日本血吸虫尾蚴免疫小鼠的皮肤组织细胞反应

目的 :探讨紫外线减毒血吸虫尾蚴免疫宿主的皮肤组织在抗攻击感染中的作用。方法 :88只小鼠分为 4组 ,1、2组分别以 50± 3条紫外线减毒日本血吸虫尾蚴免疫或日本血吸虫尾蚴感染 ,5wk后以 10 0 0± 10 0条尾蚴进行攻击感染 ;3、4组分别以减毒尾蚴或尾蚴 10 0 0± 10 0条免疫或初次感染。各组均于感染或接种后 6- 12 0 h定时取局部皮肤组织作病理观察。结果 :( 1)免疫攻击组皮肤组织内炎症细胞杀伤童虫现象最明显、炎症反应最强且持续时间最长 ,嗜酸性粒细胞( EOS)浸润百分数最高 ;( 2 )感染攻击组呈现相似炎症反应但程度略轻 ;( 3)免疫对照组减毒童虫在皮肤内滞留时间延长 ,至 12 0 h皮下仍可见较多童虫 ;( 4 )感染对照组皮肤内的童虫数于 72 h后明显减少 ,童虫周围轻微炎症反应。电镜观察可见免疫攻击组童虫内部结构破坏 ,虫体周围 EOS、淋巴细胞增多 ,肥大细胞颗粒溶解。结论 :提示皮肤组织的细胞免疫反应在血吸虫减毒尾蚴免疫的宿主抗攻击感染保护性免疫中起重要作用。     

肥大细胞Toll样受体4在人慢性牙周炎牙龈组织中的表达

 目的：观察人慢性牙周炎牙龈组织中肥大细胞Toll样受体4（Toll-like receptor 4, TLR4）的表达,并探讨其在牙周炎发病中的可能作用。方法: 将68例自愿接受本研究的牙周炎患者按照牙周炎的病变程度分成3组：轻度牙周炎组（23例）、重度牙周炎组（25例）和正常对照组（20例）。取牙龈组织标本,4%中性甲醛液固定48 h以上。制作牙龈组织的连续切片,HE染色,光学显微镜下观察各实验组牙龈组织的组织学改变;免疫组化法染色观察各实验组牙龈组织TLR4的表达;免疫荧光双染色法观察TLR4在肥大细胞中的表达。结果： (1)与正常对照组相比,各慢性牙周炎组牙龈组织中TLR4的表达及TLR4在肥大细胞中的表达均显著升高（P<005）;(2)重度牙周炎组牙龈组织中TLR4表达的数量及TLR4在肥大细胞中的表达明显高于轻度牙周炎组（P<005）。结论：TLR4在牙龈组织中的表达及在肥大细胞中的表达量随着牙周炎的炎症程度加重而增加,提示TLR4,特别是肥大细胞TLR4可能在慢性牙周炎的发病和疾病进程中起着重要的作用。     

肥大细胞脱颗粒在牙周炎病理中的作用

目的:探讨肥大细胞脱颗粒在牙周炎病理中的意义。方法:将自愿接受研究的受试者分为3组:轻度慢性牙周炎组(轻度组,17例)、重度慢性牙周炎组(重度组,18例)、正常对照组(15例)。取牙龈活检组织制作连续切片,HE染色在光镜下观察各组牙周组织的组织学改变;甲苯胺蓝染色法观察各组肥大细胞的数量及肥大细胞脱颗粒状况;天狼猩红染色法观察各组牙周组织纤维化的程度。结果:与正常对照组相比,各慢性牙周炎组的牙周组织中肥大细胞显著增多(P<0.01);重度组与轻度组相比较肥大细胞数量和脱颗粒率均明显升高(P<0.01),牙周组织纤维化程度更加严重(P<0.05)。结论:肥大细胞的募集、脱颗粒和纤维化程度与牙周炎的严重程度相关,提示肥大细胞可能在牙周炎的发病和疾病进程中起着重要的作用。     

用150和500Cy照射的血吸虫尾蚴疫苗模型的比较:攻击后150Gy剂量产生更强的保护力、较小的肝脏体积和较高的γ干扰素水平

作者比较了两种不同剂量γ-射线照射的曼氏血吸虫尾蚴免疫小鼠后,其抗曼氏血吸虫的保护性及免疫反应的差别。用雌性C57BL/6J小鼠,每组15只,经腹部分别用     

Immunity induced by DNA vaccine of plasmid encoding the rhoptry protein 1 gene combined with the genetic adjuvant of pcIFN-γ against Toxoplasma gondii in mice

Objective To construct the eukaryotic expression recombinant plasmid, pcIFN-γ, as a gene tic adjuvant and observe the immune responses elicited by pcDNA3-rhoptry protei n 1 （pc-ROP1） combined with pcIFN-γ against Toxoplasma gondii (T.go ndii) infection in mice.Methods A fragment of the IFN-γ gene was directly inserted into the pcDNA3 plasmid and identified by two restriction endonucleases digestion.pcIFN and pcROP1 DNA wa s injected into the left leg muscle of mice at a dosage of 100 μg, and a boost er vaccination was given at the same dosage after two weeks.Control groups wer e injected with pcDNA3 blank plasmid or normal saline.At 30, 50 and 70 days af ter booster injection, kinetic tests were carried out: MTT assay for the prolife ration response of T lymphocyte cells and the activity of NK cells, sandwich ABC -ELISA for the determination of IFN-γ, IL-2 and IL-10; a serum enzymetic aa ssay for nitric oxide (NO) in sera and ELISA for the titer of IgG antibody in sera.Results The recombinant plasmid, pcIFN-γ was constructed.The proliferation response of spleen T lymph cells, NK cell killing activity, and serum levels of IFN- γ, IL-2 and NO in mice injected with pcROP1 and pcIFN-γ were higher than in those injected with pcROP1 alone.There was no difference in IgG antibody level s between the two groups. Conclusion The genetic adjuvant, pcIFN-γ, could enhance the cellular immune response indu ced by DNA vaccine of pcROP1 in mice against Toxoplasma gondii infection.     

紫外线减毒日本血吸虫尾蚴免疫小鼠的细胞免疫应答和细胞因子的动态变化

目的 :检测细胞免疫在血吸虫疫苗保护性免疫中的作用。方法 :用紫外线减毒日本血吸虫尾蚴 300±5条免疫小鼠及日本血吸虫尾蚴 25±3条感染小鼠。于第 2wk、4wk、8wk和 12wk分别用血吸虫成虫抗原(SWAP)、虫卵抗原 (SEA)及丝裂原(ConA或LPS)体外刺激脾细胞和腹腔巨噬细胞(Mφ),观察脾淋巴细胞的增殖反应及 Mφ产生 IL- 1和脾细胞产生 IL- 2的活性的动态变化。结果 :两组鼠的脾细胞于免疫或感染后2wk- 8wk经 SWAP或 SEA刺激 T淋巴细胞增殖反应显著增强,第12wk呈现明显抑制;免疫组的Mφ和脾细胞经SWAP或SEA 刺激于接种后第4wk IL-1 和IL-2 活性均显著增高, 感染组的Mφ和脾细胞经SWAP 刺激IL-1 于第8wk-12wk活性增高、IL-2 于第12wk 活性增高。结论: 提示减毒尾蚴免疫接种能较早地激活T 细胞增殖和细胞因子产生, 在血吸虫保护性免疫中起重要作用。     

我国山丘、平原疫区利什曼原虫分离株kDNA分析

为鉴别我国山丘、平原疫区杜氏利什曼原虫分离株，采用内切酶AluⅠ对其kDNA进行酶切。结果显示实验各株均有500bp片段；L．d．汶川人株、L．d．四川人株、L．d．甘肃人株（GS2）、L．d．四川犬株、L．infantum及L．d．Jeddah具有210bp片段；L．d．四川人株、Ld．甘肃人株（GS2）及L．d．四川犬株具有120bp片段；L．d．汶川人株、L．d．甘肃人株（GS2）和L．d．四川犬株具有400bp和280bp片段。L．d．甘肃犬株也具有400bp片段；L．infantum和L．d．Jeddah具有280bp片段。提示山丘疫区不同分离株的kDNAAluⅠ酶切片段相近，其中人株与犬株的相似；山丘疫区分离株与平原疫区分离株的酶切片段之间有较大差异，山丘疫区分离株与L．infantum的酶切片段之间既有相似又有差异。