环氧化酶-2与1型糖尿病

1型糖尿病是以胰岛β细胞破坏为特征，细胞因子对胰岛β细胞损伤在其发病中起重要作用。细胞因子诱导环氧化酶(CPX)-2表达，导致前列腺素E2水平增高，后者对胰岛β细胞发挥细胞抑制和毒性效应，造成了β细胞损害。研究还发现COX-2基因的高水平表达与糖尿病并发症的发生关系密切。对胰岛β细胞损伤过程中COX-2参与机制的研究可能为1型糖尿病的防治提供新的措施。     

卫氏并殖吸虫成虫重组抗原的表达与鉴定

目的 表达已转化入大肠杆菌的卫氏并殖吸虫成虫抗原(PwAg)基因，并评价其应用于免疫学诊断的价值。方法 用IPTG诱导表达已亚克隆人表达载体pRESETB的卫氏并殖吸虫成虫抗原基因，以SDS—PAGE和Westernblot分析鉴定表达产物。结果 SDS-PAGE电泳可见32ku处有1条明显的蛋白质带，该带只被卫氏并殖吸虫成虫免疫兔、感染犬和病人血清识别。结论 成功构建重组克隆PwAg，其表达产物具有卫氏并殖吸虫成虫期特异性，推测可用于并殖吸虫病的免疫学诊断。     

卫氏并殖吸虫基因片段的亚克隆及其表达的研究

目的：获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原，以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法：将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切，所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB，经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达，以聚丙烯凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹法（Western blotting)对表达产物进行鉴定。结果：成功地将文库中2个大小不同的卫氏并殖吸虫基因片段连接到载体中，其中Pw-2重组子特异性表达产物是分子质量约为32ku的蛋白带，可被卫氏并殖吸虫免疫免血清特异性识别。结论：成功构建了编码卫氏并殖吸虫特异性抗原的重组克隆Pw-2。     

维生素A治疗烧伤病人的疗效观察

烧伤后补给维生素Ｃ已成常规 ,而补给维生素Ａ(ＶｉｔＡ)不常用。近年来的研究结果指出 ,维生素Ａ与创伤愈合密切相关 ,可降低体内自由基 ,提高免疫功能 ,促进胶原蛋白的合成 ,有利于创面或伤口愈合 ,但每天补给应适量。我们从 1996年以来对 2 6例中度以上烧伤患者进行临床观察 ,现报告如下。对象与方法一、对象 :2 6例中男 15例 ,女 11例 ,年龄 14～4 7岁 ,烧伤面积 2 0 %～ 85 %。中度烧伤 8例 ,重度10例和特重度 8例。二、观察指标 :病人入院后 (一般伤后 3天内 )在未补给ＶｉｔＡ以前检测血清中ＶｉｔＡ ,免疫球蛋白含量及血液淋巴细胞…     

虚拟实验对生物化学实验教学的补充和发展

信息及多媒体技术深刻影响了高等医学教育，虚拟实验将很大程度地弥补了传统实验教学的不足，对于深入理解生物化学与分子生物学实验的微观机制，扩展学生对该学科的了解，对生物化学实验教学的发展起到推动作用。     

卫氏并殖吸虫基因片段的克隆与鉴定

目的从卫氏并殖吸虫成虫cDDA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法采用预吸收成虫抗原免疫兔血清(IRS,多抗)筛选阳性克隆,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。序列分析后,对筛选的重组子进行双酶切,亚克隆入表达载体pRESETB,并转化大肠杆菌BL-21细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Westernblotting分析鉴定。结果所筛选的阳性克隆插入片段约800bp。DNA序列分析显示其为编码半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L的基因序列。Pw-2重组子特异性表达产物约为32kDa,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异地识别。结论从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库筛选的重组质粒Pw-2编码属于半胱氨酸蛋白酶族组织蛋白酶L。     

高活性α-淀粉酶的分离与纯化

目的研究高活性α-淀粉酶分离与纯化的新方法。方法运用吸附树脂和离子交换的方法,分离纯化α-淀粉酶。结果吸附树脂分离纯化所得α-淀粉酶的活性约为60000U/g,DEAE-纤维层析所得α-淀粉酶的活性在吸附树脂法的基础上提高了约1倍。结论该方法分离纯化α-淀粉酶简便,成本低,便于工业化生产。     

卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库的单抗筛选

目的　从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定出可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法　采用预吸收的抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选多次后得到 5个阳性克隆 ,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。其中 3个克隆测定其DNA序列 ,用BLAST软件对所得DNA序列进行同源性比较。结果　得到 1,2 ,4三个不同阳性克隆 ,其长度分别为 1783bp、397bp和 1132bp ,分别与卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白 (P wyolkferritin)基因、鞘脂激活蛋白A(DictyosterliumdiscoideumsaposinA)基因和曼氏血吸虫主要卵抗原 (Smmajoreggantigen -P4 0 )基因同源。 结论　本研究首次报道用抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库 ,所获克隆1、2、4可能系肺吸虫免疫诊断和预防的相关基因     

1型糖尿病防治新方法：构建COX—2 siRNA表达载体阻断COX—2基因表达

目的：构建具有特异性阻断环加氧酶2(cyclooxygerase—2，COX—2)基因功能的siRNA表达系统，为1型糖尿病的防治提供新的方法。方法：根据Genbank提供的mRNA序列，应用siRNA设计软件设计特异性的短链寡核苷酸，化学合成后经退火形成双链siRNA片段，克隆到pSilencer^TM 1．0—U6 siRNA载体中，用酶切方法和测序法对重组体进行鉴定；最后将构建的COX—2 siRNA表达载体转染胰岛细胞，观察其对细胞COX—2基因表达的影响。结果：酶切和序列测定表明，成功构建了COX—2 siRNA表达载体，COX—2 siRNA能够抑制细胞内COX—2的表达。结论：本研究构建的COX—2 siRNA表达载体，具有阻断COX—2基因表达的功能，为胰岛β细胞功能保护的研究和1型糖尿病的早期防治提供了有效的方法和手段。