胰腺癌治疗的循证医学

近年来,在恶性肿瘤5年生存率排行榜上,胰腺癌上升为＂癌中之王＂。据美国国立卫生研究院报告,胰腺癌的5年生存率仅为3%,而我国外科研究报告显示,5年总体生存率在1%以下,预后极差。要提高胰腺癌患者的生存率,关键在于早期发现,早期治疗。目前手术切除是临床上治疗胰腺癌最好的方法,     

rAAV-Slug-siRNA载体的构建及其抗胰腺 癌的实验

 目的构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA（Slug-siRNA）病毒载体,探讨Slug干扰抗 胰腺癌作用。方法首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆 为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切回收PCR产物; 酶切pSNAV2.0-lacz-α载体质粒, 并与上述产物进行连接;转化感受态大肠杆菌DH5α,得到重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,酶切和测 序对其进行鉴定。建立载体细胞株BHK/Slug-siRNA, 大规模制备rAAV2-EGFP-Slug-siRAN并对其纯化、鉴 定和滴度测定。将体外培养的胰腺癌细胞株AsPC-1转染Slug-siRNA和pSNAV2.0-EGFP空载体。Western blot及RT-PCR方法鉴定转染前后AsPC-1细胞内PUMA及Slug蛋白及mRNA表达,MTT比色法检测细胞存活率, TUNEL检查细胞凋亡。结果携带编码靶向Slug的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0- EGFP-Slug-siRNA,经PCR、酶切和测序鉴定,质粒构建正确。将构建成功的载体质粒与重组Ⅰ型单纯疱疹 病毒HSV1-rc/ΔUL2共转染包装细胞BHK-2,成功复制和包装出重组腺相关病毒Slug-siRNA,经检测目的片 段插入成功,滴度为9.23×1010(puf)。Slug-siRNA有效抑制AsPC-1细胞内Slug表达,抑制体外细胞增殖 ,促进细胞凋亡,同时,伴随着Slug表达的下降,细胞内PUMA表达明显增加。结论成功制备出高滴度携带 目的基因的Slug-siRNA病毒载体。干扰Slug表达抑制胰腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能通过解 除Slug对PUMA基因的抑制有关。     

肥胖对晚期胃腺癌患者术后结局的影响研究

目的观察晚期胃腺癌患者术中及术后的相关指标,探讨肥胖对患者术后结局的影响。方法回顾性分析近5年于某院实施手术治疗的226例晚期胃腺癌患者的临床资料,根据体重指数(BMI)将胃腺癌患者分为非肥胖组和肥胖组,非肥胖组134例患者BMI﹤25,肥胖组92例患者BMI≥25,两组患者均行胃腺癌根治术,观察记录两组术的中出血量、手术时间、肛门排气时间、术后并发症、术后引流量、住院死亡率及随访记录患者一年生存率。结果 BMI﹤25组与BMI≥25组患者的肛门排气时间、住院死亡率、一年生存率对比差异无统计学意义(P﹥0.05);BMI﹤25组的术中出血量、手术时间、术后引流量、术后并发症分别为(223.2±136.6)ml、(158.1±57.9)min、(281.5±174.6)ml、11.2%,BMI≥25组分别为(266.9±170.1)ml、(188.2±79.7)min、(348.0±209.3)ml、21.7%,P﹤0.05。结论肥胖对于患者术后的住院死亡率及一年生存率等短期结局无明显影响,不改变晚期胃腺癌患者的术后结局。     

Slug在胰腺癌中的表达及干扰Slug对胰腺癌转移的影响

目的 探讨Slug和E-CADHERIN(E-cadherin)表达与胰腺癌转移的关系以及干扰Slug转录因子对胰腺癌转移的影响.方法 采用免疫组化和RT-PCR技术分别检测36例胰腺癌组织中Slug、E-cadherin和mRNA表达.将肝脏高转移潜能的胰腺癌细胞株SW1990H4,分为3组:对照组、空载体质粒(shRNA-1)和转染干扰S1ug质粒(Slug-shRNA-1),观察Slug对E-cadherin mRNA表达的逆转作用,及对SW1990H4体外侵袭、运动的抑制作用.结果 胰腺癌组织中Slug高表达,而E-cadherin低表达.转移组胰腺癌组织中Slug蛋白和mRNA表达明显高于非转移组,差异分别有统计学意义(P＜0.05),而E-cadherin在转移组胰腺癌中无表达.PCR产物凝胶电泳结果显示,Slug mRNA在空白对照组SW1990H4中表达为0.985±0.016,E-cadherin mRNA表达为0.120±0.001.shRNA-1时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.973±0.014,E-cadherin mRNA表达水平分别0.160±0.001,与对照组比差异分别无统计学意义(P＞0.05).转染Slug-shRNA-1组瞬时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.554±0.011,E-cadherin mRNA表达水平为0.36±0.002,与对照组和shRNA-1组比差异分别有统计学意义(P＜0.05).SW1990H4稳定转染后,shRNA-1和Slug-shRNA-1组Slug mRNA表达水平分别为0.968±0.015,0.206±0.017,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),而E-cadherin mRNA表达水平分别为0.18±0.002,0.727±0.006,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).体外细胞运动实验表明,对照组、转染shRNA-1和SlugshRNA-1组跨膜细胞数393±28、352±24、96±13,差异有统计学意义(P＜0.01).重组细胞基底膜(Matrige1)侵袭实验显示,3组穿透基底膜细胞数分别为223±69、202±64、65±19,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Slug高表达,E-cadherin低表达与胰腺癌的转移相关.胰腺癌细胞中存在Slug mRNA与E-cadherin mRNA表达的逆转关系,抑制Slug mRNA的表达对胰腺癌细胞的侵袭和运动有抑制作用,可能为胰腺癌转移的基因治疗提供新的靶点.

Abstract：

Objective To investigate expression of slug and E-cadherin in pancreatic cancer tissues and determine the inhibitory effects of anti-Slug, an anti-sense plasmid, on the invasion of pancreatic cancer cell lines in vitro. Methods Slug and E-cadherin protein and mRNA was analyzed by IHP and RT-PCR in 36 cases of pancreatic cancer. Then anti-Slug plasmid was transfected into herin and Slug expression. The inhibitory effects of anti-sense Slug were also detected by Transwell motility assay and Matrigel invasion assay. Results The expression of Slug and mRNA in metastatic pancreatic cancer tissue was higher than that in non-metastatic tissue. E-cadherin and mRNA was lower in metastasis tissues(P＜0.05). The inverse relationships were further observed by transient transfection of anti-Slug into SW1990H4 cells. The downregulated expression of Slug and re-expression of E-cadherin were found. The Slug mRNA levels were 0.985±0.016,0.973±0.014, 0. 554±0. 011 after 0, 48 h of transfection of anti-sense Slug, and that of E-cadherin were 0.120±0.001, 0.360±0.002, 0. 727±0. 006, respectively. The diference was significant between different time points (P＜0.05). The Slug mRNA levels were 0. 206±0.017, 0.968±0.015, and that of E-cadherin were 0. 18±0.002,0.727±0.006 after stable transfection of anti-sense Slug, and control plasmid, respectively. The diference was significant (P＜0.05). The motility activity(393±28, 352±24, 96 ±13 )and the invasion activity (223 ± 69, 202 ± 64, 65 ±19) of1 antisense Slug transfectant cells were significantly decreased as compared with those of control cells (P＜0.05). Conclusions Higher expression of slug and lower expression of E-cadherin is related to the invasion and metastasis in pancreatic cancer. A reverse corelation of E-cadherin and Slug expression exists in pancreatic cancer. Slug is possibly a potential target for cancer gene therapy blocking invasion and metastasis in human pancreatic cancer.     

腹部无切口腹腔镜低位直肠癌前切除经肛门取出标本的临床分析

目的探讨腹部无辅助切口腹腔镜低位直肠癌前切除经肛门自然腔道取出标本的临床应用价值。方法选取2013年1月至2015年6月接受腹腔镜直肠癌手术的94例患者进行回顾性分析,其中27例患者采用经肛门自然腔道取出标本的无腹部切口腹腔镜低位前切除术治疗(无切口组)、67例采用腹腔镜辅助直肠前切除术治疗(常规组),数据分析采用SAS10.0软件处理,围手术期指标、疼痛程度评分采用均数±标准差(x珋±s)表示,组间比较采用t检验;手术并发症发生率采用百分率进行统计描述,比较采用χ2检验;P值0.05表示差异有统计学意义。结果无切口组患者的手术时间、手术出血量、胃肠道功能恢复时间、住院时间、住院费用均显著的低于常规组患者;术后12、24、48 h,无切口组患者的疼痛程度评分均显著的低于常规组患者,差异均具有统计学意义(P0.05);清扫淋巴结数目和手术并发症,两组差异不具有统计学意义(P0.05)。结论经肛门自然腔道标本取出的无切口腹腔镜低位前切除术治疗低位直肠癌效果可靠,手术创伤小、术后患者恢复快。     

免辅助切口自制套管器在腹腔镜辅助降结肠癌根治术中的临床应用价值

目的探讨免辅助切口自制套管器在腹腔镜辅助降结肠癌根治术中的临床应用价值。方法选取2014年1月至2015年6月接受免辅助切口腹腔镜降结肠癌根治术治疗的6例患者进行总结分析,所有患者在免辅助切口全腹腔镜降结肠癌手术后,标本均经过自制套管器经肛门取出,对手术情况、并发症及术后效果进行回顾性分析。结果 6例患者均顺利完成手术,无中转开腹患者;手术时间299~326 min,平均手术时间(306.4±8.5)min;术中出血量46~85 ml,平均手术出血量(63.0±15.3)ml;清扫淋巴结12~15枚,平均(14±1.0)枚;切除标本大小2.8cm×2.2 cm×1.3 cm~3.2 cm×2.6 cm×1.8 cm;术后下床活动时间17~28 h,平均(23.8±4.0)h;术后肛门排气时间2~4 d,平均(3.1±0.6)d;术后第4~5天患者开始进食流质饮食。所有患者均未出现吻合口漏、腹腔感染、肠道狭窄等并发症;术后随访时间6~12个月,患者排便功能正常,未出现复发、转移及死亡患者。结论免辅助切口自制套管器在腹腔镜辅助降结肠癌根治术中具有实用的临床价值,手术安全、效果可靠。     

少见急性肠梗阻的临床分析与策略

目的:了解少见急性肠梗阻的临床特征,为制订诊疗对策提供参考依据.方法:利用SPSS12.0统计软件包,回顾性分析我院2002.01/2006-08少见急性肠梗阻(病因构成比<3.0%)发病情况及诊治情况,病例分成3组:儿童组(0岁-,组Ⅰ),青少年与成年组(14岁-,组Ⅱ)和老年组(60岁-,组Ⅲ).结果:在338例急性肠梗阻病例中,少见急性肠梗阻是122例(36.1%).在少见急性肠梗阻中:男94例(77.0%),女28例(23.0%),病因36种(急性肠梗阻总病因数是41种),组Ⅰ31例患者,13种病因:组Ⅱ62例,26种病因:组Ⅲ29例,14种病因.组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ患者就诊时间分别为:2.3±1.5 h,60.0±43.2 h和84.0±67.2 h,有显著性差异(P=0.000);组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ患者急性生理和慢性健康评分(APACHEⅡ)分别为:2.5±1.8分,5.5±3.6分和17.8±5.8分,有显著性差异(P =0.000),3组患者的总手术治疗率为65.6%,病死9例,病死率为8.0%,组Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ患者治愈率分别为100.0%,95.0%和79.3%,差异有显著性(P=0.000).结论:少见急性肠梗阻诊断困难,易延误治疗时机而造成高病死率;病情(局部病变与全身状况)的准确判断和有效的治疗(手术治疗与非手术治疗)是少见急性肠梗阻诊治的关键.     

小肠损伤临床诊治分析

小肠损伤在腹部损伤中是较常见，多发的疾病，但有些损伤后临床表现的隐袭性及缺少高敏感度的诊断方法，常给临床诊断带来困难，导致延误诊断和处理不当，危及病人生命或造成难以弥补的后果，故早期诊断是提高本病治疗效果的关键。为了提高认识，将我院1995年6月-2005年6月收治的46例小肠损伤病人进行分析，报告如下。     

影响甲状腺切除术后恶心呕吐综合征发生的相关因素分析

目的 探讨甲状腺切除术后恶心呕吐综合征(SPNV)发生的相关危险因素.方法 回顾性分析2005年7月～2010年9月于该院行甲状腺切除术患者180例的临床资料,对可能影响患者术后发生恶心呕吐综合征的相关因素进行分析.结果 SPNV组和未发生SPNV组患者性别、有无吸烟史、手术时间、术前适应训练、麻醉方式及椎动脉血流动力学改变间比较,差异具有显著性(P＜0.05).Logistic回归分析结果发现性别、有无吸烟史、术前适应训练、麻醉方式及椎动脉血流动力学变化(左侧△fV和右侧△fV)是影响SPNV发生的独立危险因素.结论 性别、有无吸烟史、术前适应训练、麻醉方式及椎动脉血流动力学变化(左侧△fV和右侧△fV)是影响SPNV发生的独立危险因素.     

骶尾部脊索瘤11例的临床特征与治疗

目的：探讨骶尾部脊索瘤的临床特征与治疗方案。方法：分析１１例脊索瘤的临床表现、Ｘ线与病理组织学资料,总结诊治要点。结果：术后全组五年生存率为４５．５％,根治切除组为５５．６％。结论：手术切除加术后放疗为最佳治疗方法。