腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎

目的：观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子（major histocompatibility complex class Ⅱ molecules）反式激活因子突变体（CⅡTAm）基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis, EAT)的效果，并探讨其可能的作用机制。方法：31只健康雌性CBA/J小鼠随机分成EAT模型组(n=8)、CⅡTAm治疗组（n=9）、GFP对照组（n=9）和正常对照组（n=5）。除正常对照组不作特殊处理外，其余3组均以猪甲状腺球蛋白（porcine thyroglobulin, pTg)+弗氏佐剂（complete or incomplete Freund adjuvant, CFA/IFA)建立EAT小鼠模型，CⅡTAm治疗组和GFP对照组分别静脉注射重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm及Ad-GFP进行治疗，EAT模型组注射等量生理盐水。首次免疫后第29日处死小鼠，进行H-E染色观察甲状腺病理形态；免疫组织化学染色测定甲状腺MHC Ⅱ类分子表达；分析pTg刺激下脾脏淋巴细胞的增殖及其上清液中IFN-γ的分泌水平；ELISA法检测血浆中抗-pTg自身抗体滴度；流式细胞术分析外周血和脾脏淋巴细胞中CD4+ T淋巴细胞上可诱导共刺激分子（inducible costimulator,ICOS）的表达水平。结果：H-E染色结果表明，CⅡTAm治疗组甲状腺淋巴细胞浸润指数（0.3±0.5）低于EAT模型组(1.4±0.4)和GFP对照组(1.5±0.2，P<0.01）。免疫组化结果显示，EAT模型组和GFP对照组甲状腺组织有弥漫性MHC Ⅱ类分子表达，而CⅡTAm治疗组未见明显表达，正常对照组表达呈阴性。80 μg/ml pTg刺激下，CⅡTAm治疗组小鼠淋巴细胞刺激指数（SI）明显低于EAT模型组或GFP对照组（P<0.05）；培养上清各组IFN-γ分泌水平与SI结果类似（P<0.01）。CⅡTAm治疗组血浆抗-pTg自身抗体滴度显著低于EAT模型组或GFP对照组（P<0.01）；CⅡTAm治疗组外周血和脾脏CD4+ T细胞ICOS分子阳性表达率亦显著低于EAT模型组或GFP对照组（P<0.01）。结论：重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm能抑制EAT小鼠甲状腺组织MHC Ⅱ类分子表达，抑制自身反应性T细胞增殖，减轻甲状腺炎性细胞浸润，降低自身抗体滴度，对EAT有一定的治疗作用。     

稳定表达可诱导共刺激分子CHO细胞株的筛选及其生物学活性鉴定

目的:构建携带人可诱导共刺激分子(inducible costimulator molecule,ICOS)基因的重组逆转录病毒载体,筛选稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株,并对其生物学活性进行鉴定.方法:RT-PCR法从人PBMC中获取ICOS cDNA,定向克隆到逆转录病毒载体上,制备逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS;经病毒包装细胞包装后抗性筛选出产高滴度病毒的细胞株,用高滴度病毒上清感染CHO细胞,抗性筛选出稳定表达细胞株.将CHO-ICOS细胞和PBMC以不同比例(1:1、1:2、1:5、1:10)共培养,加入亚刺激剂量(200 ng/ml)的抗人CD3抗体,采用3H-TdR掺入法检测PBMC的增殖,流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD25表达情况,并以CHO-pMSCV细胞和PBMC以 1:1比例共培养作为阴性对照以及未处理的PBMC作为空白对照.结果:成功构建逆转录病毒重组体pMSCV-ICOS,筛选出稳定表达ICOS蛋白的CHO细胞株.3H-TdR掺入法和流式细胞仪检测结果表明,与阴性对照及空白对照相比,CHO-ICOS细胞与PBMC共培养能抑制CD3抗体诱导的PBMC增殖及活化(P＜0.05或P＜0.01),细胞比例为1:1时抑制率最大,分别为(68±5.9)%、(44.08±3.26)%.结论:成功建立具有生物学活性的膜稳定表达人ICOS蛋白的CHO细胞株,为今后研究奠定了基础.     

某部液体推进剂作业人员生理指标分析

偏二甲肼(uDMH)和四氧化二氮(N2O4)是目前大型火箭的主要推进剂,在卫星发射和导弹发射领域应用广泛.它们是具有中等毒性的军事工业毒物,可通过呼吸道、胃肠道和皮肤吸收引起中毒,使多个系统发生功能障碍甚至器质性损伤[1].为此,我们以长期接触UDMH和N2O4的某部推进剂作业人员为对象,检测多项生理指标,以评估长期推进剂作业对人体的潜在危害,进一步为这一特殊群体提高防护水平提供依据.     

某部液体推进剂作业人员生理指标分析

偏二甲肼(uDMH)和四氧化二氮(N2O4)是目前大型火箭的主要推进剂,在卫星发射和导弹发射领域应用广泛.它们是具有中等毒性的军事工业毒物,可通过呼吸道、胃肠道和皮肤吸收引起中毒,使多个系统发生功能障碍甚至器质性损伤[1].为此,我们以长期接触UDMH和N2O4的某部推进剂作业人员为对象,检测多项生理指标,以评估长期推进剂作业对人体的潜在危害,进一步为这一特殊群体提高防护水平提供依据.     

两台凝血分析仪检测结果的可比性研究

目的：探讨不同型号凝血分析仪检测凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）的结果是否具有可比性。方法随机选取40例患者新鲜血浆,分别在ACLTOP与ACLTOP700血凝分析仪上检测PT、APTT、FIB、TT,对结果进行比较分析。结果两凝血分析仪4个检测项目结果的相关系数（r）均大于0．975,各项结果的偏倚均在CLIA′88规定的允许误差范围内。结论ACLTOP与ACLTOP700血凝分析仪检测PT、APTT、FIB、TT的结果具有可比性,符合临床要求。     

UriSed尿沉渣分析仪的临床应用评估

目的对UriSed尿沉渣分析仪的临床应用进行评估。方法随机收集患者新鲜中段尿液标本,使用UriSed尿沉渣分析仪对尿液有形成分进行分析,评价分析仪的图像合格率、标记率、标记正确率、重复性、线性、互染率,并比较其与UF500尿沉渣分析仪对低值细胞的检出符合率。结果图像合格率为98.23%。有形成分标记率为:病理管型(100%)、白细胞(82.5%)、红细胞(74.7%)、小圆上皮细胞(73.6%)、上皮细胞(64.1%)、真菌(54.1%)。有形成分的标记正确率为:小圆上皮细胞(100%)、白细胞(99.9%)、上皮细胞(99.5%)、真菌(98.1%)、红细胞(97.4%)、病理管型(1.5%)。高、中、低水平白细胞尿标本的变异系数依次为:4.68%、3.45%、4.48%。分析仪对低值白细胞的具有良好的线性关系,但对低值红细胞的检测线性欠佳。测定白细胞的互染率为0。UriSed与UF500对100/L白细胞的检出符合率为97.4%,对100/L红细胞的检出符合率为96.8%。结论除对低值红细胞检测的线性关系不佳之外,UriSed尿沉渣分析仪主要指标能满足临床应用要求。     

运用最小二乘法预测某院年度门急诊量

目的 通过某院2009-2014年的实际门急诊量变化趋势,预测2015年的门急诊量,为合理配置门急诊医疗卫生资源提供科学依据.方法 利用最小二乘法建立直线回归方程,预测门急诊量.结果 预测方程为=33.89+ 17.36t.结论 通过对门急诊量的预测,着力提升门急诊建设质量,为医院管理决策者提供科学依据,优化配置卫生资源,努力构建流程优化、效益明显、高度集成的医疗体系.     

2型糖尿病中同型半胱氨酸、VitB12、叶酸检测的意义

2型糖尿病(DM2)是一种全身性代谢性疾病,心、脑、肾、视网膜及外周血管疾病并发症是DM2患者致残、致死的主要原因。应早期判断并发症,及时控制和预防。同型半胱氨酸(HCY)是蛋氨酸循环的中间产物,代谢需要VitB12和叶酸(FA)作为辅酶。近年来,大量国内外资料表明[1],HCY是心脑     

非洲归国人员疟原虫感染1例

1 病历摘要 男,43岁.于2009年到非洲工作,同年11月回国后一直居住北京,2010-03-18因发热到我院就诊,高热达40 ℃,反复发作.查血常规:WBC 5.25×109/L,RBC 4.67×1012/L,Hb 138 g/L,PLT 85×109/L,N 0.643,L 0.229,M 0.124,进行普通抗生素输液治疗3 d,效果不佳,仍反复高热.2010-03-21申请疟原虫检查,静脉血涂片经刘氏染色后,在显微镜下可见血片上红细胞中有多期疟原虫,包括环状体(胞质少、成环状、胞核成点状)、大滋养体(胞质增多、伸出伪足、胞核增大、被寄生的红细胞体积胀大、颜色变浅、出现虐色素)、裂殖体(染成深蓝色、多个裂殖体聚集成堆、红细胞内有褐色的疟疾颗粒)、雌配子体(圆形、占满胀大的红细胞、染色较深、核小而结实),其中大多数为环状体.因此确诊为疟原虫感染,随后建议患者到传染病医院进行医治.