硼替佐米对多发性骨髓瘤患者破骨细胞生成的影响及机制研究

目的:观察多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者破骨细胞在体外诱导分化成熟过程中,硼替佐米(Bortezomib,Btzmb)对其分化和功能的影响,以及破骨细胞分化过程中上游关键信号分子肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的改变.方法:患者外周血单个核细胞在经核因子KB受体活化因子配体(receptor activator of NF-kB ligand,RANKL)及巨噬细胞集落刺激因子(macmphage colony stimulating factor,M-CSF)诱导后向破骨细胞分化过程中,采用不同剂量的Btzmb进行处理,观察抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrateresistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性的破骨细胞数量,检测培养液中的TRAP活性,并观察骨片上骨陷窝数量的变化.采用Westem印迹和RT-PCR法,分析Btzmb对破骨前体细胞中TRAF6蛋白和mRNA的影响.结果:2.5和5 nmol/L Btzmb组破骨细胞数量分别为(157±21)和(98±15)个,较对照组(307±25)明显减少(P均＜0.05),骨陷窝形成数量分别为对照组的(53±24)%和(29±7)%(P均＜0.05),上清液中破骨细胞活性分别为对照组的(86±24)%和(60±25)%(P均＜0.05).破骨前体细胞经Btzmb处理后观察24 h,TRAF6蛋白活性逐渐降低,TRAF6 mRNA水平也有所下降.结论:Btzmb抑制MM患者破骨细胞的分化和功能,该作用可能与TRAF6有关.     

骨髓增生异常综合征骨髓胞内Y干扰素水平与T细胞亚群的关系

目的 :探讨骨髓 T细胞亚群的变化与淋巴细胞活化后产生胞内负调细胞因子 IFN- γ在骨髓增生异常综合征 (MDS)发病中的作用。方法 :应用流式细胞术及胞内细胞因子检测技术。结果 :MDS患者骨髓中 CD3 细胞明显高于正常人 ,主要是 CD8 细胞增多。细胞比值 CD8 / CD3 明显高于正常对照。细胞比值 CD4 / CD8 严重倒置。MDS骨髓中 CD3 细胞产生 IFN-γ的水平明显高于正常人 ,且主要是 CD8 细胞表达 IFN-γ增多。结论 :推荐使用该法检测骨髓 T细胞亚群胞内的 IFN- γ水平。     

骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞内负调控因子的研究

为研究MDS患者细胞凋亡与骨髓内不同T细胞亚群胞内负调控因子的关系，采用胞内细胞因子染色技术对骨髓内不同亚群T细胞胞内的TNF—α和IFN-γ水平进行检测和分析，用RT—PCR技术测定BMMNC的凋亡基因Fas的mRNA水平。结果表明，MDS患者骨髓内产生TNF-α增多的淋巴细胞为CD4^ CD45RO^ 、CD8^ CD45RO^ 细胞，产生IFN-γ增多的为CD4^ CD45RO^ 、CD8^ CD45RO^ 、CD8^ CD45RA^ 细胞，但均以CD8^ CD45RO^ 细胞为主；MDS患者T淋巴细胞产生的IFN-γ与Fas mRNA存在相关性，而TNF—α与Fas mRNA相关性不强。结论：MDS患者造血微环境中不仅T淋巴细胞亚群失调，而且各亚群分泌负调控因子增多；MDS患者髓内IFN-γ主要来自于T淋巴细胞。     

哌拉西林-他唑巴坦联合左氧氟沙星治疗重症社区获得性肺炎的疗效评价

目的评价哌拉西林-他唑巴坦联合左氧氟沙星治疗重症社区获得性肺炎（SCAP）的疗效及安全性。方法回顾性分析哌拉西林-他唑巴坦联合左氧氟沙星治疗55例SCAP的临床疗效。结果临床总有效率为81．8％,平均疗程11．8天,细菌清除率达73．1％,不良反应轻微,主要包括：胃肠不适、皮疹、兴奋及白细胞减少等,均经停药或对症处理后缓解。结论哌拉西林-他唑巴坦联合左氧氟沙星治疗SCAP临床疗效好,安全性高,可作为治疗SCAP的经验性用药。     

唑来膦酸盐对骨髓瘤细胞的增殖及CD138表达的影响

目的 研究唑来膦酸盐对体外培养的人多发性骨髓瘤细胞KM3生长增殖及CD138表达的影响.方法 采用锥虫蓝拒染法检测1×10-5mol/L、5×10-5moL/L、1×10-4mol/L、5×10-4mol/L、1×10-3mol/L唑来膦酸盐处理后的KM3细胞存活率,用流式细胞术分析不同浓度唑来膦酸盐作用下KM3细胞凋亡率及细胞周期的变化,并进一步检测KM3细胞表面CD138表达的改变.结果 在1×10-5mol/L～1×10-3mol/L的浓度范围内,唑来膦酸盐对KM3细胞生长增殖均有抑制作用,抑制效果与唑来膦酸盐浓度呈剂量依赖性.不同浓度的唑来膦酸盐能诱导细胞凋亡,使细胞明显阻滞于S期,且呈剂量依赖趋势.在唑来膦酸盐作用下CD138+细胞数及荧光强度均降低(P值均＜0.05).结论 唑来膦酸盐对KM3细胞具有增殖抑制作用,机制可能涉及诱导凋亡、细胞周期阻滞,也可能涉及影响CD138的表达.     

外周血单个核细胞诱导培养破骨细胞

目的：从人外周血单个核细胞诱导培养获得高产量高纯度破骨细胞，为破骨细胞的体外研究提供丰富的细胞来源。 方法：从外周血分离单个核细胞贴壁培养，采用0.25％胰蛋白酶／0.02％EDTA联合消化，纯化后以RANKL和M-CSF加以诱导(A组)，并与未经消化之传统方法（B组）比较。结果：与B组相比，A组可获得(1 426±204)个破骨细胞（P<0.05），0.25％胰蛋白酶／0.02％EDTA联合消化可使破骨细胞纯化率达90％。诱导生成的破骨细胞TRAP染色阳性，功能试验显示具有噬骨能力。结论：联合消化结合RANKL/M-CSF诱导培养法可产生大量的破骨样细胞，方法简便而且经济实用。     

益肺胶囊对COPD稳定期疗效及对SIRT1表达的影响

目的：观察益肺胶囊对 COPD 稳定期疗效及其对外周血 SIRT1蛋白的影响。方法：将本院70例 COPD 稳定期患者纳入研究,随机分为对照组和治疗组,各35例,对照组接受 COPD 常规治疗,治疗组在此基础上口服益肺胶囊,均接受为期3个月的治疗,疗程结束后比较肺功能变化、生活质量以及 SIRT1蛋白的变化。结果：1）治疗后2组肺功能及生活质量有明显提高（P ＜0.05）,其中治疗组提高的更为明显（P ＜0.05）。2）治疗后2组患者外周血单核细胞的 SIRT1蛋白均有所增加（P ＜0.05）,其中治疗组增加的幅度更明显（P ＜0.05）。结论：益肺胶囊可以减缓 COPD 病情进展,提高患者生活质量,其可能与增加外周血 SIRT1含量有关。     

表现为哮喘重度发作的气胸误诊15例分析

目的：分析哮喘样发作气胸的误诊特点,探讨防治对策。方法：回顾性分析误诊为哮喘重度发作的15例气胸患者的临床资料。结果：15例患者中14例被误诊,误诊率93.33%,平均误诊时间36.75 h。好转12例,死亡3例。结论：哮喘样发作气胸误诊率高,及早行X线检查和胸腔排气是诊治本病的根本。     

细胞色素酶CYP2C19介导的沙利度胺体外抗血管生成作用研究

本研究探讨人肝细胞微粒体代谢系统对治疗多发性骨髓瘤的沙利度胺体外抗血管生成的影响及细胞色素酶CYP2C19在其中的作用。采用沙利度胺原药或与人肝细胞微粒体在体外共孵育后用MTY法检测人脐带静脉内皮细胞（human umbilical cord vein endothelial cells，hUCVEC）增殖活力，用流式细胞术测定hUVCEC细胞周期和细胞凋亡，以改良的Boyden小室法检测hUCVEC细胞迁移力，以体外小管形成实验检测hUCVEC分化。结果表明：沙利度胺原药对hUCVEC活力无明显抑制作用，细胞凋亡比例也无明显增加，轻度影响细胞迁移，无抗小管形成作用；当与人肝细胞微粒体共孵育后hUCVEC增殖活力明显受抑。100μg／ml沙利度胺与肝细胞微粒体共孵育后hUCVEC增殖活力的抑制率达（11．7±3．9）％，凋亡细胞增加达27．2％，明显下调细胞迁移力并抑制体外小管形成。在共孵育体系中加入CYP2C19特异性抑制剂奥美拉唑，可减弱沙利度胺抑制hUCVEC增殖活力和诱导凋亡的作用，减低细胞迁移力和部分逆转抗小管形成的作用。结论：沙利度胺的体外抗血管生成作用依赖于人细胞微粒体的作用，细胞色素酶系中的CYP2C19可能参与了这一过程。