新型聚乳酸复合纳米羟基磷灰石人工骨的细胞相容性

目的前期试验证实,当纳米羟基磷灰石含量为20%时的聚乳酸复合纳米羟基磷灰石人工骨材料能满足人体骨缺损修复的生物力学要求,尚需进一步的观察其细胞相容性,为临床应用提供参考数据。方法制备纳米羟基磷灰石含量为20%时的聚乳酸复合纳米羟基磷灰石人工骨材料,并提取浸提液。设立阴性对照组(含10%胎牛血清的DMEM完全培养基)、实验组(浸提液)、阳性对照组(质量浓度为0.64%的苯酚),用兔骨髓间充质干细胞与材料浸提液共培养的方式进行。观察兔骨髓间充质干细胞在培养3,5,7 d各时相点的细胞形态学变化,运用MTT比色法,测定上述各组兔骨髓间充质干细胞细胞培养3,5,7 d的相对增殖度,判断材料对细胞的毒性程度。结果随着时间的延长,3组细胞的吸光度值均明显增加(P<0.01)。实验组兔骨髓间充质干细胞相对增殖度在第3,5,7天分别为95.3%,96.8%和97.6%,参照国家标准聚乳酸复合纳米羟基磷灰石人工骨材料的细胞毒性为1级;实验组与阴性对照组比较差异不显著(P>0.05),阳性对照组与其他两组比较差异显著(P<0.05)。实验组细胞形态正常,呈梭形,贴壁生长良好。结论聚乳酸复合纳米羟基磷灰石人工骨材料细胞相容性良好,细胞毒性为1级,参照GB/T16886.5.2003标准属于安全范围。     

骨关节炎中关节软骨和周围骨的变化

骨关节炎(OA)是最常见的关节炎,同时也是造成中老年人伤残的重要原因。曾经一度认为关节软骨的改变是骨关节炎主要的病变,但现在普遍认为,所有关节结构包括软骨钙化区、软骨下骨、骨小梁、关节囊等都会受到影响。然而骨与软骨所起到的作用、之间的关系如何还不明确。本文就骨关节炎中关节软骨和周围骨的变化作一综述。     

大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变血瘀积证模型的研制

[目的]探讨慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变血瘀积证动物模型的研制方法.[方法]23只大鼠随机分为2组,对照组予0.85%氯化钠灌注,实验组采用甲基硝基亚硝基胍(MNNG)、乙醇、雷尼替丁灌注的综合法,造模20周,观察2组大鼠一般状况、舌质、胃重、胃黏膜病理等变化.[结果]实验组一般状况较差,舌质表现明显的血瘀征象,病理观察胃黏膜形态有典型的CAG癌前病理改变.[结论]采用MNNG、乙醇、雷尼替丁灌注的综合法研制的CAG癌前病变血瘀积证动物模型与临床该证表现有较好的一致性,为中医药研究治疗CAG癌前病变,提供了较为合适的动物模型.     

逆转录病毒转染后骨髓间充质干细胞中人Dmp-1表达的变化

目的 探讨构建的pLNCX2-Dmp-1逆转录病毒载体转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)后,外源性基因牙本质基质蛋白-1 (Dmp-1)表达的变化.方法 含人Dmp-1基因的逆转录病毒液pLNCX2-Dmp-1转染原代培养后扩增的第5代BMSCs,用免疫荧光、RT-PCR和Western blotting检测Dmp-1的表达.结果 用逆转录病毒液pLNCX2-Dmp-1转染BMSCs后,免疫荧光检测发现,在大多数细胞内Dmp-1都有明显的表达,而没有用pLNCX2-Dmp-1病毒液处理的BMSCs则无明显表达,RT-PCR和Westem blotting的检测也支持免疫细胞化学的结果.结论 构建含人Dmp-1基因的逆转录病毒载体pLNCX2-Dmp-1转染BMSCs后可上调目的 基因的表达.     

白果内酯抗卡氏肺孢子虫体外作用的研究

目的研究不同浓度白果内酯抗体外培养卡氏肺孢子虫的作用。方法接种卡氏肺孢子虫(Pc)于人肝癌细胞(HepG-2)。4h后加入试验药物和对照试剂。白果内酯浓度分别为:150、100、50、25、12.5μM/L;对照药喷他脒:15μM/L;以后每隔1d取1/10培养液观察,分别作对倍稀释PCR和六亚甲基四胺银(GMS)染色计数Pc包囊。结果卡氏肺包子虫在体外培养细胞上的生长高峰出现于第6d,对倍稀释PCR提示,白果内酯50μMol/L以上浓度对Pc均有抑制作用,白果内酯150μMol/L、100μMol/L对Pc的抑制率分别为91.67%和93.75%,与喷他脒95.83%之间比较,P>0.05,提示以上两浓度的白果内酯对Pc的抑制作用与喷他脒15μMol/L相似;白果内酯50μMol/L与各组间差异均有显著性,提示其作用优于空白对照组,而不及白果内酯100μMol/L组,同时随着药物剂量的增加其抗Pc的作用增强;药物对Pc包囊的抑制率白果内酯150μMol/L、100μMol/L分别为58.85%、53.62%,与喷他脒63.01%比较,P>0.05,提示这两个浓度的白果内酯对Pc包囊的抑制作用与喷他脒15μMol/L相似;其余浓度白果内酯与空白对照组间差异无显著性,提示这几种浓度的白果内酯对Pc包囊无明显的抑制作用。结论白果内酯在体外对Pc有明显抑制作用,白果内酯150μMol/L、100μMol/L对Pc的抑制作用与喷他脒相当。     

改性医用胶为纳米骨胶的体外实验

摘要 背景：目前α-氰基丙烯酸烷基酯类生物胶可应用于临床许多方面,由于胶本身存在一些缺点,使其在骨科的应用受到限制。 目的：对普通医用胶进行改性研究,研制出纳米骨胶并检测其细胞毒性和力学性能。 方法：直接在纳米骨胶和普通医用胶上种植兔骨髓基质干细胞细胞,通过倒置显微镜和扫描电镜观察细胞在胶上生长情况。用胶的浸泡液培养细胞,在0,6,12,18,24 h时间点和1~7 d每天进行细胞活性检测。用两种胶将标准PVC管粘合,比较两种胶的粘合强度,并在不同环境下比较胶凝固时间。 结果与结论：经3次换液后细胞可在纳米骨胶和普通医用胶上生长,两种胶对细胞都有一定毒性,但毒性并无明显差别;纳米骨胶的力学强度明显高于普通医用胶,且凝固时间明显快于普通胶。提示经改性后的纳米骨胶细胞毒性不高于普通胶,但力学强度和凝固时间前者明显优于后者,且前者具有促进成骨的作用。 关键词：纳米骨胶;粉碎性骨折;氰基丙烯酸酯;细胞毒性;生物力学 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.47.019     

慢病毒转染大鼠骨髓间充质干细胞研究

目的分离培养大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal stemcells,BMSCs）并进行慢病毒载体介导的基因转染研究。方法利用密度梯度离心法分离、纯化、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞。以脂质体法进行慢病毒感染大鼠BMSCs。结果分离培养出大鼠BMSCs,并用携带绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的慢病毒成功感染大鼠BMSCs。结论获得大鼠BMSCs并进行慢病毒载体介导的基因修饰,为骨髓间充质干细胞基因治疗研究奠定了基础。     

骨髓间充质干细胞体内定向诱导分化及对肝功能影响的实验研究

目的 观察同种异体骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)移植在肝脏特定微环境下是否向具肝细胞功能的细胞分化并探讨其对大鼠受损肝脏修复作用的可行性.方法 利用密度梯度离心法分离、纯化、扩增培养大鼠骨髓间充质干细胞.慢病毒转染第3代BMSCs后从门静脉植入同种异体肝损伤大鼠体内,分别于移植后7、14和28 d行血清肝功能检测.于移植后的第28天取出肝脏,通过冷冻切片行荧光检测,研究BMSCs在大鼠肝脏内定居分布情况.结果 BMSCs体内移植后定居于肝脏内.ALB在术后第7、28天,A组与B组比较差异有显著性[7 d:(18.81±0.96)vs(17.94±1.13),P＜0.05].[28 d:(20.08±0.56)vs(19.28±0.50),P＜0.05].AST在术后第7天,A组与B组之间比较差异有显著性[7 d:(213.50±45.35)vs(262.20±44,15),P＜0.01],第14天差异有显著性[14 d:(176.50±33.53)vs(230.30±68.45),P＜0.05].术后第14天,A组ALB、札T、ALP与C组比较均无明显差异.结论 经门静脉移植的BMSCs能在受损肝脏内定居、增殖,BMSCs移植可以在一定程度上修复受损肝脏.     

艾滋病并发马尔尼菲青霉病

目的报道马尔尼菲青霉病在中国可继发于艾滋病。方法详细询问病史，系统查体，进行胸部X线及肝脾B超检查及取血、骨髓、皮疹分泌物做病原学检查，真菌培养与鉴定结果病人以发热、皮疹、肺炎、贫血、肝脾与淋巴结肿大为主要临床表现。两年前曾感染HIV。实验室检查：抗HIV阳性，周围血淋巴细胞总数显减少，Th2％，Ts54％，Th／Ts比例倒置。骨髓细胞学检查细胞间及部分组织细胞浆内可见大量病厚体，真菌培养证买为马尔尼菲青霉菌，结论在我国，马尔尼菲青霉病可继发于艾滋病，确诊时须排除组织胞浆菌病。