胃癌组织中EB病毒的检测及其增殖期基因的表达

目的；探讨EB病毒(Epsteirt-Barr virus．EBV)感染与胃癌发生的关系及其增殖期基因在EBV阳性胃癌发生中的作用。方法：应用聚合酶链反应（PCR）-Southern杂交检测185例胃瘟组织和相应癌旁组织中特异性EBVDNA片段．PER阳性标本用原位杂交(ISH)技术检测石蜡切片组织中EBV犏码小RNA1(EBER1）的表达．以确定EBV阳性胃癌一再应用RT-PCR和Southern杂交技术检测EBV增殖期基因(即刻早期基困BZLF1、BRLF1，早期基因BARF1、BHRF1．晚期基冈BcLF1、BLLF1)的表达．结果：13例胃癌组织EBV阳性(7．03％)，癌旁组织未检测到EBV感染．胃癌和癌旁组织中EBV阳性纺有显著性差异(X^2=11.0769．P=0．0009)。EBV阳性和阴性胃癌在年龄、病理类型、临床分期、淋巴结转移和发生部位的差别均无显著性(P=0．973，0．141，0．259，0．586，0．062)．但性别之间的差异有显著性，男性EBV阳性率高于女性（X^2=52317．P=0．021)。增殖期基因中即刻早期基因BZLF1有6例表达阳性．而BRLF1均为阴性；早期基因中有6铡BARF1表达阳性．2例BHRF1表达阳性；晚期基因BcLF1有7倒表达阳性．而BLLF1均为阴性。结论：EBV感染与胃癌的发生有一定的相关性．部分EBV阳性胃癌组织中存在EBV增殖性感染．早期基因BARF1和BHRF1在EBV阳性胃癌发生过程中可能有重要作用。     

EB病毒相关胃癌中EB病毒编码基因与P53蛋白的表达

研究表明，EB病毒(EBV)感染与胃癌发生有关，但其在胃癌发生发展过程中的作用尚未完全明了，EBV相关胃癌(EBVaGC)中EBV与癌基因和抑癌基因的相互作用成为致癌机制研究的热点。本研究选择EBVaGC和各种临床指标与之匹配的EBV阴性胃癌(EBVnGC)作为研究对象，检测EBV相关基因和P53蛋白的表达，以探讨它们的相互关系及在胃癌发生发展中的作用。     

过敏性疾病病人血清中EB病毒抗体检测

目的探讨过敏性疾病病人外周血中EB病毒(EBV)各种抗体的表达与过敏性疾病的相关性。方法收集71例过敏性疾病(包括过敏性哮喘、过敏性鼻炎、湿疹和荨麻疹)病人和40例健康查体者(健康对照组)外周血标本,应用半定量酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测EBV早期抗原(EA)-IgA、EA-IgM、EBV衣壳抗原(VCA)-IgG、VCA-IgA和VCA-IgM抗体水平。结果过敏性疾病病人外周血EA-IgM、EA-IgA和VCA-IgM水平显著高于健康对照组(t=3.18～5.74,P<0.01),VCA-IgG和VCA-IgA水平两组比较差异无显著性(P>0.05)。结论 EBV抗体EA-IgM、EA-IgA和VCA-IgM可能参与过敏性疾病发病。     

人疱疹病毒6型101K被膜蛋白主要抗原决定簇区原核表达克隆的构建和表达

目的构建人疱疹病毒6型(HHV-6)101K被膜蛋白的原核高效表达克隆,并进行原核表达。方法PCR扩增HHV-6B 101K被膜蛋白的主要抗原决定簇区(666~834aa)编码基因片段(nt2 347~2 853),并导入T载体进行测序,与GenBank中HHV-6标准毒株序列比较以进一步鉴定。目的基因及表达载体pThioHis A分别经双酶切后连接,转化宿主菌E.coli BL21,应用PCR法及限制性核酸内切酶双重鉴定原核表达质粒,并经测序证实。IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳鉴定重组蛋白。结果PCR获得的目的基因序列与GenBank中HHV-6B标准毒株Z29序列一致,重组质粒诱导菌表达产物出现相对分子质量为31 900的融合蛋白条带。结论HHV-6 101K蛋白的原核表达克隆构建和表达成功,为进一步完善HHV-6活动性感染的血清学诊断提供了实验基础。     

ARCHITECTi2000SR全自动化学发光免疫分析仪使用方法改良的思路扩展

本文阐述在ARCHITECTi2000SR全自动化学发光免疫分析仪应用实践中进行使用方法的改良,极大地方便了仪器操作者的使用,有效地避免了使用过程中的差错的发生。解决故障的过程有助于思路的扩展,对使用其他的检验仪器有很好的启发作用和较大的参考或应用价值。     

镰刀菌致毛霉菌性肺炎一例

近年来随着医院感染菌种的不断变迁、大量抗生素的广泛应用，全身性真菌感染呈显著增高趋势，但由镰刀菌属菌引起的真菌性肺炎实为少见。我院于2006年6月份从痰中检出1例镰刀菌引起的毛霉菌性肺炎，现报告如下。     

鼻咽癌病人放疗前后VCA-IgA抗体及EB病毒DNA水平变化

目的检测鼻咽癌病人放疗前、放疗1个疗程及放疗结束后血清EB病毒衣壳抗原IgA(VCA-IgA)抗体水平及EB病毒DNA(EBV DNA)载量的变化,探讨其在鼻咽癌疗效监测及预后评估中的价值。方法收集EBV阳性鼻咽癌病人放疗前、放疗1个疗程及放疗结束后的血清标本,提取外周血细胞DNA。应用ELISA试剂盒检测血清VCA-IgA抗体水平的变化,实时荧光定量PCR方法检测EBV DNA载量的变化。结果 22例鼻咽癌病人3个不同放疗阶段血清VCA-IgA抗体和EBV DNA水平比较差异均有显著性(F=3.305、9.461,P<0.05)。放疗结束后VCA-IgA抗体水平显著低于放疗前水平(t=2.081,P<0.05),而放疗1个疗程后与放疗前及放疗结束后相比差异均无显著性(P>0.05)。7例病人从治疗开始至治疗结束均未检测到EBV DNA,其余15例病人EBV DNA载量放疗前与放疗1个疗程及放疗结束后相比差异均有显著性(t=2.47、4.34,P<0.05),而放疗1个疗程和放疗结束后相比差异无显著性(P>0.05)。结论同时检测血清中EBV抗体及EBV DNA水平有助于鼻咽癌疗效监测及预后评估。     

EBV相关胃癌组织中bcl-2和Ki-67蛋白表达的检测

①目的　探讨Epstein BarrVirus(EBV)相关胃癌 (EBVaGC)组织中bcl 2和Ki 6 7蛋白表达与EBV感染的关系。②方法　应用PCR Southern技术 ,检测 1 85例胃癌及相应癌旁组织中EBVDNA ,原位杂交技术检测PCR阳性标本EBV小RNA1 (EBER1 )的表达 ,确证EBVaGC。并选择EBV阴性胃癌 (EBVnGC)标本 ,应用免疫组化技术检测其bcl 2和Ki 6 7蛋白的表达。③结果　 1 85例胃癌组织中检测到EBVaGC 1 3例 ,阳性率为 7.0 3% ,1 85例癌旁组织均为阴性 ,胃癌组织和相应癌旁组织EBV阳性率比较差异有显著性 (χ2 =1 1 .0 77,P <0 .0 0 1 )。E BVaGC和EBVnGC组织中bcl 2表达率分别为 5 3.85 %和 4 8.89% ,二者比较差异无显著性 (χ2 =0 .0 99,P >0 .0 5 )。EBVaGC和EBVnGC组织中Ki 6 7指数 (KI)平均值分别为 2 8.2 5 4± 6 .2 84和 37.86 4± 1 4 .5 2 3,二者比较差异有极显著意义 (t′=2 .5 5 3,P <0 .0 1 )。④结论　EBV感染与部分胃癌的发生有一定相关性 ,EBVaGC的发生与bcl 2蛋白表达无明显相关性 ,与Ki 6 7蛋白表达有一定相关性。     

过敏性皮炎患者外周血IL-13、IL-4和嗜酸性粒细胞数检测

目的：探讨外周血中嗜酸性粒细胞（peripheralbloodeosinophilcell,PBEC）计数、人白介素13（interleukin-13．IL-13）和人白介素-4（interleukin-4,IL-4）水平的表达在过敏性皮炎发生发展中的作用．、方法：收集28例过敏性皮炎患者和40例健康查体者外周血标本,常规计数PBEC,并通过半定量酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上述标本中的IL-13和IL-4的水平,采用t检验比较其间的差异。结果：过敏性皮炎患者外周血PBEC计数、IL-13和IL-4的水平显著高于健康对照组（P〈0．01）,且过敏性皮炎组IL-13和IL-4水平呈显著正相关性（P〈0．05）,结论：PBEC、IL-13和IL-4参与过敏性皮炎患者体内的变态反应,IL-13可能通过IL-4来发挥作用。     

血清IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-13水平与过敏性哮喘的相关性分析

过敏性哮喘是临床常见和多发的呼吸系统疾病之一,已经成为世界范围内严重的公共卫生问题。但是过敏性哮喘的病因仍不完全清楚。近年来国内外诸多研究发现 Th1/Th2平衡失调以及细胞因子都在过敏反应中发挥重要作用。为了探讨细胞因子在过敏性哮喘发生发展中的作用,检测60例过敏性哮喘患者及52例健康人外周血中IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-13的表达,作分析比较。结果报告如下。