胰腺导管腺癌中microRNA-21与TGF-β1信号通路相关

目的：对胰腺导管腺癌样本进行基因分析,筛选与胰腺导管腺癌相关的microRNA(miRNA),并初步分析目标miRNA与胰腺癌转化生长因子-β1(TGF-β1)信号通路的相关性。方法：收集在海南省中医院住院的胰腺导管癌患者术前外周静脉血血清标本19份,健康体检人群的外周静脉血血清标本21份作为非胰腺导管癌对照组。利用GCBI(Gene-Cloud Biotechnology Information)数据平台筛选与胰腺导管腺癌样本有关的基因并对其进行生物信息学分析,将筛选出的基因作为研究对象,用real-time PCR和蛋白质印迹法验证该基因在胰腺导管腺癌中的表达。通过改变胰腺导管腺癌细胞中该基因的表达水平观察其与TGF-β1之间的关系。结果：通过聚类分析和基因功能富集分析筛选出miRNA-21为胰腺导管癌相关基因。MiRNA-21在胰腺导管腺癌患者体内高表达。在miRNA-21过表达的PANC-1细胞中,TGF-β1表达受到抑制;但当miRNA-21的表达受到抑制时,TGF-β1的表达明显上升。结论：MiRNA-21在胰腺导管腺癌患者体内高表达,可调控TGF-β1的表达,从而参与胰腺导管腺癌的发生发展。     

MicroRNA-21 对肺高压血管 平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究microRNA-21（miRNA-21）在Wnt/β-catenin 信号通路中抑制肺高压（PH）血 管平滑肌细胞增殖的可能机制。方法 复制外源性miRNA-21 干扰的野百合碱大鼠肺高压原代肺动脉平滑 肌细胞（PASMCs）模型,分别用Western blot 和实时荧光定量PCR 检测外源性miRNA-21 对Wnt 通路 中β-catenin、Cyclin D1 和拮抗剂DDK1 表达的影响。结果 外源性抑制miRNA-21 表达时,PASMCs 中 β-catenin、Cyclin D1 表达水平增高,拮抗剂DDK1 表达降低,拮抗作用减弱;而外源性上调miRNA-21 表达时,PASMCs 中β-catenin、Cyclin D1 表达水平降低,拮抗剂DDK1 表达增高,拮抗作用增强。结论 miRNA-21 的早期干预可通过调控Wnt 通路的拮抗剂DKK1 作用与Wnt/β-catenin 信号通路参与PH 肺血 管重构。     

海口地区呼吸道病原体流行情况分析

目的 通过检测呼吸道病原体抗体,了解海口地区不同年龄、不同性别的发病和分布情况.方法 采集2015年1月至2016年5月海南省中医院1103例患者3 mL静脉血,分离血清.使用间接免疫荧光法(IFA)检测样本血清中9种常见的呼吸道感染病原IgM抗体,对结果 进行统计学分析.结果1103例患者中非典型呼吸道病原抗体阳性323例(包括混合感染),阳性率为29.28%(323/1103).阳性率最高的是肺炎支原体25.57%(282/1103),其次是乙型流感病毒3.35%(37/1103);混合型感染占1.27%(14/1103),主要是肺炎支原体合并其他非典型呼吸道病原体感染.非典型呼吸道病原感染阳性率婴儿组为21.83%(55/252)、幼儿组为53.38%(79/148)、儿童组为40.97%(59/144)、少年组为60.00%(9/15)、青年组31.43%(22/70)、中老年组为13.71%(65/474),各年龄组非典型呼吸道病原阳性率比较差异有统计学意义(χ2=123.36,P<0.05);病毒感染阳性率婴儿组为2.38%(6/252)、幼儿组为8.11%(12/148)、儿童组为7.64%(11/144)、少年组为6.67%(1/15)、青年组为1.43%(1/70)、中老年组1.69%(8/474),各年龄组非典型呼吸道病毒阳性率差异有统计学意义(χ2=23.25,P<0.05).男性非典型呼吸道病原阳性率为21.64%(156/721),女性阳性率为35.34%(135/382),非典型呼吸道病原感染性别差异有统计学意义(χ2=24.14,P<0.05).结论 肺炎支原体和乙型流感病毒是导致海口地区呼吸道感染的主要病原体,病原体感染在年龄组和性别间存在差异.少年组和幼儿组非典型呼吸道病原感染率最高,应重点防治.     

类风湿关节炎患者血清中淀粉样蛋白A和分泌型磷脂酶A2的水平及意义

目的观察类风湿关节炎(RA)患者血清中淀粉样蛋白A(SAA)和分泌型磷脂酶A2(sPLA2)的水平,探讨两者与RA临床病理特征的关系及预后价值。方法筛选收治的RA患者103例为RA组,选择同期体检健康者50例为对照组。检测所有研究对象血清中SAA和sPLA2水平。比较2组血清中SAA和sPLA2水平,分析血清中SAA和sPLA2水平与RA患者临床病理特征的关系。对所有患者给予为期12周的常规治疗,比较治疗前后患者血清中SAA和sPLA2水平变化,比较治愈组和未治愈组患者治疗前血清中SAA和sPLA2水平。结果 RA组患者血清SAA和sPLA2水平明显高于对照组(P0.01)。RA患者血清中SAA和sPLA2水平与X线分期、病情呈正相关(P0.01),与年龄、性别无明显相关性(P0.05)。治疗12周后,RA组患者血清中SAA和sPLA2水平明显降低(P0.01),治愈组治疗前血清中SAA和sPLA2水平明显低于未治愈组(P0.01)。结论血清中SAA和sPLA2水平可能是临床评价RA患者病情及预后的重要指标之一。     

白藜芦醇对实验性兔肺动脉高压相关炎症因子表达的影响

目的  通过检测白藜芦醇（Res）干预后实验性兔肺动脉高压（PAH）模型肺组织中相关细胞因子表达水平的差异,探讨其在PAH发病机制中的作用。方法  将36只新西兰兔随机分为6组。对照组（A组）：动物皮下注射二甲基亚砜30 mg/kg。造模组：实验组动物适应性饲养1周后,皮下注射野百合碱30 mg/kg,连续注射7 d造模,然后将造模动物随机分为5组：模型组（B组）、实验药物组（C组）、高剂量组（D1组）、中剂量组（D2组）、低剂量组（D3组）,每组6只。注射后第45天,分别进行B超、心肌细胞苏木精-伊红染色和Tunnel染色,检测造模是否成功,造模成功后按体重计算给药剂量,受试药物高剂量120 mg/（kg·d）,中剂量60 mg/（kg·d）,低剂量30 mg/（kg·d）,阳性对照药物前列腺环素1 mg/（kg·d）喂饲相应的动物,1次/d,连续6周,每日观察动物的食量、活动、毛色及大小便变化,每周称体重。每隔2周随机采集各组实验动物外周血样本,采用酶联免疫吸附法试剂盒,分别对实验动物血清3种生物学标志物[转录因子-κB（NF-κB）、环氧化酶-2（COX-2）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）]的含量进行检测。结果  Res干预实验性兔PAH模型后,NF-κB、COX-2、iNos血清表达水平改善,其中高剂量组改善效果优于阳性对照药物前列腺环素。且在实验中经对比发现,NF-κB的特异性最明显,其他指标虽然有变化,但显著性不如NF-κB。结论  Res抑制血清中分泌NF-κB、COX-2、iNos的能力优于前列腺环素,Res可以通过抑制NF-κB/iNOS/COX2通路避免细胞损伤,改善PAH症状,表现出和前列腺环素相同或更好的作用。

     

DNMT1基因沉默对前列腺癌细胞增殖、 凋亡及GSTP1、SHOX2、DAPK甲基化状态的影响

目的探讨siRNA技术沉默DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因表达对前列腺癌细胞(LNCap)增殖、凋亡的影响,初步分析其对谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、矮小同源盒基因2(SHOX2)、凋亡相关蛋白激酶(DAPK)甲基化状态的影响。方法体外培养人前列腺癌细胞LNCap、正常前列腺上皮细胞RWPE-1,采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)及蛋白印迹(WB)检测细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平。实验分为3组:空白对照组(未经任何处理LNCap细胞); si-NC组(转染DNMT1阴性对照质粒的LNCap细胞); si-SH2B1组(转染si-DNMT1的LNCap细胞)。采用CCK-8法检测三组细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡水平。采用甲基化特异性PCR (MSP)检测GSTP1、SHOX2、DAPK基因甲基化状态; qRT-PCR与WB法分别检测各组LNCap细胞DNMT1、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达情况。结果与正常组细胞相比,前列腺癌组细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P 0. 05);si-DNMT1组DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显著低于空白对照组、si-NC组(P 0. 05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组LNCap细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P0. 05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组GSTP1、DAPK、SHOX2基因甲基化水平均显著降低(P 0. 05)。结论沉默DNMT1基因后可明显抑制LNCap细胞增殖并促使其凋亡,其可能通过逆转GSTP1、DAPK、SHOX2甲基化状态并上调其表达而发挥作用。     

甲型肝炎患者黏蛋白域蛋白1 和4 表达与抗体产生的相关性研究

目的 探讨甲型肝炎患者恢复期T 细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白（TIM）1 和4 mRNA 水平与 体液免疫的关系，了解TIM-1 和TIM-4 在体液免疫抗体产生过程中的相关作用。方法 选取甲型病毒性 肝炎典型病程的60 例患者于恢复期留取血液标本，以同期60 例健康体检志愿者血液标本作为对照，qRTPCR 检测TIM-1 和TIM-4 mRNA 水平，ELISA 检测外周血白介素4（IL-4）、白介素10（IL-10）、肿瘤坏 死因子α（TNF-α）和血清总Ig（IgG、IgM 和IgA）水平。结果 甲型病毒性肝炎患者外周血TIM-1 及 TIM-4 mRNA 的表达水平高于对照组（P <0.05）；甲型病毒性肝炎患者血清中IL-4 和IL-10 水平高于对 照组（P <0.05）；甲型病毒性肝炎患者血清总Ig（IgG、IgM 和IgA）水平高于正常对照组（P <0.05）。结论 TIM-1 及TIM-4 水平升高可能通过提高IL-4、IL-10 和TNF-α 来增强体液免疫的功能。     

TIM-1 和TIM-4 mRNA 在HAV 患者中的表达及其临床意义

目的 观察典型病程甲型病毒性肝炎（HAV）患者外周血中T 细胞免疫球蛋白域蛋白-1 （TIM-1）和T 细胞免疫球蛋白域蛋白-4（TIM-4）mRNA 的表达水平,探讨HAV 患者病情进展的不同时 期TIM-1 和TIM-4 mRNA 水平与HAV RNA 含量,HAV 免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）浓度 及肝功能指标的关系。方法 选取HAV 典型病程的30 例患者作为HAV 组,分别于潜伏期或黄疸前期、黄 疸期及恢复期留取血液标本,以同期30 例健康体检者作为对照组,收集血液标本。采用实时荧光定量聚合 酶链反应检测TIM-1 和TIM-4 mRNA 表达水平,同时检测HAV 患者外周血HAV RNA 含量,酶联免疫 吸附法检测HAV 患者外周血HAV 抗体IgM、IgG 滴度水平,全自动生化分析仪检测肝功能指标谷丙转氨 酶、谷草转氨酶及总胆红素。结果 HAV 组患者外周血TIM-1 和TIM-4 mRNA 表达水平高于对照组患者 （P <0.05）。随着疾病进程的继续,TIM-1 及TIM-4 mRNA 表达水平于黄疸期达峰值,恢复期下降。TIM- 1 mRNA 表达水平与HAV 患者IgM 滴度、AST 及TBIL 呈正相关（P <0.05）,与IgG 滴度无关（P >0.05）。 结论 HAV 患者外周血中TIM-1 和TIM-4 mRNA 的表达水平与HAV 的疾病进展有较好的拟合性,TIM-1 和TIM-4 mRNA 可能在HAV 的发生、发展中发挥作用。