大鼠骨髓间充质干细胞转染人TH基因的实验研究

目的评价酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)基因修饰骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)后TH的表达情况及转染TH基因对MSCs的影响.方法构建含人TH基因的pCMV/hTH质粒,用脂质体转染原代培养的大鼠MSCs;Western blot及免疫细胞化学染色鉴定TH基因的表达及MSCs的分化情况;MTT比色法测定转染后的MSCs细胞活性,并与未转染的MSCs进行细胞活性比较.结果构建的pCMV/hTH质粒经ECoRI酶切后产生1.9okb和5.3kb的片段,与回收的目的基因及载体基因片段大小相符;转基因后的MSCs Western blot及免疫细胞化学染色显示TH染色阳性;转染后MSCs未见有NeuN,GFAP的表达;MTT比色法测定细胞活性,未转染与转染者差异无显著性.结论构建的TH基因能在体外培养的鼠MSCs中较好的表达,转染不会诱导MSCs向神经样细胞分化,对MSCs细胞活性无明显影响.     

凋亡敏感基因在短暂性缺氧再复氧复注血清后的大鼠星形胶质细胞中的表达及其意义

目的研究一种新发现的抗氧化蛋白质--凋亡敏感基因(SAG)在短暂性缺氧再复氧复注血清诱导的细胞坏死和凋亡中的作用.方法用短暂性缺氧再复氧复注血清来诱导原代培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞损伤,用免疫细胞化学方法检测凋亡敏感基因的表达,并作图像分析;用流式细胞仪检测胶质细胞在短暂缺氧再复氧复注血清后不同时间点的凋亡率.结果凋亡敏感基因在缺氧15 min再复氧复注血清5 h后表达最高,在复氧复注血清16 h后恢复至对照组水平;细胞凋亡率在缺氧15 min再复氧复注血清1h时达到最高,而在再复氧复注血清5 h后降至对照组水平.结论凋亡敏感基因具有抗凋亡的作用,可减轻星形胶质细胞的缺血再灌注损伤.     

癌症患者创伤后应激障碍特征

癌症已成为一种常见的心身疾病[1,2],人们"谈癌色变".Zabora等[3]发现35%的癌症患者有高度的应激失调,并随着疾病的进展而增加.Baider等[4]报道,乳腺癌患者患有强迫性思维,具有类似于创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder,PTSD)的特点.     

肝癌介入治疗后肝细胞凋亡和再生的研究

目的　研究肝癌介入治疗后 ,周围正常肝脏细胞是否存在肝细胞凋亡及再生及其特点。方法　VX2肝癌动物模型兔 50只 ,分别行肝叶切除术 (PH)与经动脉化疗栓塞术 (TACE) ,流式细胞术检测术后 2 4、72h的周围正常肝细胞周期 ,测定S期细胞比率 (SPF) ,增殖指数 (PI)的变化并测定是否有肝细胞凋亡。结果　TACE术后 2 4hSPF、PI较对照组均明显升高 (P <0 .0 0 1 ) ,并且术后第 1天 ,TACE术后肝细胞增殖弱于肝叶切除术 ,各项指标差异有显著性 (P <0 .0 5) ,术后 72h ,两组出现较小的亚二倍体峰 (Sub G1 ) ,较对照组有所升高 (P <0 .0 5) ,但它们之间差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　TACE术后肝组织存在一定程度的再生和肝细胞凋亡 ,这可能与碘油的选择性栓塞 ,化疗药物的诱导和自由基的损伤有关     

星形胶质细胞促进共培养骨髓间充质干细胞的生长和分化

目的:探讨星形胶质细胞对共培养的骨髓间充质干细胞生长和分化的影响。方法:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,经Hoechst33342标记后与纯化的星形胶质细胞在DMEM/F12/10%FBS中一起培养,观察骨髓间充质干细胞的生长状况、形态变化和特异性标志蛋白NeuN、GFAP和CNP的表达。结果:倒置显微镜下2种细胞生长状态良好,少数Hoechst33342标记细胞伸出细长突起,呈锥形、多角形或星形,有NeuN、GFAP和CNP的表达。结论:星形胶质细胞与骨髓间充质干细胞共培养可以维持骨髓间充质干细胞的生长,并可在一定程度上诱导其向神经样细胞分化。     

骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经样细胞的机制

目的探索骨髓间充质干细胞 (MSCs)在体外诱导分化为神经样细胞的机制。方法分离培养大鼠MSCs ,用二甲基亚砜 (DSMO)和丁羟茴醚 (BHA)诱导分化 ,检测诱导分化前、预诱导 2 4h、诱导分化后 6h、2 4h和 48h神经细胞和神经干细胞的特异性标记蛋白的表达。结果诱导分化后 ,大部分MSCs变成双极、多极和锥形 ,并相互交织成网络结构 ,巢蛋白 (Nestin)在诱导分化前不表达 ,在诱导分化后 6h达到最高 ,2 4h和 48h逐渐降低。神经元特异性核蛋白 (NeuN )在诱导分化前不表达 ,在诱导分化后 6h出现表达 ,2 4h和 48h表达增强。结论MSCs经体外诱导先分化为神经干细胞 ,然后分化为神经元样细胞。     

中西医结合治疗糖尿病肾病50例

目的:观察中西医结合治疗糖尿病肾病的临床疗效。方法:选取糖尿病肾病患者100例,随机分为研究组和对照组各50例。两组患者均给予饮食、运动调控及常规治疗,对照组另给予厄贝沙坦治疗,研究组在对照组治疗的基础上加用自拟滋肾方治疗。结果:研究组有效率为90.0%,对照组有效率为62.0%,研究组优于对照组(P0.05);研究组糖尿病特异生存质量量表各维度评分均优于对照组(P0.05)。结论:中西医结合治疗糖尿病肾病疗效显著,可改善患者的生存质量。     

对比研究经颈动脉和立体定位注射骨髓间充质干细胞治疗缺血性脑卒中

目的探讨安全高效移植骨髓间充质干细胞(mensenchymal stem cells,MSCs)治疗脑缺血的方法.方法采用连续传代培养的方法纯化MSCs,Brdu标记后分别经颈动脉(1×104/μl,200 μl)和立体定位(1×105/μl,10 μl)注射至大鼠脑缺血2 h再灌注1 d模型,各自设立对照组,观察术后神经功能评分以及脑部Brdu阳性细胞的分布.结果经颈动脉注射组较立体定位注射组爬杆实验评分低(P＜0.05),Brdu阳性细胞存活多,迁移范围更广.结论 MSCs具有卒中后脑保护作用,而经颈动脉的给药方式优于立体定位注射.     

住院癌症患者创伤后应激障碍发病率及影响因素

目的:调查住院癌症患者创伤后应激障碍(PTSD)的发病率及影响因素.方法:采用整群随机抽样,使用埃森创伤问卷(ETI)、临床用PTSD诊断量表(CAPS)对住院癌症患者进行评估,发放250份问卷并依据DSM-IV中PTSD的诊断标准确诊PTSD患者.结果:收回有效问卷211份,PTSD的临床检出率为11.0%(21/1...     

表皮生长因子受体与多形性胶质母细胞瘤放疗抵抗

多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)是一类在形态学上具有异质性的原发性脑肿瘤,恶性程度极高,其标准治疗方法是手术+术后放疗+以替莫唑胺(temozolomide,TMZ)为基础的化疗.但GBM患者易对放疗产生抵抗以及对化疗耐药,该治疗方案的有效率有限,患者中位生存期约15个月.40％～50％GBM患者体内存在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的扩增和过表达.全文对EGFR表达与GBM放疗抵抗的相关机制作一综述.