内质网应激和NOD样受体蛋白3在重症中暑小鼠肠黏膜损伤中的作用

目的:研究内质网应激和NOD样受体蛋白3（NOD-like receptor protein 3,NLRP3）在重症中暑肠黏膜损伤中的作用及内质网应激抑制剂4-苯基丁酸（4-phenylbutyric acid,4-PBA）的保护效应。方法:30只雄性BALB /c小鼠随机（随机数字法）分成对照组（control）、重症中暑组（heat stroke,HS）和4-PBA预处理组（4-PBA+HS,4-PBA 120 mg/kg,腹腔注射）。Control组置于室温,HS组和4-PBA+HS组置于高温气候动物培养箱[温度（35.5±0.5） ℃,湿度（60.0±5.0）%],小鼠直肠温度达到42 ℃为重症中暑造模成功标准。中暑6 h后,采用比色法检测小肠匀浆丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）,ELISA法检测血清白介素-1β（IL-1β）及白介素-18 （IL-18）,HE染色观察肠道组织病理,电镜下观察肠道超微结构,Western blot检测葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78,GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP）、NLRP3和活化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1（cleaved caspase-1）蛋白表达。计量资料多组间比较如满足方差齐性采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD- t检验;如不满足方差齐性采用Welch分析,组间两两比较采用Dunnett's T3检验,以 P<0.05为差异有统计学意义。 结果:与control组相比,HS组小肠匀浆MDA升高（ t=14.243, P<0.01）而SOD下降（ t=7.781, P<0.01）,血清IL-1β和IL-18显著升高（ t=12.664, P<0.01; t=16.240, P<0.01）,小肠绒毛广泛破坏伴有炎症细胞浸润,内质网扩张及线粒体肿胀空泡化,小肠组织GRP78、CHOP、NLRP3和cleaved caspase-1蛋白表达增加（ t=14.824, P<0.01; t=12.667, P<0.01; t=9.298, P<0.01, t=6.588, P=0.001）。与HS组相比,4-PBA预处理降低MDA（ t=9.167, P<0.01）并升高SOD（ t=6.077, P<0.01）,降低血清IL-1β和IL-18（ t=4.889, P=0.001; t=5.693, P<0.01）,减轻小肠黏膜的病理改变及超微结构的损伤,降低了GRP78、CHOP、NLRP3和cleaved caspase-1蛋白表达（ t=9.080, P<0.01; t=7.152, P<0.01; t=4.249, P=0.005; t=3.650, P=0.011）。 结论:内质网应激和NLRP3参与重症中暑肠黏膜损伤,4-BPA通过抑制内质网应激及NLRP3炎症小体活化减轻重症中暑肠黏膜损伤。     

Tumstatin185～191对人肺腺癌细胞的抑制作用及其与蛋白激酶B和细胞外调节蛋白激酶活性的关系

目的 观察Tumstatin185～191对肺腺癌细胞增生与凋亡的影响,探讨其与蛋白激酶B(Akt)及细胞外调节蛋白激酶(ERK)活性的关系.方法 以人肺腺癌细胞株A549为研究对象,分别给予不同浓度的Tumstatin185～191、顺铂及Tumstatin185～191联合顺铂进行干预,以四唑盐比色法测定A549细胞的增殖情况;流式细胞仪检测分析A549细胞凋亡的变化;Western blot检测细胞内磷酸化的Akt(p-Akt)及磷酸化的ERK(p-ERK)蛋白表达水平.结果 Tumstatin185～191对A549细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为73.7μmol/L,顺铂对A549细胞的IC_(50)为5.2μmol/L,当顺铂与20μmol/L或40μmol/L的Tumstatin185～191联合应用时,顺铂对A549细胞的IC_(50)分别下降为3.5 μmol/L和1.4μmol/L;两药联合使用时,A549细胞的早期凋亡率为(19.34±0.97)%,较顺铂[(12.5±2.1)%]和Tumstatin185～191单用[(9.6±1.6)%]的早期凋亡率显著增加(F=5.74,P<0.01);Western blot检测显示p-Akt及p-ERK在未经干预的A549细胞内均呈高表达状态,Tumstatin185～191可显著抑制p-Akt及p-ERK的表达,顺铂则无明显影响;Tumstatin185～191与顺铂联合使用并不增加Tumstatin185～191对p-Akt及p-ERK的抑制效应.结论 Tumstatin185～191单药或联合顺铂对于A549细胞均有显著抑制作用,Tumstatin185～191能够增加A549细胞对顺铂的敏感性;Tumstatin185～191可能通过下调A549细胞内p-Akt及p-ERK水平发挥其抑制细胞生长、促进细胞凋亡的作用.     

成人胸椎间孔韧带的解剖学观测

目的 通过解剖观测成人胸椎间孔韧带.为国人提供胸椎间孔韧带的解剖学资料并探讨其临床意义.方法 选用成人尸体标本15具,解剖观察胸椎间孔韧带.用游标卡尺进行相关测量.结果 在30侧成人胸椎标本中未发现横孔上韧带和体横韧带.T1椎间孔内未发现横孔下韧带,T2～T12椎间孔内均发现横孔下韧带,其出现率从T2～T12呈逐渐增加...     

Tumstatin185～191逆转肺腺癌化疗耐药的机制探讨

目的 观察Tumstatin185～191单药及联合顺铂(DDP)对肺腺癌耐药细胞株A549-DDP增殖和凋亡的影响,并探讨其联合作用的机制.方法 以不同浓度的Tumstatin185～191单药、DDP单药及Tumstatin185～191联合DDP干预A549-DDP细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,Western blot法检测A549-DDP细胞内p-Akt和p-ERK蛋白的表达水平.结果 Tumstatin185～191对A549-DDP细胞的增殖具有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为80.25 μmol/L.DDP单药对A549-DDP的IC50为77.16 μmol/L,当DDP与20 μmol/L的Tumstatin185～191联合使用时,DDP对A549-DDP细胞的IC50为57.97 μmol/L,耐药逆转指数为1.33;当DDP与40 μmol/L的Tumstatin185～191联合使用时,DDP对A549-DDP细胞的IC50为26.40 μmol/L,耐药逆转指数为2.92.两药联合使用时,A549-DDP细胞的早期凋亡率为19.5%±1.1%,较DDP单药(13.3%±1.5%)和Tumstatin185～191单药使用时的早期凋亡率(10.2%±2.0%)显著增加(F=4.09,P<0.05).Tumatatin185～191能显著抑制A549-DDP细胞内p-Akt和P-ERK蛋白的表达,但如与DDP联合使用,并不能增加Tumstatin185～191对P-ERK和p-Akt蛋白表达的抑制效应.结论 Tumstatin185～191能抑制肺腺癌耐药细胞株A549-DDP的增殖、促进凋亡,并部分逆转A549-DDP细胞对DDP的化疗耐药;其作用机制可能与Tumstatin185～191能下调A549-DDP细胞内p-Akt和p-ERK蛋白的表达有关.     

环氧合酶-2对香烟提取物诱导的内皮细胞凋亡的作用

目的 探讨环氧合酶-2在香烟提取物(CSE)所诱导的内皮细胞凋亡中的作用.方法 体外培养人血管内皮细胞株ECV304,按3个步骤完成实验:(1)用0.0%、0.5%、1.0%和5.0%CSE分别F预ECV-304细胞12 h;(2)用5.0%CSE分别干预ECV304细胞0、3、6、9、12和24 h;(3)用5.0% CSE 及0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、50.0μmol/L选择性环氧合酶-2抑制剂赛来昔布联合干预ECV304细胞9 h.采用Hoechst染色法和流式细胞术检测内皮细胞凋亡,免疫细胞化学和Western blot 法检测环氧合酶-2蛋白的表达.采用Bartlett法进行方差齐性检验,多组间均数比较采用单因素方差分析和LSD-t检验.结果 随着CSE干预浓度的升高,内皮细胞凋亡率和环氧合酶-2蛋白表达水平均逐渐升高,5.0%CSE干预后内皮细胞凋亡率最高[(5.40±0.39)%],环氧合酶-2蛋白表达也最高(206.1±15.5),差异均有统计学意义(F值分别为90.03和159.94,均P<0.05).5.0%CSE干预内皮细胞3 h,环氧合酶-2蛋白的表达开始增加,9 h达峰值,12 h开始减弱,24 h恢复止常.随着干预时间的延长,内皮细胞凋亡率逐渐升高,5.0%CSE干预24 h内皮细胞凋亡率最高[(8.87±0.41)%],差异均有统汁学意义(F=155.65,均P<0.05).5.0%CSE与不同浓度的选择件环氧合酶-2抑制剂赛来昔布共同作用于内皮细胞9 h后,随着赛来昔布干预浓度升高,环氧合酶-2的表达逐渐减弱;内皮细胞凋亡率首先出现小幅的下降,随后明显增加,以5.0%CSE+50μmol/L赛来昔布组的内皮细胞凋亡率最高[(32.60±5.51)%],差异均有统计学意义(F=81.28,均P<0.05).结论 CSE能够诱导内皮细胞凋亡和环氧合酶-2蛋白表达.选择性环氧合酶-2抑制剂赛来昔布能够抑制CSE诱导内皮细胞表达环氧合酶-2蛋白,并促进内皮细胞凋亡,甚至诱发其死亡.环氧合酶-2有助于缓解CSE诱导的内皮细胞凋亡,对内皮细胞有一定程度的保护作用.     

环氧合酶2对血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

环氧合酶(cyclooxygenase,COX)是以花生四烯酸为底物合成前列腺素的首要限速酶,COX-2作为其亚型之一,主要受细胞内外的各种刺激因素诱导表达.大量的研究表明,COX-2与血管的发生密切相关,它能够通过其衍生的各种前列腺素来影响血管内皮细胞的增殖与凋亡,并由此来参与各种慢性炎症性疾病和肿瘤的发生.弄清COX-2对血管内皮细胞增殖与凋亡的影响,及其相关的作用机制,有助于我们更好的认识其在疾病发生中的作用,从而避弊取利,为临床治疗提供更多更好的方案.     

非典期间铁路职工心理健康调查及相关分析

目的 了解非典期间铁路职工心理健康状况。方法 抽查铁路各单位一线暴露职工434人，采用Scl-90自评量表进行调查。结果 总体与1986年1388例正常成人结果相比人际关系因子极其显著低于对照组。说明非典型肺炎对一线铁路职工的心理影响比较明显。男女之间无明显差异，干部、工人之间无明显差异．但干部各项指数均高于工人。各年龄段之间30-40岁组恐惧因子评分显著高于20-30岁组，40岁以上组饮食睡眠等因子评分显著高于20-30岁组，40岁以上职工在总分躯体化、强迫、抑郁、精神痛性、其它等项略高于其它年龄组，但无显著差异。结论 非典型肺炎对铁路职工的影响说明其心理承受能力较强．     

AP-2α在烟雾暴露所致慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达及与肺间隔细胞凋亡的关系

目的 探讨熏烟所致慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠肺组织中AP 2α表达与肺间隔细胞凋亡的关系.方法 采用被动吸烟80 d来复制大鼠COPD模型,采用TUNEL法检测肺组织细胞凋亡、Weslern blot法检测肺组织中活化的半胱天冬酶类3(Caspase-3)、免疫组织化学及Western blot法检测胞核中AP-2α蛋白的表达.结果 采用熏烟法成功复制了大鼠COPD模型.与对照组相比,COPD组大鼠肺组织中活化的Caspase-3增加,肺间隔细胞凋亡增多;肺组织中AP-2α的阳性率增加,胞核中AP-2α蛋白水平增加(P＜0.05).结论 AP-2α可能参与了烟雾暴露所致的大鼠肺间隔细胞凋亡及COPD的发生.     

血管内皮生长因子与慢性阻塞性肺疾病

慢性阻塞性肺疾病是一个发病率和死亡率都很高的慢性疾病，其发病机制涉及肺内细胞的凋亡，肺实质细胞的减少，炎性细胞的浸润和气道、血管的重构。血管内皮生长因子作为一个可特异作用于内皮细胞，调节血管内皮细胞生长、分化、修复及发挥功能的重要因子，与慢性阻塞性肺疾病的发生有着密切的联系。