神经病理性疼痛大鼠脊髓IL-33蛋白表达的变化

目的:观察外周神经慢性压榨性损伤(chronic constrictive injury,CCI)大鼠脊髓白介素-33(interleukin-33,IL-33)表达的变化规律。方法:雄性Wistar大鼠60只,分为手术组和假手术组,每组30只,于CCI前1天、CCI后第1、4、7、14、21天各时间点测定机械痛阈及热痛阈后立即处死大鼠,每个时间点5只,取L4~6脊髓,采用Western blot方法测定IL-33的蛋白表达变化。结果:手术组大鼠术侧机械痛阈及热痛阈明显降低,脊髓IL-33水平表达增加,明显高于对侧和假手术组术侧;IL-33蛋白水平于CCI后第1天开始增加,第7天达到高峰(P<0.01),于CCI后第21天仍维持于较高水平(P<0.05)。结论:CCI致大鼠脊髓IL-33活化,参与神经病理性疼痛的调控过程。     

脂氧素A4缓解非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠根性神经痛的作用机制

目的 探讨脂氧素A4缓解非压迫性腰椎间盘突出症模型大鼠根性神经痛的作用机制。方法 雄性SD大鼠48只随机均分为四组。S组仅暴露相应手术操作部位,术后连续3 d鞘内注射生理盐水10μL/d。M、A和B组建立非压迫性腰椎间盘突出症模型后,分别连续3 d鞘内注射生理盐水10μL/d、含脂氧素A4 10 ng/d和脂氧素A4 100 ng/d的生理盐水10μL/d。比较四组术前1 d和术后7 d的大鼠右侧后肢50%缩足反射阈值(PWT)。RT-PCR法和Western blot法分别检测术后第7天四组大鼠右侧L₄～L₆段脊髓背角组织炎症因子mRNA表达和NF-κB/p65蛋白表达。结果 与S组比较,M、A、B组术后各时间点50%PWT均降低(P<0.05)。与M组比较,A组和B组术后各时间点50%PWT升高,且B组升高更明显(P<0.05)。与S组比较,M、A、B组TNF-α、IL-1β mRNA表达和NF-κB/p65蛋白表达升高,而转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA表达降低(P<0.05)。与M组比较,A组和B组TNF-...     

脂氧素A4对椎间盘突出所致大鼠根性神经痛的影响

目的观察脂氧素A4对椎间盘突出所致大鼠根性神经痛的影响。 方法选取雄性SD大鼠48只,建立非压迫性椎间盘突出模型,按照随机数字表法将其分为假手术组（假手术+10μl生理盐水）、对照组（模型+10μl生理盐水）、脂氧素A4 10ng组（模型+10ng脂氧素A4）、脂氧素A4 100ng组（模型+100ng脂氧素A4）,每组12只。手术当天及术后连续3d鞘内注射脂氧素A4或生理盐水,观察大鼠的行为学变化,并测定50%缩足阈值（50%PWT）。术后7d取大鼠术侧腰段脊髓背角,用Western blot法测定c-Jun氨基末端激酶（JNK）、细胞外信号调节激酶（ERK）的蛋白表达量,并用ELISA技术测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的含量。 结果假手术组50%PWT在手术前后无显著变化（P&rt;0.05）。与组内术前比较,对照组和脂氧素A4 10ng组术后各时间点的50%PWT降低（P<0.05）。与假手术组术后同时间点比较,对照组和脂氧素A4 10ng组术后各时间点的50%PWT较低（P<0.05）。与对照组比较,脂氧素A4 10ng组术后3d［（8.90±2.76）g］、5d［（8.56±2.77）g］的50%PWT较高（P<0.05）。脂氧素A4 100ng组术后2d、3d、4d、5d、6d、7d的50%PWT显著较高（P<0.05）。与假手术组比较,对照组、脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组p-JNK、p-ERK水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较,脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组p-JNK、p-ERK水平明显降低（P<0.05）,且脂氧素A4 100ng组下降更明显（P<0.05）,呈剂量依赖性。各组t-JNK和t-ERK蛋白含量之间比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。与假手术组比较,对照组、脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组TNF-α、IL-1β的表达水平明显升高,TGF-β1的表达水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较,脂氧素A4 10ng组和脂氧素A4 100ng组TNF-α、IL-1β的表达水平明显降低（P<0.05）,TGF-β1的表达水平明显升高（P<0.05）,且脂氧素A4 100ng组的变化更明显,呈剂量依赖性。 结论脂氧素A4能够减轻非压迫性椎间盘突出大鼠的根性神经痛,其机制可能与抑制ERK和JNK活性、下调促炎因子表达水平、上调抗炎因子表达水平有关。     

消退素D1对突出髓核所致根性神经痛的影响

目的研究消退素D1对突出髓核所致根性神经痛的影响及内在机制。 方法选取56只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠，按照随机数字表法分为假手术组、模型组、消退素D1 10ng组、消退素D1 100ng组，每组14只，建立非压迫性椎间盘突出症模型。术后1d、2d、3d，假手术组和模型组分别注射磷酸盐缓冲液（PBS）10μl，消退素D1 10ng组和消退素D1 100ng组分别注射含有消退素D1 10ng和100ng的PBS 10μl。于术前1d及术后连续7d分别检测各组大鼠术侧后肢50%缩足阈值（PWT）。术后7d，取大鼠脊髓组织经酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）和白介素10（IL-10）的蛋白表达量，采用蛋白质印记Western blot法检测脊髓组织中细胞外信号调节激酶（ERK）核转录因子NF-κB/p65（NF-κB/p65）的含量变化。 结果术后1d至7d，模型组大鼠50% PWT较假手术组明显降低（P<0.05）；术后3d、4d、5d、6d、7d，消退素10ng组与模型组比较，50% PWT显著升高（P<0.05）；术后2d、3d、4d、5d、6d、7d，消退素100ng组与模型组比较，50% PWT显著升高（P<0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平明显升高（P<0.05），IL-10的表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组比较，消退素10ng组和消退素100ng组的TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平明显降低（P<0.05），IL-10的表达水平明显升高（P<0.05），且消退素100ng组的蛋白含量下降更显著（P<0.05）。与假手术组比较，模型组p-ERK、NF-κB/p65蛋白水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，消退素10ng组和消退素100ng组p-ERK及NF-κB/p65蛋白水平明显降低（P<0.05），且消退素100ng组降低的更明显（P<0.05）。 结论消退素D1通过调节炎症介质表达及p-ERK和NF-κB/p65通路的活性，促进神经根炎症的消退，为治疗腰椎间盘突出症提供了新的思路。