骨髓单个核细胞移植对大鼠脊髓全横断损伤后髓鞘碱性蛋白表达影响

目的:探讨同种异体骨髓单个核细胞(BMMNCs)移植对脊髓全横断损伤区局部微环境中髓鞘碱性蛋白表达的影响。方法:取8周龄Wistar大鼠45只,雌雄不限、每只体重200~220g,随机分为3组:实验组(n=15)、对照组(n=15)、假手术组(n=15)。对实验组和对照组大鼠建立脊髓全横断损伤动物模型。实验组造模后对脊髓横断处上下两端立即注入骨髓单个核细胞;对照组对脊髓横断处上下两端注入磷酸盐缓冲液(PBS);假手术组不损伤脊髓,仅剪除T8~10棘突和椎板后逐层缝合。于细胞移植后的1d,5d,1w,2w,4w和6w分别行BBB大鼠后肢功能评估来判断脊髓神经功能恢复情况,并采用免疫组织化学检测观察大鼠脊髓髓鞘碱性蛋白的表达。结果:(1)BBB评分结果显示各时间点假手术组均为正常范围,实验组和对照组分值随时间均逐渐增加,且实验组较对照组高(P<0.05),但均未达到正常组水平,术后4周实验组BBB评分较对照组增加显著,差异有统计学意义(P<0.05);(2)免疫组织染色结果显示各时间点实验组和对照组大鼠脊髓中髓鞘碱性蛋白的表达量高于假手术组,且实验组高于对照组(P<0.05)。结论:同种异体的骨髓单个核细胞移植可能改变了局部的微环境并上调了脊髓内髓鞘碱性蛋白的表达。     

睡眠呼吸暂停综合征对血糖、脂代谢及血压的影响

目的:观察睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)对血糖、脂代谢及血压的影响。方法:根据多导睡眠资料将患者分为对照组(AHI<5次/分)55例、OSAS患者组(AHI≥5次/分)45例,所入选者均行24h动态血压监测,测定体质量指数(BMI)、空腹血浆葡萄糖(FPG)、餐后2h血浆葡萄糖(2h PG)、空腹血清胰岛素(FINS)、餐后2h血清胰岛素(2h INS),糖化血红蛋白(Hb A1C)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)及低密度脂蛋白(LDL-C)测定。结果:(1)OSAS组较对照组FPG、2h PG、FINS、2h INS、TC和LDL-C明显增加(P<0.05)。(2)OSAS组较对照组夜间平均收缩压(n SBP)和夜间平均舒张压(n DBP)及24h平均收缩压标准差(24h SBPSD)、日间平均收缩压标准差(d SBPSD)、日间平均舒张压标准差(d DBPSD)、夜间平均收缩压标准差(n SBPSD)有所增加(P<0.05)。(3)OSAS组较对照组的糖尿病、高血压的患病率明显增高(P<0.05)。结论:OSAS患者存在血糖升高,胰岛素抵抗,脂代谢异常,夜间平均收缩压及夜间平均舒张压升高。     

大鼠脊髓损伤后对巢蛋白及突触素Ⅰ表达的影响

目的 探讨同种异体骨髓单个核细胞(BMMNCs)移植对脊髓全横断损伤区局部微环境中巢蛋白和突触素Ⅰ表达的影响及意义.方法 120只清洁级Winstar大鼠(雌雄不拘)随机(随机数字法)取87只分为3组.假手术组29只:切除相应的椎板不损伤脊髓;模型组29只:建立脊髓全横断模型;细胞移植组29只:建立脊髓全横断模型后,给予BMMNCs移植治疗.各组大鼠分别于5d、1周、2周、4周利用免疫组织化学技术、RT-PCR检测脊髓组织中巢蛋白(nestin)与突触素Ⅰ (Synapsin Ⅰ)的表达变化及利用MIAS-2000图像处理系统分析观察nestin和Synapsin Ⅰ阳性产物在脊髓的分布,并测量阳性产物的吸光度值.采用SPSS 17.0统计分析数据,组间比较,方差齐者采用完全随机设计资料的方差分析,样本间的两两比较用q检验;方差不齐者用成组设计多个样本比较的秩和检验(Kruskal-Wallis法),样本间两两比较的秩和检验(Nemenyi法);P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 免疫组织染色、RT-PCR及图像处理系统分析结果显示模型对照组在伤后约5d可见损伤区域附近nestin表达升高,2周达高峰,4周后nestin表达明显下调,细胞移植组在脊髓伤5d可见损伤区域附近nestin表达升高,1周达高峰,4周后nestin表达明显下调,且各时期与假手术组、模型组相比较差异均具有统计学意义(P＜0.05).损伤5d后,在损伤区域出现突触素Ⅰ的表达,但模型组、细胞移植组突触素Ⅰ的表达量在各时间点均低于假手术组,细胞移植组高于模型组(P＜0.01).结论同种异体的骨髓单个核细胞移植可能改变了局部的微环境并上调了脊髓内巢蛋白和突触素Ⅰ的表达.     

含钆化合物的羟基磷灰石复合支架制备的实验研究

目的 采用含有钆元素的化合物及羟基磷灰石（HA）为原料,通过化学合成法制备一种新型纳米含钆化合物的羟基磷灰石复合支架,为组织工程中软骨损伤修复提供新型工程支架。方法 采用均相沉淀法进行制备含钆化合物的羟基磷灰石复合支架,并自备成圆柱形立体结构,对含钆化合物的羟基磷灰石复合支架进行外观大体形态及空隙率观察评估,进一步在电镜下观察孔隙率、形态结构是否满足实验要求。结果 制备的含钆化合物的羟基磷灰石复合支架,外观形态良好,空隙率较大,大孔结构有利于骨组织生长;电镜下扫描支架内可见孔隙为蜂窝状结构,相互连通性良好,行表面观察见羟基磷灰石颗粒呈不规则多边形,相互紧密排列,但个别颗粒之间有微孔形成。如此大孔隙与微孔隙共存的三维立体结构,为种子细胞的增殖、分化提供了良好的支架条件。结论 本实验制备的含钆化合物的羟基磷灰石复合支架材料,其外观及电镜下已经具有很好的孔隙率及大孔径的三维立体微孔结构,但是其支架的细胞毒性及共培养后细胞增殖能力的影响,仍需要进一步深入研究。     

胚胎干细胞移植对转化生长因子β1和髓鞘碱性蛋白影响

背景：多项研究证实胚胎干细胞诱导的神经前体细胞能够促进脊髓损伤大鼠功能的恢复。 目的：观察胚胎干细胞经体外诱导培养的神经前体细胞在脊髓损伤大鼠中的作用。 方法：144只大鼠随机分为3组,实验组和对照组建立大鼠脊髓全横断模型,实验组造模后在椎管内损伤区上下两端注射胚胎干细胞衍生细胞;对照组于相同部位注射PBS;假手术组仅行椎板切除,不损伤脊髓,不做其他处理。 结果与结论：对照组和实验组大鼠造模后21 d后,对照组脊髓损伤区域转化生长因子β1表达显著高于实验组（P〈0.05）。各时间点实验组大鼠脊髓中髓鞘碱性蛋白表达量显著高于对照组（P〈0.05）。细胞移植后各时间点实验组BBB评分明显优于对照组（P〈0.05）。提示胚胎干细胞培养诱导分化为神经前体细胞移植后期可降低转化生长因子β1的表达,并可以提高髓鞘碱性蛋白的表达变化,有助于大鼠全横断脊髓损伤的恢复。