慢性粒细胞白血病干细胞microRNA的表达

目的 通过比较慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓的白血病干细胞(LSC)和健康人骨髓正常造血干细胞(HSC)的microRNA (miRNA)表达谱,鉴定在CML LSC表达异常的miRNAs.方法 通过磁珠法分选获得分子表型为CD34+ CD38-的CML LSC和正常HSC.使用Exiqon人miRNA芯片检测miRNA的表达情况.选取差异表达的miRNAs进行qRT-PCR验证.结果 利用Exiqon人miRNA芯片一共检测了1 900个人源miRNAs的表达情况.其中1个miRNA在CML LSC中发生显著的表达上调,46个miRNAs发生显著的表达下调.基于KEGG的pathway显著性分析显示,CML LSC表达下调的miRNAs参与的显著性信号转导通路是神经营养因子信号通路.qRT-PCR检测miR-584-5p、miR-675-3p和miR-431-5p的表达情况与miRNA芯片检测结果一致.结论 鉴定了在人CML LSC中表达异常的miRNAs,为miRNA在CML LSC中的潜在应用奠定基础.     

鸡胚石蜡组织切片免疫组化中的问题探讨及方法改进

目的总结鸡胚组织免疫组织化学染色中的操作经验。方法应用常规免疫组化方法对不同发育时期的鸡胚石蜡组织切片进行免疫组化染色。结果免疫组化的方法检测早期鸡胚发育中的相关抗体的表达定位准确,背景清晰。结论注意鸡胚免疫组化的操作要点,有助于提高鸡胚组织的免疫组化染色质量。     

姜黄素对人肝癌细胞Sk-hep-1抗癌作用的研究

目的:研究姜黄素对人肝癌细胞Sk-hep-1体外抗癌作用,探讨其抗癌作用的分子机制.方法:应用MTT法、DAPI核染色法和细胞周期分析法,检测姜黄素对Sk-hep-1细胞生长和凋亡的影响,并通过RT-PCR方法检测姜黄素对Sk-hep-1细胞抗凋亡基因(Survivin和Bcl-xL)和耐药基因(DRG2和MDR1)mRNA表达的影响.结果:姜黄素抑制Sk-hep-1细胞增殖呈量效关系.姜黄素处理组肝癌细胞Sk-hep-1,HepG2和Hep3B细胞发生不同程度的凋亡,正常肝细胞Chang's liver无明显凋亡.姜黄素处理组Sk-hep-1细胞周期发生变化,G_0/G_1或G_2/M期细胞比例增多.姜黄素处理组Sk-hep-1细胞耐药基因MDR1 mRNA水平显著下降,而抗凋亡基因的表达无明显变化.结论:姜黄素能够抑制Sk-hep-1细胞增殖,并诱导其凋亡,推测可能是通过下调MDR1 mRNA的表达而起作用.     

乡镇卫生院产权制度改革实践与探索；

建国以来 ,以集体经济为依托的乡镇卫生院 ,为农村防病治病 ,保障人民群众身体健康作出了很大的贡献。随着社会主义市场经济体制的逐步建立 ,在计划经济体制下形成的乡镇卫生院管理体制和运行机制已难以适应新时期农村卫生工作的需要 ,虽经采取人事制度、分配制度改革等一系列措施 ,但因没有触及产权制度这一根本因素 ,致使卫生改革难以达到预期效果 ,卫生工作的一些深层次的矛盾日趋激化 ,特别表现在乡镇卫生院已面临着生存和发展困境。沭阳县针对地处苏北经济欠发达地区的实际情况 ,本着政府应“有所为有所不为”的原则 ,按照“狠抓防保一…     

生命科学前沿公共选修课教学探讨

生命科学前沿是我校面向非生物学专业学生开设的公共选修课程。文章就开设生命科学前沿公选课的重要性、课程的教学内容和教学方法等方面进行探讨,并讨论了以后提高教学质量应采取的措施。     

基于GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因小鼠建立CML嵌合小鼠模型

目的 建立慢性粒细胞白血病(CML)的转基因嵌合小鼠模型,为靶向白血病干细胞(LSCs)治疗CML的研究提供良好的动物模型.方法 将Bcr-abl转基因小鼠与SCL-tTA转基因小鼠进行杂交,子代小鼠再与GFP转基因小鼠杂交,PCR鉴定Bcr-abl、tTA和GFP基因三阳性的小鼠(GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠).通过诱导GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表达4周后,取其骨髓白细胞移植至经致死剂量(900 cGy)辐照的FVB/N野生型小鼠.移植3周后,采用Western blotting检测Bcr-abl蛋白表达,流式细胞术检测小鼠外周血GFP+中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓GFP+ LSCs的比例.结果 PCR结果显示,GFP/SCL-tTA/Bcr-abl小鼠骨髓细胞成功植入FVB/N受体小鼠;Western blotting检测结果显示,移植小鼠的骨髓细胞中表达Bcr-abl蛋白;流式细胞术结果显示,移植小鼠的外周血GFP+中性粒细胞比例以及脾脏和骨髓GFP+ LSCs的比例明显升高.结论 成功建立了GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因CML嵌合小鼠模型.     

体外定量测定肿瘤细胞迁移方法的建立及应用

目的建立一种可检测肿瘤细胞迁移率和筛选抗肿瘤细胞迁移药物的新方法。方法将TranswellTM小室迁移法与间接检测细胞数的MTT法相结合,分别定量迁移和未迁移细胞从而计算肿瘤细胞的迁移率。结果利用新方法,能检测6株不同肿瘤细胞的迁移能力;新方法重复性高于传统的计数法;并能测定药物对肿瘤细胞迁移的抑制作用。结论新建的肿瘤细胞迁移测定法是一种敏感和可靠的用于定量测定的肿瘤细胞迁移率的方法,为肿瘤细胞迁移的评估提供了更好的手段。     

依托泊苷对伊马替尼体内清除慢性髓性白血病干细胞的作用研究

目的:探讨依托泊苷(ETO)对伊马替尼体内清除慢性髓性白血病干细胞的作用。方法:以SCL-t TA/BCRABL小鼠为慢性髓性白血病动物模型,采用流式细胞术检测ETO单独或联合伊马替尼治疗慢性髓性白血病小鼠和正常FVB小鼠后,对小鼠骨髓和脾脏中白血病干细胞和外周血中性粒细胞数目的影响。结果:ETO和伊马替尼联合治疗后,SCL-t TA/BCR-ABL小鼠骨髓白血病干细胞数及比例、外周血中性粒细胞比例均明显下降,且下降的程度比两者单用更显著。在野生型FVB小鼠中,ETO和伊马替尼联合治疗对骨髓Lin-Sca1⁺c-kit⁺细胞数和比例、脾脏中性粒细胞比例无明显影响。结论:ETO在体内具有选择性增强伊马替尼靶向清除慢性髓性白血病干细胞的作用。     

研究生《细胞生物学》课程考核方式探索

针对研究生《细胞生物学》课程,教学组总结出“研究论文汇报和提问”的新考核方式。考核前,每位学生检索并选择1篇符合要求的研究性论文,进行阅读并制作PPT形式讲稿。考核时,抽取部分学生进行汇报,教学组现场进行综合评分,该分数即为这部分学生的最终考核成绩;其余学生在聆听汇报时,提出问题并填写在记录表上,教学组对上交的提问记录表和打印的PPT讲稿进行评分,得分即为该部分学生的最终考核成绩。此考核方式能较好测评学生的科研思维,也督促教师在教学过程中加强对研究生科研能力的培养。