早孕期弓形虫感染对大鼠胎盘IL-4、IL-10和IFN-γ表达水平的影响

研究早孕期弓形虫感染对Wistar大鼠胎盘IL-4、IL-10及IFN-γ表达水平的变化,从而探讨弓形虫感染致不良妊娠的分子免疫学机制。将Wistar孕鼠随机分为2组:①对照组12只;②早孕感染组12只。早孕感染组每只孕鼠于妊娠第5天腹腔注射1×105个弓形虫强毒株(RH株)速殖子,对照组不做任何处理。所有孕鼠均于孕19 d颈椎分离处死,无菌获取胎盘,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-ti me PCR)及酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其胎盘IL-4、IL-10及IFN-γ mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:①实验组与对照组IL-4、IL-10及IFN-γmRNA相对表达水平分别为(0.006±0.010)、(0.119±0.080)、(0.82±0.354)和(0.596±0.444)、(0.478±0.224)、(0.297±0.180),三者之间均具有显著性差异(P<0.01);②实验组与对照组IL-4、IL-10及IFN-γ蛋白表达水平分别为(4.63±1.26)、(239.24±83.16)、(105.47±67.88)和(2.40±1.33)、(103.03±79.72)、(208.02±74.95),三者之间均具有显著性差异(P<0.01)、(P<0.05)、(P<0.05);③实验组与对照组mRNA水平IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10分别为(390.67±264.12)(37.65±21.10)和(1.31±0.96)、(0.79±0.60)两者之间均具有显著性差异(P<0.01);④实验组与对照组蛋白水平IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10分别为(176.51±212.95)、(7.26±8.81)和(23.09±12.95)、(0.44±0.21)。两者之间均具有显著性差异(P<0.01)、(P<0.05)。大鼠早孕期弓形虫感染后,胎盘局部Th1型细胞因子表达增高,Th2型细胞因子表达降低,打破了正常妊娠所需的Th1/Th2平衡状态,使平衡倾向于Th1,可能是弓形虫孕期感染致不良妊娠的重要分子机制之一。     

埃博拉病毒感染性标本在生物安全三级实验室的临床检验与生物安全防护

本文参考美国疾病预防控制中心的最新资讯和中国疾病预防控制中心制定的《埃博拉出血热个人防护指南(第二版)》,介绍当前在生物安全三级实验室开展埃博拉病毒感染者血液标本临床检验策略的最新研究进展,主要包括临床检验的操作流程以及操作人员必要的生物安全防护要点。     

弓形虫感染对人早孕母胎界面细胞因子转录水平的影响

研究弓形虫感染时IL-4、IL-10在绒毛滋养层细胞和IFN-γ在蜕膜NK细胞中mRNA水平的变化,从而探讨弓形虫感染致不良妊娠的分子免疫机制。选取正常妊娠5~10周妇女行人工流产术后的绒毛及蜕膜组织14例,利用绒毛组织分离滋养层细胞和蜕膜组织分离蜕膜NK细胞。分别将绒毛滋养层细胞和蜕膜NK细胞平均分为实验组和对照组,加入弓形虫培养和单独培养48 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测滋养层细胞IL-4、IL-10 mRNA表达水平和蜕膜NK细胞IFN-γmRNA表达水平。结果:实验组和对照组IL-4、IL-10、IFN-γmRNA平均表达水平分别为(0.05±0.02)、(0.06±0.03)、(0.33±0.09)和(0.31±0.13)、(0.18±0.06)、(0.08±0.03),三者之间均具有显著性差异(P<0.05、P<0.01、P<0.05);实验组IFN-γ/IL-10、IFN-γ/IL-4的比值分别为(3.96±0.84)和(3.21±0.41),对照组则分别为(0.60±0.21)、(0.78±0.25),两组间同样均具有显著性差异(P<0.01、P<0.01)。早孕期弓形虫感染可致母胎界面Th1型细胞因子表达增高,Th2型细胞因子表达降低,从而打破正常妊娠状态下二者的平衡,可能是早孕期弓形虫感染导致不良妊娠的重要分子机制。     

早孕期弓形虫感染对大鼠胎盘RT.BMl及RTl-E基因转录的影响

通过检测正常妊娠和早孕期弓形虫感染的Wister大鼠胎盘RT.BMl和RTl-E mRNA的表达水平,发现二者在正常妊娠中的规律,进而探索早孕期弓形虫感染对胎盘RT.BMl和RTl-E mRNA表达的影响,以阐明弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制.将48只孕鼠随机分为感染组和正常组,每组24只.感染组于妊娠第5天腹腔注射1×105个弓形虫强毒株(RH株)速殖子/只,正常组不作任何处理.两组于孕第9、13、15、17天分别处死6只孕鼠,无菌剖腹,观察胎鼠情况,计数死胎及活胎数.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测胎盘RT.BMl和RTl-E mRNA表达水平.结果:①正常组活胎数204只,死胎3只,死胎率1.4%,感染组活胎数133只,死胎27只,死胎率16.9%,死胎率明显高于正常组(P<0.05);②正常组RT.BMl mRNA在孕第9、13、15、17天的相对表达水平为(3.21±1.32)、(4.35±1.29)、(3.96±1.49)、(11.1±2.15),前三个时间点表达水平基本一致(P>0.05),第17天则明显增高(P<0.01);RTl-E mRNA在各时间点相对表达水平为(0.79±0.45)、(2.15±1.03)、(2.13±1.74)、(2.394±1.85),第9天明显低于后三个时间点(P<0.05);③感染组各时间点RT.BMl mRNA相对表达水平为(12.4±2.86)、(11.5±3.67)、(6.89±1.59)、(17.3±3.06),第9、13、15天与正常组相比有显著差异(P<0.01);而RTl-E mRNA分别为(1.834±0.886)、(4.72±1.59)、(4.24±2.26)、(3.83±2.26),第9、13、15天与正常组相比均有显著差异(P<0.01)、(P<0.05)、(P<0.01).结果显示弓形虫感染量合适,动物模型成功建立;RT.BMl和RTl-E mRNA在大鼠胎盘的表达水平与妊娠进展密切相关;大鼠早孕期弓形虫感染可致胎盘局部RT.BMl和RTl-E表达增高,从而打破正常妊娠所需的胎蕊局部免疫平衡状态,可能是早孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子机制之一.     

维生素D在NOD.H-2^h4小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎中的作用研究

目的探讨维生素D在NOD.H-2^h4小鼠(4周龄、平均体质量约20 g)实验性自身免疫性甲状腺炎中的作用。方法选取45只雌性NOD.H-2^h4小鼠随机分为3组:对照组NOD.H-2^h4小鼠(15只)同步用无菌双蒸水喂养8周;实验组NOD.H-2^h4小鼠(15只)使用含0.005%(50 mg/L)碘化钠的无菌双蒸水(大约为100倍正常碘的摄入量)喂养8周,同时每2天给予无菌花生油5μg/kg口服;维生素D干预组NOD.H-2^h4小鼠(15只)使用含0.005%(50 mg/L)碘化钠的无菌双蒸水(大约为100倍正常碘的摄入量)喂养8周,同时每2天给予5μg/kg活性维生素D3口服。所有NOD.H-2^h4小鼠均在实验第8周后经麻醉处死。各组NOD.H-2^h4小鼠血液标本抽取后离心,分离血清,采用电化学发光免疫分析法检测甲状腺素、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平;采用ELISA检测NOD.H-2^h4小鼠血清白细胞介素(IL)-17、IL-23水平;留取NOD.H-2^h4小鼠甲状腺,HE染色观察淋巴细胞浸润情况,并计算自身免疫性甲状腺炎的发生率。结果实验组和维生素D干预组NOD.H-2^h4小鼠自身免疫性甲状腺炎发生率分别为93.3%和86.6%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,实验组和维生素D干预组NOD.H-2^h4小鼠血清TgAb、TPOAb、IL-17、IL-23水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与实验组比较,维生素D干预组NOD.H-2^h4小鼠甲状腺组织形态破坏及淋巴细胞浸润程度明显降低,血清TgAb、TPOAb、IL-17、IL-23水平均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论维生素D可能与自身免疫性甲状腺炎的发病及严重程度有关。     

弓形虫感染致早孕蜕膜自然杀伤细胞亚群的变化

目的通过检测弓形虫感染后早孕蜕膜自然杀伤(NK)细胞亚群的变化,探讨其与弓形虫感染致不良妊娠结局的相关性。方法无菌获取10例正常健康早孕孕妇蜕膜组织,分离并纯化蜕膜NK细胞,培养24 h后平均分为2组:实验组细胞与弓形虫强毒株(RH株)共培养48 h,对照组加等量生理盐水。流式细胞分析实验组和对照组蜕膜NK细胞亚群的变化。结果实验组蜕膜NK细胞CD56 CD16-亚群所占比例为(48.83±21.99)%,对照组为(57.70±18.97)%;实验组CD56 CD16 亚群所占比例为(11.48±10.70)%,对照组为(4.45±4.24)%;实验组CD56 CD16-/CD56 CD16 比值为(10.92±17.84)%,对照组为(23.37±19.98)%;以上差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组蜕膜NK细胞CD56 亚群所占比例为(60.31±22.53)%,对照组为(62.16±19.76)%,两组之间无统计学差异(P>0.05)。结论早孕期弓形虫感染可致蜕膜NK细胞CD56 CD16-亚群所占比例下降,且CD56 CD16 亚群所占比例上升,打破了正常妊娠时两者之间的平衡状态,这可能是早孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子机制。     

早孕期弓形虫感染对大鼠胎盘RT.BM1及RT1-E基因转录的影响

通过检测正常妊娠和早孕期弓形虫感染的Wister大鼠胎盘RT.BM1和RT1-E mRNA的表达水平,发现二者在正常妊娠中的规律,进而探索早孕期弓形虫感染对胎盘RT.BM1和RT1-E mRNA表达的影响,以阐明弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制。将48只孕鼠随机分为感染组和正常组,每组24只。感染组于妊娠第5天腹腔注射1×105个弓形虫强毒株(RH株)速殖子/只,正常组不作任何处理。两组于孕第9、13、15、17天分别处死6只孕鼠,无菌剖腹,观察胎鼠情况,计数死胎及活胎数。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测胎盘RT.BM1和RT1-E mRNA表达水平。结果:①正常组活胎数204只,死胎3只,死胎率1.4%,感染组活胎数133只,死胎27只,死胎率16.9%,死胎率明显高于正常组(P<0.05);②正常组RT.BM1 mRNA在孕第9、13、15、17天的相对表达水平为(3.21±1.32)、(4.35±1.29)、(3.96±1.49)、(11.1±2.15),前三个时间点表达水平基本一致(P>0.05),第17天则明显增高(P<0.01);RT1-E mRNA在各时间点相对表达水平为(0.79±0.45)、(2.15±1.03)、(2.13±1.74)、(2.39±1.85),第9天明显低于后三个时间点(P<0.05);③感染组各时间点RT.BM1 mRNA相对表达水平为(12.4±2.86)、(11.5±3.67)、(6.89±1.59)、(17.3±3.06),第9、13、15天与正常组相比有显著差异(P<0.01);而RT1-E mRNA分别为(1.83±0.886)、(4.72±1.59)、(4.24±2.26)、(3.83±2.26),第9、13、15天与正常组相比均有显著差异(P<0.01)、(P<0.05)、(P<0.01)。结果显示弓形虫感染量合适,动物模型成功建立;RT.BM1和RT1-E mRNA在大鼠胎盘的表达水平与妊娠进展密切相关;大鼠早孕期弓形虫感染可致胎盘局部RT.BM1和RT1-E表达增高,从而打破正常妊娠所需的胎盘局部免疫平衡状态,可能是早孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子机制之一。     

电化学发光法检测单纯疱疹病毒2 IgG抗体应用评估

目的对电化学发光法(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测单纯疱疹病毒2(HSV-2)IgG抗体结果进行比较分析,评价ECLIA的性能及临床应用价值。方法应用罗氏诊断公司ECLIA与爱尔兰Trinity公司ELISA试剂分别检测400份血清标本中的HSV-2特异性IgG抗体,检测结果不一致的标本用欧蒙生物技术有限公司的抗HSV-2 IgG抗体检测试剂进行复核。结果 ELISA和ECLIA检测阳性率分别为39.0%、37.8%;以ELISA为参照,ECLIA假阴性率为1.3%,假阳性率为0.8%,相对敏感性为96.8%,相对特异性为98.8%,二者的符合率为98.0%。使用欧蒙生物技术有限公司试剂对13份检测结果不一致(包括2个不确定结果)的标本进行了复核,其中6份标本结果支持ECLIA,5份标本结果支持ELISA。结论 ECLIA和ELISA检测HSV-2 IgG抗体结果符合情况良好,罗氏"HSV-2 IgG抗体检测试剂(ECLIA)"是一种快速、准确、敏感性和特异性高的试剂,可以应用于临床。     

上海闵行区变应性鼻炎患者血清过敏原分析

目的 分析上海闵行区变应性鼻炎(AR)患者过敏原分布情况.方法 选取2019年1-12月在复旦大学附属上海市第五人民医院耳鼻咽喉科就诊的血清过敏原检测结果中至少有一种特异性免疫球蛋白E(IgE)为阳性的319例AR患者,比较不同性别、年龄、季节其过敏原阳性率的分布差异.结果 319例AR患者年龄高峰为18～45岁,其中总IgE阳性者为197例(61.76％).排名前3位的吸入性过敏原分别为尘螨(246例,77.12％)、猫毛(36例,11.29％)、屋尘(25例,7.84％).最常见的食入性过敏原为蟹(25例,7.84％),其次为羊肉(17例,5.33％).屋尘、艾蒿、羊肉的特异性IgE阳性率在不同季节之间差异有统计学意义(P<0.05),尘螨、猫毛、蟹、黄豆、海鱼、狗上皮的阳性率在不同季节差异无统计学意义(P>0.05).狗上皮阳性率在不同年龄组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 上海闵行区AR患者以青年为主,最常见的过敏原为尘螨,应以此为基础积极展开宣传、防治等工作.