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肝硬化不同病期ET-1,NO对离体肝脏血流动力学的调节作用 总被引:1,自引:4,他引:1
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丹参对内皮素-1介导的肝星状细胞Ca2+浓度变化的影响机制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨丹参降门脉压作用是否与抑制ET-1介导的HSCs[Ca2 ]i升高有关.方法:制备丹参浸膏借助激光共聚焦显微镜(LSCM)观察丹参对ET-1介导HSCs[Ca2 ]i升高的影响.结果:含钙细胞培养液(A液)中加入浓度梯度的ET-1后,荧光强度逐渐增加,作出累积反应曲线后,EC50值约在1.1×10-9mol/L,此浓度的ET-1作用于A液和B液,钙波持续时间相比有显著性差异(165.2±10.1 s vs 91.0±7.2 s, P<0.01),而钙峰值相比无显著性差异.丹参预处理A液后加入ET-1,钙波持续时间同ET-1相比有显著性降低(69.1±12.5 svs165.2±10.1 s,尸<0.01).丹参预处理B液后加入ET-1,同丹参处理A液组相比钙峰值和钙波持续时间均无显著性差异(P>0.05).丹参预处理后,加入KCl可降低其诱发的[Ca2 ]i的升高,钙峰值(78.0%±6.1%→26.3%±1.2%,P<0.01)和钙波持续时间(70.8±10.4 s→15.9±5.1 s,P<0.011均明显下降.结论:丹参可抑制ET-1引发的细胞内钙释放,而与外钙内流关系不大,同时可抑制KCl诱发的钙内流,表明丹参具有电压依赖性钙通道阻断作用. 相似文献
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目的观察小干扰RNA(siRNA)转染Hela细胞后,对IER5基因抑制效果,筛选出高效的siRNA转染质粒。方法利用siRNA设计软件,将设计好的RNA片断插入到siRNA表达质粒载体PsilencerTM 3.1-H1 hygro中,测序正确后转染至Hela细胞中。利用Real-time PCR的方法 ,测定siRNA对Hela细胞中IRE5的抑制效果。结果在mRNA水平及Western blot测试,IER5-siRNA-Hela细胞的IER5基因mRNA表达抑制效果明显。从细胞形态上讲,IER5-siRNA-Hela细胞与正常Hela细胞相比,IER5-siRNA-Hela细胞比Hela细胞体积大。结论本实验成功的获得了特异性抑制IER5基因的IER5-siRNA-Hela细胞系。 相似文献
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内皮素-1对活化肝星状细胞增殖及钙离子影响的调控机制研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨内皮素(ET -1)对活化的肝星状细胞(HSCs)细胞外信号调节激酶 1(ERK1)表达、细胞周期及细胞内Ca2 影响。方法 采用Western印迹观察不同浓度ET -1对HSCsERK1的表达,采用流式细胞术观察ET -1对细胞周期的影响,并借助激光共聚焦显微镜技术观察ET- 1对HSCsCa2 浓度变化和细胞面积的影响。结果 ET -1可剂量依赖性地抑制HSCsERK1的表达,最高浓度ET -1可显著抑制ERK1表达,同对照组相比下降(10 .91±3.36 ) % (P <0 .0 5 ) ,还可抑制HSCsDNA合成,使增殖指数由(32 .6 3±0 .36 ) %下降至(2 4 .72±0 .12 ) % (P <0 .0 1) ,同时ET- 1可引起HSCs [Ca2 ]i的升高及细胞面积的减少(P <0 .0 5 )。结论 ET- 1对HSCs发挥着促进HSCs收缩与抑制其增殖的双重作用,所以应用药物治疗慢性肝病既要注意抑制ET的收缩效应同时又要兼顾对其本身具有的抑制增殖的双重作用。 相似文献
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RA33/36抗原的提取、半纯化及 相应抗体的检测 总被引:12,自引:2,他引:10
目的 提取、半纯化RA33/ 36抗原 ,探讨RA33/ 36抗体对类风湿关节炎 (RA)诊断的特异性及敏感性。方法 以Ehrlich腹水癌细胞核提取物作粗抗原 ,采用肝素 琼脂糖凝胶CL - 6B层析柱对此粗抗原进行分离半纯化。分别用粗抗原和半纯化抗原作抗原 ,免疫印迹法检测 12 0例RA患者、40例红斑狼疮 (SLE)患者、35例干燥综合征 (SS)患者、2 5例系统性硬化症 (SSc)患者、10例混合性结缔组织病 (MCTD)患者和 30例正常对照血清中的RA33/ 36抗体。结果 ①SDS -PAGE示 2种抗原在相对分子质量 (Mr)为 33× 10 3 和 36× 10 3 处均可见条带 ,半纯化抗原杂带较粗抗原明显减少。②与粗抗原相比 ,半纯化抗原免疫印迹反应条带明显减少 ,且特别清晰 ,但阴性和阳性结果相同。③RA36抗体并不总是与RA33抗体以 2条带的形式同时出现。④RA33抗体和RA36抗体对RA诊断的敏感性差异无显著性 ,而特异性RA36抗体优于RA33抗体。⑤RA36抗体与RF、APF、ESR、关节相X线分期、关节功能分级无明显相关性。结论 半纯化抗原可直接用于检测RA33/ 36抗体 ,或用其作质量控制 ;RA36抗体可能是RA的一种可作为标记的特异性抗体 ,应对此抗体进行更深入研究。 相似文献
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肝硬化并发肝性胸水 总被引:5,自引:0,他引:5
肝性胸水 (Hepatichydrothorax)是在肝硬化过程中出现的胸腔积液。肝性胸水常发生于并无心肺疾病的肝硬化失代偿期腹水患者 ,其发生率为 4%~ 10 %[1] 。1 发病机制肝性胸水的发病机制尚欠清楚 ,其发生可能与横膈膜缺陷、腹内压升高及长期卧床等因素有关 ,可引起膈肌腱索部菲薄 ,受胶原纤维过度牵拉而分离 ,形成小疱 ,当外伤、咳嗽等引起腹压突然增高时致小疱破裂产生缺损 ,腹水即可通过膈肌缺损进入胸腔 ,形成胸腔积液。由于左右横膈解剖和淋巴分布的差异 ,加之奇静脉压升高 ,血浆外漏 ,淋巴液经右横膈进入右颈静脉 ,故右侧胸水多见。另… 相似文献
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