HSP70-肿瘤肽复合物的纯化及其对肝癌细胞株HepG-2增殖的作用

目的:应用快速蛋白液相色谱(FPLC)系统从肝癌组织中分离和纯4EHSP70-肽复合物,并研究其对肝癌细胞系HepG-2增殖的影响．方法:将组织进行匀浆、高速离心提取总蛋白后依次进行ConA-Sepharose亲和层析和 DEAE-Sephacel子交换层析分离纯化,所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行蛋白分子质量及性质鉴定,Bradford 法测定蛋白浓度;利用MTT方法检测HSP70- 肽复合物对HepG-2细胞增长的情况．结果:分离、纯化得到的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、考马斯量蓝鉴定为单一带, 分子质量为70 kDa;Western blot结果证实为 HSP70,每10 g组织最终获得1．5 mg的HSP70; HSP70刺激组12,48,72 h与对照组的A值之间有显著差异(0．1 mg／L:t=-0．2500,P=0．00; t=-0．1777,P=0．001:t=-0．3094,P=0．001; 0．5 mg／L:t=-0．2878,P=0．00;t=-0．2044,P= 0．00;t=-0．3285,P=0．00;1 mg／L:t=-0．3118, P=0．00;t=-0．2592,P=0．00;t=-0．1994, P=0．025;5 mg／L:t=-0．4007,P=0．00;t= -0．1302,P=0．016;t=-0．2537,P=0．005),细胞存活率明显高于对照组(P<0．01)．结论:使用本分离纯化方法可获得高纯度 HSP70肽复合物;HSP70肽复合物可以促进 HepG-2细胞的生长．     

缺锌对生长期小鼠肾脏金属硫蛋白-1表达的影响

目的在成功制备缺锌小鼠动物模型的基础上,观察缺锌对生长期小鼠肾脏中金属硫蛋白-1(MT-1)定位、定量表达的影响,初步探讨锌缺乏影响肾发育的机制。方法应用免疫组织化学技术观察缺锌小鼠肾组织中MT-1的定位表达变化。应用蛋白印迹技术检测缺锌小鼠肾组织中MT-1蛋白表达量变化。结果免疫组化结果显示:在小鼠肾脏MT-1定位表达于近端小管上皮细胞胞浆内,分布较均匀,少量分布在远端小管和集合管上皮细胞胞浆,肾小球无明显表达。蛋白印迹结果显示:与对照组相比,缺锌组小鼠肾脏MT-1表达量明显下降。结论发育期锌缺乏可使肾组织中MT-1蛋白表达降低,从而影响肾脏的发育和功能。     

GDF-5诱导hADSCs分化为软骨样细胞

目的分离培养人脂肪干细胞(hADSCs),用不同浓度GDF-5进行诱导,观察细胞形态变化及检测相关蛋白的表达,评价其是否具有软骨样细胞的特性。方法取人抽脂术后的无菌脂肪组织,酶消化法分离培养hADSCs,观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖能力。用含0、50、100ng/mlGDF-5的软骨诱导液培养,观察形态变化,检测Ⅱ型胶原及GAG的表达。结果 hADSCs呈长梭形,P10以后仍具有较强的增殖能力。经GDF-5诱导的hADSCs逐渐变为圆形、多角形,部分细胞聚集生长,形成软骨样结节;诱导28d的细胞Ⅱ型胶原表达阳性,甲苯胺蓝将GAG染成蓝色,但100ng/mlGDF-5诱导组阳性表达明显高于50ng/ml诱导组。结论 hADSCs在100ng/mlGDF-5的诱导下可分化为软骨样细胞。     

妇科急腹症误诊18例分析

妇科急腹症是妇科的急、重症,且患者就诊时多病情危重,腹痛剧烈,拒按,妇科盆腔触诊不满意,给诊断带来很大困难,往往导致误诊,因此,在临床工作中,明确妇科急腹症的诊断及鉴别诊断极其重要,以免延误治疗,本文回顾性分析我院2004-01-2006-12诊治妇科急腹症138例,     

IAP测定对结直肠癌的诊断意义研究

用放免法测定结直肠癌患者外周血免疫抑制酸性蛋白（ＩＡＰ）含量及白细胞总数，中性粒细胞／淋巴细胞比值。结果发现，其皆随结直肠癌病期进展而逐渐增高，ＩＡＰ含量与中性粒细胞／淋巴细胞比值呈值直线相关，提示检测外周血ＩＡＰ含量可预测直肠癌患者病期。     

锌缺乏对神经病理性疼痛模型小鼠行为学的影响

目的研究饮食锌缺乏对神经病理性疼痛模型小鼠痛域的影响。方法制备饮食锌缺乏小鼠,采用小鼠坐骨神经分支选择损伤模型,金属自显影和原子吸收光谱检测小鼠脊髓后角锌稳态,检测小鼠痛域。结果 AMG结果证实,与假手术组相比,模型组小鼠和锌缺乏组小鼠脊髓后角游离锌离子减少,与模型组小鼠相比,锌缺乏小鼠脊髓后角游离锌离子减少。原子吸收光谱结果表明,锌缺乏组小鼠总锌含量较假手术组减少。痛域检测结果表明,锌缺乏小鼠痛域下降。结论锌离子可能参与小鼠脊髓后角痛觉专递。     

姜黄素对癫痫小鼠海马脑损伤的保护作用

目的研究姜黄素对匹罗卡品诱导的癫痫小鼠海马新生神经元和细胞凋亡的影响。方法姜黄素预处理后,小鼠腹腔注射匹罗卡品建立小鼠癫痫模型,应用新生神经元标记物双皮层蛋白(doublecortin,DCX)免疫组织化学染色及TUNEL染色对造模后72h的模型小鼠海马进行检测。结果 DCX免疫组织化学染色结果表明,与对照组相比,模型组及姜黄素处理模型组小鼠海马齿状回DCX阳性细胞明显减少;与模型组相比,姜黄素处理模型组小鼠海马齿状回DCX阳性细胞明显增多。TUNEL染色结果表明,与对照组相比,模型组及姜黄素处理模型组小鼠海马齿状回TUNEL阳性细胞明显增多;与模型组相比,姜黄素处理模型组小鼠海马齿状回TUNEL阳性细胞明显减少。结论姜黄素可能对匹罗卡品诱导的癫痫小鼠海马神经元有保护作用。     

肿瘤干细胞研究国际发展态势：基于国际数据库的文献检索结果分析

背景：肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体,具有自我更新能力和不定向分化潜能,肿瘤干细胞学说认为,肿瘤干细胞是肿瘤形成及其不断生长的根源。 目的：通过对汤森路透Web of Science数据库、美国NIH基金及北美临床试验注册库有关肿瘤干细胞相关文献的计量学分析,得出成肿瘤干细胞国际动态的研究趋势。 设计：文献计量学分析。 资料提取：由第一作者检索汤森路透Web of Science数据库,美国NIH基金在线查询网站(NIH Research Portfolio Online Reporting Tools)及北美临床试验注册库(ClinicalTrials.gov)有关肿瘤干细胞的文献,基金资助项目,以及专利情况,分析其研究进展。检索文献时间范围为2002-01/2011-12。数据下载日期为2011-12-18。 入选标准：纳入标准：①经同行评议的肿瘤干细胞研究的已发表文章,包括研究原著,综述,会议记录,会议摘要。②与肿瘤干细胞相关的基金资助项目。③与肿瘤干细胞研究相关的临床试验注册数据库。排除标准：①需采用手工检索和电话检索方式收集的文章。②未正式出版的文章。③在收录数量之外排除勘误类文献类型。 主要数据的判断指标：①文献收录总量。②文献类型。③学科类型。④国家分布。⑤基金资助机构。⑥发文机构。⑦高被引文章。⑧来源期刊。⑨NIH在研资助项目和机构。⑩北美临床试验注册数据信息。 结果：①汤森路透Web of Science数据库过去10年共收录肿瘤干细胞研究相关文献3 642篇,2002年仅发表并收录肿瘤干细胞相关研究10篇,从2007年开始文献数量成倍增长,2011年收录该领域的相关文献927篇,已是2002年92.7倍。其中研究类文章共收录2 033篇。且集中以细胞生物学、生物化学分子生物学和动物实验研究类文献为主要研究方向。②目前已发表的文献美国为主,占全球相关领域发稿量的44.878%。中国在过去10年间被收录文章总量中排名第2,共发表375篇相关文章,占全球相关文章的10.299%。相关研究主要由美国国立卫生研究院、中国国家自然科学基金和美国国立癌症研究所资助。其高被引文章主要发表在Nature《自然》、Cancer Research《癌症研究》、Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America《美国科学院院刊》和Cell Stem Cell《细胞干细胞》。③美国国立卫生研究院目前持续对肿瘤干细胞研究提供大量的资金资助,目前仍在资助365项研究,总资助金额超过1亿5千万美元。④全球在北美临床试验注册中心注册肿瘤干细胞相关研究2 958项,其中美国相关研究共注册2 080项,居世界首位。来 自中国的肿瘤干细胞研究的注册项目为30项。 结论：文献分析显示了肿瘤干细胞研究领域的国际发展趋势,为针对肿瘤干细胞的药物研发和治疗方法及癌症的临床治疗提供了可借鉴的参考建议。     

中国肝移植后排斥反应研究的发展趋势

背景：终末期肝病患者可以通过移植全部肝脏或部分肝脏来挽救生命,随着新型免疫抑制药物的出现,肝移植后排斥反应的发生率大幅度降低,使患者的生存率得到明显提高。 目的：对肝移植后排斥反应研究的文献资料趋势进行多层次探讨分析。 方法：以电子检索方式对CNKI数据库学术期刊和博士学位论文数据库2002-01/2011-12收录有关肝移植后排斥反应研究的文献进行分析,采用检索词为“肝移植;排斥反应”,应用数据库的分析功能和Excel软件图表的功能分析数据特征。 结果与结论：在CNKI数据库学术期刊2002/2011收录的文献中,共检索到777篇与肝移植后排斥反应研究相关的文献,从文献数量上看,2006年的文献数量处于顶峰为110篇,2007年《人体器官移植条例》颁布以前处于上升趋势,到2007年开始略有下降。文献的基金资助项目数量比较多,39个基金资助项目文献共有210篇,省级基金资助项目数量为28个,其中广东省的基金项目最多为4个。《中华器官移植杂志》是中国肝移植后排斥反应研究的权威期刊。肝移植后排斥反应的研究主要以大鼠的动物实验为主,移植后急性排斥反应的发生率比较高,强效的新型免疫抑制剂以他克莫司的研究较多。在博士学位论文数据库中检索到90篇相关文献,文献数量、学科类别、研究机构、关键词和基金资助项目结果与CNKI数据库学术期刊文献结果基本相似。     

复杂肾结石经皮肾镜取石术后结石残留的防治

目的总结经皮肾镜取石术（PCNL）术后结石残留的可能原因及处理方法、术后干预措施。方法回顾性分析采用经皮肾镜下钬激光碎石清石术处理复杂肾结石160例患者资料。结果42例二期PCNL取石患者,除1例二期取石结石落入输尿管中术后带双J管同时辅助ESWL治疗,3例结石进入肾脏后下盏,肾镜无法探及未作处置外,其余38例术中在B超和输尿管镜的辅助下全部成功取石。结论术后结石残留、复发原因复杂,处理困难。对于Pc—NL术后结石残留、复发我们的体会是预防为主：①术前明确结石的数目、部位、大小,肾盂、肾盏形态和肾功能情况;②碎石过程中,首先解除肾孟或输尿管梗阻,放置双J管后再处理其他结石;③提高结石碎石率;④术中应用超声及x线检查可以帮助确定有无残石;⑤有针对性地选择饮食干预、药物治疗能降低PCNL术后结石复发的比率。