环磷酰胺致大鼠卵巢储备功能低下的模型对照研究

目的:比较环磷酰胺不同剂量致大鼠卵巢储备功能低下,对比分析出哪种剂量能制备出更加理想的大鼠卵巢储备功能低下的模型。方法:将40只有正常周期的SD雌性大鼠随机分为4组:环磷酰胺高、中、低剂量组(分别以浓度计90、75、50mg/kg)和阴性对照组(空白),每组10只。除空白组外,环磷酰胺组均按照计量腹腔注射一次。造模结束后14d,处死大鼠,检测各组大鼠血清性激素及AMH水平,观察大鼠动情周期的变化及各组大鼠卵巢组织形态学变化,对比各组大鼠卵巢和子宫的质量。结果:(1)各组大鼠血清激素及AMH比较:与空白组比较,环磷酰胺高、中、低剂量组致雌性大鼠FSH水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.05),致雌性大鼠E2、AMH水平均显著降低,差异有统计学意义(P0.05),其中环磷酰胺中剂量组LH水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺中剂量组比较,各组大鼠FSH、LH水平均显著降低,E2、AMH水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.01)。(2)各组大鼠卵巢和子宫组织的质量:与空白组比较,环磷酰胺高、中、低剂量组大鼠卵巢质量均下降,差异有统计学意义(P0.05),环磷酰胺高、中剂量组大鼠子宫质量均下降,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺中剂量组比较,空白组及高、低剂量组大鼠卵巢质量均下降,差异有统计学意义(P0.01),空白组及低剂量组大鼠子宫质量均下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论:环磷酰胺造成大鼠卵巢功能受到损害,中剂量环磷酰胺可以制备出更加理想的大鼠卵巢储备功能低下的模型。     

从肾论治卵巢储备功能低下

对卵巢储备功能低下的基本概念进行了简要描述和概括,从中医和现代医学两个角度研究和分析了当前卵巢储备功能低下的病因病机。因现代医学对卵巢储备功能的认识还不完善,尚处于对激素依赖的基础阶段,故文章描述了卵巢储备功能低下的诊断标准,并着重介绍了以补肾调冲方为首的中医药在治疗卵巢储备功能低下的研究当中逐渐形成了自己独特的治疗特色,有着越来越广阔的发展前景。从中医角度了解该疾病可以更好地探索其真正的发病特点,中医药在改善卵巢储备功能、增强子宫内膜的容受性、提高卵巢对促性腺激素的反应性等方面均具有较大的优势。运用中医药治疗卵巢储备功能低下可以改进现代医学在治疗卵巢储备功能问题方面的不足之处,为相关的临床诊疗提供更多的理论经验和思路。     

坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠卵巢GDF-9、Egr-1的影响

目的:观察预防性应用坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠血清性激素FSH、LH、E2、AMH水平的影响以及对卵巢GDF-9(生长分化因子9)、Egr-1(早期生长反应基因)基因及蛋白表达的影响,探讨坤泰胶囊对环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠的治疗作用及作用机制。方法:将60只12周龄SD雌性大鼠随机分为空白组、环磷酰胺模型组(模型组)、坤泰胶囊组(分设高中低剂量)、结合雌激素组。空白组正常喂养;模型组用环磷酰胺腹腔注射法建立卵巢储备功能低下大鼠模型~([1]);各给药组于造模同时分别给予不同剂量的坤泰胶囊及结合雌激素片灌胃。实验期间观察大鼠行为学改变,行阴道涂片观察大鼠动情周期的变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清性激素AMH及FSH、LH、E2水平变化;光镜下观察卵巢形态与卵泡数;实时荧光定量(RT-PCR)检测大鼠卵巢GDF-9、Egr-1m RNA表达水平的变化;免疫组化法检测大鼠卵巢GDF-9、Egr-1蛋白表达水平的变化。结果:坤泰胶囊能够降低模型大鼠体内性激素FSH、LH的水平,升高E2及AMH水平,并且能够增加大鼠卵巢中GDF-9、EGR-1蛋白及m RNA表达,修复大鼠受损的卵巢组织结构,改善卵巢血供,减少卵泡闭锁,提高成熟卵泡存在数量,改善大鼠动情周期及行为学变化。结论:预防性应用坤泰胶囊,可有效提升卵巢敏感性,治疗效果与西药结合雌激素片无明显差异。     

坤泰胶囊对卵巢储备功能低下大鼠的治疗作用及对卵巢GDF-9、Egr-1表达的影响

目的 探讨坤泰胶囊对注射用环磷酰胺致卵巢储备功能低下大鼠的治疗作用及机制。方法 将60只12周龄SD雌性大鼠随机分为对照组、模型组和坤泰胶囊高、中、低剂量（1.2、0.6、0.3 g/kg）组、结合雌激素片组,ip注射用环磷酰胺建立卵巢储备功能低下大鼠模型,各给药组于造模14 d后分别ig给药,连续给药36 d。观察大鼠一般状态、体质量改变,定期行阴道涂片观察大鼠动情周期的变化;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清性激素抗穆勒管激素（AMH）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成激素（LH）、雌二醇（E₂）水平变化;光镜下观察卵巢形态与卵泡数;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测大鼠卵巢生长分化因子9（GDF-9）、早期生长反应因子1（Egr-1）mRNA表达水平的变化;免疫组化法检测大鼠卵巢GDF-9、Egr-1蛋白表达水平的变化。结果 与模型组比较,坤泰胶囊组大鼠精神逐渐好转,饮食恢复正常,毛色有光泽,大便色深;体质量渐增,差异显著（P<0.05）;动情周期紊乱得到明显改善（P<0.05）;卵巢存在成熟卵泡,卵泡腔内卵子生长良好;大鼠血清FSH、LH水平明显降低,E₂、AMH水平明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;GDF-9、Egr-1蛋白及基因表达明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）,且作用均呈剂量相关性,高剂量组治疗效果与结合雌激素片无明显差距。结论 坤泰胶囊能够修复大鼠受损的卵巢组织结构,提高成熟卵泡存在数量,改善大鼠动情周期及激素水平,机制可能与增加GDF-9、Egr-1表达相关。     

坤泰胶囊对卵巢早衰大鼠的治疗作用及其机制研究

目的 观察坤泰胶囊对卵巢早衰模型大鼠的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法 将40只SD雌性大鼠随机分为4组：对照组、模型组、坤泰胶囊组、结合雌激素片组,除对照组外,ig 75 mg/kg雷公藤多苷片制备卵巢早衰模型。造模结束后,坤泰胶囊和结合雌激素片组分别以0.6、0.625 g/kg剂量ig给药,连续给药36 d。HE染色观察卵巢形态并进行卵泡计数;采用酶联免疫吸附（Elisa）法检测卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、血清雌二醇（E₂）、及抗缪勒管激素（AMH）水平;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测卵巢组织中血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）mRNA的表达变化。结果 与对照组比较,模型组卵巢内的始基卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡数目明显减少,闭锁卵泡数目明显增多（P<0.05）;E₂、AMH水平明显降低（P<0.05）,FSH、LH水平明显升高（P<0.05）;VEGF、bFGF mRNA水平均明显降低（P<0.05）。与模型组比较,坤泰胶囊组卵巢内的始基卵泡、窦状卵泡、窦前卵泡数目明显增多,闭锁卵泡数目明显减少（P<0.05）;E₂、AMH水平明显升高（P<0.05）,FSH、LH水平明显降低（P<0.05）;VEGF、bFGF mRNA水平均明显升高（P<0.05）。结论 坤泰胶囊通过调节激素水平及上调VEGF、bFGF mRNA表达,修复受损的卵巢组织,促进卵泡的生长发育,从而抑制卵泡过早耗竭。